代谢组学探究刺梨提取物对高尿酸血症大鼠的作用

采用氧嗪酸钾建立高尿酸血症大鼠模型,分别以别嘌醇(阳性药物对照)、低、中、高剂量刺梨提取物对大鼠进行给药,使用LC-MS技术对大鼠血清进行非靶向定性解析,运用多元统计方法进行大鼠血清数据分析并筛选出差异代谢物,通过MBRole 2.0通路分析功能进行代谢途径分析。结果显示,不同剂量的刺梨提取物均能降低高尿酸血症大鼠的血清尿酸浓度,并在血清中鉴定出242种代谢物。在变量重要性投影(VIP)>1、P<0.01以及差异倍数(FC)≥2的标准下,共筛选出44种显著差异代谢物,与差异代谢物相关的代谢途径共有58条。刺梨提取物降低尿酸可能与其对黄嘌呤氧化酶活性的抑制以及对血清脂质和氨基酸代谢的调节有关。

刺梨提取物抗炎活性及对溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用

目的:探讨刺梨提取物治疗肠炎腹泻的作用。方法:用不同质量浓度(1.25,2.50,5.00,10.00,20.00μg/mL)的刺梨提取物处理RAW264.7细胞,MTT法检测细胞活力;用不同浓度刺梨提取物处理RAW264.7细胞,再以脂多糖(LPS)诱导建立细胞炎症模型,利用Griess法检测细胞培养上清液中NO的含量。以3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察造模及药物治疗期间小鼠体征变化,评估疾病活动指数(DAI),测定小鼠结肠长度、结肠湿重指数及脾脏重量;HE染色观察小鼠结肠组织病理学形态;Western blot法及免疫组化法检测小鼠结肠组织中Keap1及Nrf2蛋白水平。结果:刺梨提取物质量浓度≤10μg/mL时对细胞活力无显著影响(P>0.05);刺梨提取物可抑制NO的释放,随着给药浓度的增加,抑制作用越明显(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,刺梨提取物各组小鼠的结肠长度较长,结肠湿重指数、脾脏重量及DAI分数降低(P<0.05或P<0.01);HE染色结果显示刺梨提取物对UC小鼠肠道黏膜层显示出了较好的保护作用;Western blot及免疫组化结果显示刺梨提取物能下调Keap1的表达水平,上调Nrf2的表达水平。结论:刺梨提取物具有较好的体外抗炎活性,对溃疡性结肠炎小鼠有治疗作用。

夏季高温条件下饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅生长性能、脂质代谢及肝脏中热休克蛋白70基因表达的影响

本试验旨在研究夏季高温条件下饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅生长性能、脂质代谢及肝脏中热应激蛋白70(HSP70)基因表达的影响。挑选28日龄、体重相近的健康皖西白鹅150只,随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组,每组5个重复,每个重复10只鹅。对照组试验鹅饲喂基础饲粮,试验1组和试验2组试验鹅分别饲喂在基础饲粮中添加100和200 mL/kg刺梨提取物的试验饲粮。预试期7 d,正试期14 d,试验期间最高气温37℃,最低气温24℃,日平均气温31.6℃。饲喂2周后,每个重复挑选1只鹅屠宰,采集血样,并分离出肝脏,测定血清脂质代谢指标和肝脏中HSP70基因的相对表达量。结果表明:饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅的平均日采食量和平均日增重均无显著影响(P>0.05),但添加200 mL/kg刺梨提取物可显著降低料重比(P<0.05);饲粮中添加100和200 mL/kg刺梨提取物均可显著提高血清高密度脂蛋白含量(P<0.05),但对血清总胆固醇和甘油三酯含量无显著影响(P>0.05);与对照组相比,试验1组和试验2组肝脏中HSP70基因的相对表达量均极显著提高(P<0.01),同时试验1组肝脏中HSP70基因的相对表达量还极显著高于试验2组(P<0.01)。由此得出,在夏季高温条件下,在皖西白鹅饲粮中添加刺梨提取物可提高饲料转化率、调节脂质代谢、上调肝脏中HSP70基因的表达,具有较明显的抗应激效果,且添加量为100 mL/kg时的抗应激效果优于添加量为200 mL/kg时。

刺梨提取物影响小鼠抗疲劳及耐缺氧能力的研究

目的考察刺梨全果提取物的抗疲劳、耐缺氧作用。方法采用小鼠力竭游泳实验和小鼠常压耐缺氧实验,考察连续21天灌胃给予刺梨提取物对小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力的影响,并测定服用刺梨提取物后肝糖原和肌糖原的变化,检测运动后血尿素氮、血乳酸含量和乳酸脱氢酶活力的变化。结果刺梨提取物2.0 g/kg及1.0 g/kg组小鼠力竭游泳时间显著延长(P<0.01),0.5 g/kg组小鼠耐缺氧存活时间显著延长(P<0.05)。并且服用刺梨提取物后,小鼠肝糖原含量显著增加(P<0.05),运动后血尿素氮生成显著减少(P<0.01),血乳酸积累显著减少(P<0.001)。结论刺梨提取物能显著增强小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力,增加机体糖原储备,提高有氧糖酵解水平是其发挥作用的可能机制。

刺梨提取物(CL)抗肿瘤作用

目的:观察刺梨提取物(CL)的抗肿瘤作用并探讨其机制。方法:应用艾氏腹水癌(EAC)小鼠模型观察CL的体内抗肿瘤作用。通过MTT法和台盼蓝拒染法绘制细胞生长曲线研究CL抗人子宫内膜腺癌(JEC)作用。用全自动生化分析仪测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,测定NBT还原能力以了解CL对肿瘤细胞的诱导分化作用。通过AO/EB荧光染色法和流式细胞仪检测,分析CL对肿瘤细胞凋亡的影响。采用流式细胞仪检测CL对肿瘤细胞增殖周期的影响。结果:与阴性对照组比,CL 10μg.mL-1化疗组EAC小鼠的寿命延长(P<0.05),胸腺指数和脾指数明显增大(P<0.05);CL对JEC细胞的抑制作用随CL剂量的增加和作用时间的延长而增强,CL10μg.mL-1作用JEC细胞96 h的IC50为0.05μg.mL-1;JEC细胞的生长曲线随着CL剂量的增加而逐渐下移;随CL剂量的增加,NBT阳性细胞百分率逐渐增加,细胞培养上清中LDH含量逐渐降低。CL对JEC细胞凋亡的诱导作用呈现剂量依赖性,CL 10μg.mL-1作用JEC细胞24 h的凋亡细胞百分率为25.59%(P<0.05)。CL作用24 h后,阻滞JEC细胞于G2-M期(P<0.05)。结论:CL具有一定的体内外抗肿瘤作用。提高机体免疫功能可能是CL体内抗肿瘤的机制之一;CL体外抗JEC细胞的机制与CL的细胞毒作用、诱导细胞凋亡和抑制G2-M期细胞分裂有关。

刺梨提取物在卷烟中的应用及其致香成分的双柱分析

将刺梨提取物用于卷烟加料,用二氯甲烷同时蒸馏萃取刺梨提取物,分别用极性柱和非极性柱进行GC/MS分析。结果表明,刺梨提取物与烟香谐调,具有增加香气质和香气量、掩盖杂气、改善余味的作用,是安全有效的天然烟用香料;采用双柱分析的方法共检出62种化合物,比用单一极性柱分析更能相对客观、全面的反映刺梨提取物中的致香成分的状况;双柱分析的方法可用于天然植物提取物致香成分的分析。

刺梨提取物联合5-氟尿嘧啶抗人子宫内膜腺癌作用

目的探讨刺梨提取物(CL)联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)的抗子宫内膜腺癌细胞株(JEC)作用。方法将体外培养的指数生长期细胞接种于培养板,实验分为对照组(RPMI1640),10-4mol/L5-FU组,0.01、0.1、1、10和100μg/mL CL组,0.01、0.1、1、10和100μg/mL CL分别联合10-4mol/L5-FU组。采用MTT法和生长曲线绘制分析CL联合5-FU对JEC细胞生长的影响;通过测定硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力和细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量分析CL联合5-FU对JEC细胞分化的影响;采用丫啶橙(acridine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)荧光染色法和流式细胞术(FCM)检测CL联合5-FU对JEC细胞凋亡和细胞增殖周期的影响。结果 CL联合5-FU对JEC细胞增殖的抑制作用较CL和5-FU单独应用增强(P<0.05)。与CL和5-FU单独应用比,CL联合5-FU作用后,NBT阳性和凋亡JEC细胞的百分率均升高,而JEC细胞培养上清中LDH含量下降(P<0.05)。CL联合5-FU作用后,G0-G1期JEC细胞比率较CL和5-FU单独应用升高。结论 CL具有增强5-FU抗肿瘤的作用,可能与其增强5FU的细胞毒作用、诱导细胞分化与凋亡和抑制细胞增殖分裂等有关。

刺梨提取物对小鼠免疫器官指数、血液指标及抗氧化功能的影响

本试验研究刺梨提取物对小鼠免疫器官指数、血液指标及抗氧化性能的影响。挑选3周龄体重相近的昆明系小鼠45只,随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组,试验1组和试验2组每天分别灌服0.4 mL和0.6 mL刺梨提取物,对照组灌服生理盐水。试验期21 d。结果表明,试验2组小鼠的脾脏指数和胸腺指数均显著高于对照组(P<0.05),试验2组的总蛋白、球蛋白、总胆固醇含量显著高于对照组和试验1组(P<0.05),甘油三酯含量显著低于对照组(P<0.05)。而白蛋白、尿素氮和葡萄糖3组间无显著差异(P>0.05)。和对照组相比,试验1组和试验2组谷光甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性显著增加(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量则显著降低(P<0.05)。以上结果表明,刺梨提取物可显著提高小鼠的免疫功能和抗氧化功能,并调控体内脂质代谢,且具有一定的剂量效应,0.6 mL的灌注量效果优于0.3 mL的灌注量。

刺梨提取物膜分离产品的成分分析及其在卷烟中的应用

为了提高刺梨提取物的质量,采用膜分离技术对其进行分离纯化,应用液质分析所得到的产品进行成分分析,并通过对这些产品的评吸,分析化学成分和烟用效果之间的关系。结果表明,膜分离技术在保留刺梨提取物原有特色香味的同时,可以有效去除负面影响烟气感官质量的大分子物质,达到提高刺梨提取物质量的目的。纯化后刺梨提取物的主要成分为有机酸类和多糖类化合物。添加在卷烟中,有着改善口感,柔和烟气的积极作用。

刺梨提取物对小鼠的抗疲劳作用

目的:研究刺梨提取物对小鼠的抗疲劳作用。方法:100只健康昆明种小白鼠,按雌雄、体重随机分为空白、高、中和低剂量组4组,每组25只;空白组给予生理盐水灌胃,高、中及低剂量3个组分别给予1 g/(kg·d)、2 g/(kg·d)及3 g/(kg·d)刺梨提取物灌胃;连续灌服25 d后采用小鼠游泳耐力和小鼠低压缺氧实验测定小鼠负重游泳时间及低压耐氧的死亡数;并测定运动后小鼠的血清尿素氮、血乳酸和肝糖原。结果:经灌胃小鼠不同剂量刺梨提取物25 d后,能明显延长小鼠负重游泳时间,高、中剂量组力竭游泳时间明显长于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组小白鼠死亡只数少于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),小鼠死亡数量随灌服刺梨提取物剂量的增加而减少;刺梨提取物可显著增强小鼠低压耐氧时间,降低运动时血清尿素氮水平,对小鼠运动后血乳酸升高有明显的抑制作用,可使小鼠体内肝糖原的储备量增加。结论:刺梨提取物能对抗小白鼠疲劳。

刺梨渣提取物对嗜水气单胞菌的体外抑菌效果及作用机制

【目的】探讨刺梨渣提取物对水产养殖业中主要病原菌嗜水气单胞菌的抑菌作用和机制。【方法】通过微量稀释法和平板计数法测定刺梨渣提取物对嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC),通过集群运动实验检测刺梨渣提取物对嗜水气单胞菌集群运动的影响,通过脂肪酶和蛋白酶活性实验检测刺梨渣提取物对嗜水气单胞菌脂肪酶活性和蛋白酶活性的影响,通过溶血实验测定刺梨渣提取物对嗜水气单胞菌溶血性的影响,此外通过结晶紫法检测生物膜的形成,以及荧光定量RT-PCR检测毒力和调控系统的相关基因表达情况。【结果】刺梨渣提取物对3株嗜水气单胞菌的MIC为128 mg/mL;其中嗜水气单胞菌ATCC7966的MBC为256 mg/mL,其余两株嗜水气单胞菌的MBC均>512 mg/mL。刺梨渣提取物浓度低于8 mg/mL时,不影响菌株生长;刺梨渣提取物≥4 mg/mL时,对生物膜形成、蛋白酶活性和溶血活性都具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖抑制,但对脂肪酶的活性影响较小。荧光定量RT-PCR结果发现刺梨渣提取物能引起嗜水气单胞菌群体感应(QS)系统中luxS和ahyr基因表达显著下调;同时气溶素aerA表达量也显著下降。【结论】刺梨渣提取物能抑制嗜水气单胞菌生长及运动能力、酶活性、溶血活性、生物膜的形成以及相关毒力基因的表达,表明刺梨渣提取物是一种潜在的嗜水气单胞菌替抗物。

刺梨提取物对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的抑制作用及对JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨刺梨提取物对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的抑制作用及对JAK2/STAT3信号通路的影响。方法 设A431细胞组,刺梨提取物低、中和高剂量组(0.4、0.8和1.6 mmol/L),各组每孔设6个重复孔,培养72 h。培养结束后,MTT法、苏木素-伊红染色测定细胞增殖、单克隆形成数目水平,划痕实验测定细胞侵袭迁移水平,流式细胞仪及Elisa法测定细胞凋亡水平及凋亡相关蛋白Bcl-2和pro Caspase-3,RT-PCR法、蛋白印迹法测定细胞JAK2和STAT3水平。结果 与对照组比较,刺梨提取物低、中、高剂量组A值、存活率、克隆细胞形成数目、侵袭距离、Bcl-2蛋白表达水平、Jak2、Stat3 mRNA蛋白表达水平降低(P<0.05);随着刺梨提取物剂量的增加,各组细胞A值、存活率、克隆细胞形成数目、侵袭距离、Bcl-2蛋白表达水平、Jak2、Stat3 mRNA蛋白表达水平逐渐降低,剂量-效应关系明显(P<0.05)。与对照组比较,刺梨提取物低、中、高剂量组凋亡率和pro Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05);随着刺梨提取物剂量的增加,各组细胞凋亡率和pro Caspase-3蛋白表达水平升高,剂量-效应关系明显(P<0.05)。结论 刺梨提取物抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭,促进其凋亡;其机制可能与刺梨提取物抑制JAK/STAT信号通路激活有关。

无籽刺梨提取物成分分析及MRPs强化液的应用研究

为探索无籽刺梨提取物在烟草调香中的应用,采用气相色谱质谱联用仪(GC-MS)对无籽刺梨提取物进行分析;美拉德反应得到无籽刺梨提取物的MRPs强化液,并对二者进行感官评价、三点法差别检验.结果表明:无籽刺梨提取物有33种成分,主要化学成分有亚麻酸乙酯(30.70%)、棕榈酸乙酯(11.90%)和肉桂酸(2.73%)等.无籽刺梨提取物加香试验表明,香料添加剂与烟香较为谐调,可明显提高烟气香甜感、顺畅感,降低刺激性,掩盖杂气,改善卷烟吸味.三点法差别检测表明添加无籽刺梨提取物和无籽刺梨MRPs强化液均有显著性差别.

刺梨的营养价值、生物学功能及其在畜禽生产中的应用

我国刺梨资源丰富,无论是刺梨果渣副产物还是刺梨提取物,都具有非常可观的饲用化前景。刺梨具有多种生物学功能,如提高机体抗氧化能力、增强机体免疫力、调节机体糖和脂代谢、改善肠道健康等生理功能。本文主要围绕刺梨的营养成分、生物活性成分、生物学功能及其在畜禽生产中的初步应用进行综述,旨在为刺梨及刺梨提取物的饲用化研究提供参考。