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刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探
1
作者
遇文婧
宋小双
+3 位作者
邓勋
平晓帆
周琦
刘志华
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期17-26,共10页
【目的】研究刺激植物响应蛋白Epl1对木本植物山新杨的刺激响应功能,为开发新一代提高植物免疫的新型诱导剂奠定基础。【方法】从棘孢木霉ACCC30153菌株中克隆获得一个刺激植物响应蛋白基因Epl1,并进行序列分析和原核表达,将获得的原核...
【目的】研究刺激植物响应蛋白Epl1对木本植物山新杨的刺激响应功能,为开发新一代提高植物免疫的新型诱导剂奠定基础。【方法】从棘孢木霉ACCC30153菌株中克隆获得一个刺激植物响应蛋白基因Epl1,并进行序列分析和原核表达,将获得的原核重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗进行互作,初步探讨rEpl1蛋白对山新杨生长、生理指标、以及生长和防御相关基因转录水平的影响。【结果】刺激植物响应蛋白基因Epl1的cDNA序列全长为417bp,预测蛋白分子量12.6 kDa,属于Cerato-platanin家族;通过构建原核表达载体,成功获得重组蛋白rEpl1;在1μg/mL rEpl1诱导下,山新杨组培苗生长较快、根系旺盛,生物量明显增加,CAT活性在诱导第1 d时为对照的3.51倍,可溶性糖含量和脯氨酸含量在诱导初期急剧积累;山新杨生长素基因LAX2/AUX和水杨酸防御基因JAR2的转录水平分别在蛋白诱导2 d和12 h时达到峰值,分别为对照的873.10和388.02倍。【结论】Epl1基因的克隆、序列分析和原核表达为进一步研究Epl1蛋白诱导植物系统抗病性提供了理论基础;重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗互作实验,初步Epl1蛋白能够刺激木本植物在生理及分子水平上的响应,从而促进生长,提高抗性。
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关键词
刺激植物响应蛋白
原核表达
山新杨
抗病诱导剂
下载PDF
职称材料
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
2
作者
遇文婧
刘志华
+3 位作者
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并...
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
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关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
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职称材料
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
被引量:
1
3
作者
遇文婧
刘志华
+3 位作者
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015年第16期93-97,共5页
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以c...
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以cDNA为模板进行PCR获得TatEpl1基因片段,并将目的片段插入原核表达载体pGEX-4T-2的相应位置,获得重组表达载体pGEX-TatEpl1,并将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中获得重组菌株BL21-TatEpl1,经检测均呈阳性。
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关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
原核表达
原文传递
题名
刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探
1
作者
遇文婧
宋小双
邓勋
平晓帆
周琦
刘志华
机构
黑龙江省林业科学院
东北林业大学林学院
出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期17-26,共10页
基金
哈尔滨市应用技术研究与开发项目科技创新人才(2016RQQXJ235)
黑龙江省林科院青年基金项目(2015Q01)
+1 种基金
国家自然科学基金项目(31700564)
国家自然科学基金项目(31670649)
文摘
【目的】研究刺激植物响应蛋白Epl1对木本植物山新杨的刺激响应功能,为开发新一代提高植物免疫的新型诱导剂奠定基础。【方法】从棘孢木霉ACCC30153菌株中克隆获得一个刺激植物响应蛋白基因Epl1,并进行序列分析和原核表达,将获得的原核重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗进行互作,初步探讨rEpl1蛋白对山新杨生长、生理指标、以及生长和防御相关基因转录水平的影响。【结果】刺激植物响应蛋白基因Epl1的cDNA序列全长为417bp,预测蛋白分子量12.6 kDa,属于Cerato-platanin家族;通过构建原核表达载体,成功获得重组蛋白rEpl1;在1μg/mL rEpl1诱导下,山新杨组培苗生长较快、根系旺盛,生物量明显增加,CAT活性在诱导第1 d时为对照的3.51倍,可溶性糖含量和脯氨酸含量在诱导初期急剧积累;山新杨生长素基因LAX2/AUX和水杨酸防御基因JAR2的转录水平分别在蛋白诱导2 d和12 h时达到峰值,分别为对照的873.10和388.02倍。【结论】Epl1基因的克隆、序列分析和原核表达为进一步研究Epl1蛋白诱导植物系统抗病性提供了理论基础;重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗互作实验,初步Epl1蛋白能够刺激木本植物在生理及分子水平上的响应,从而促进生长,提高抗性。
关键词
刺激植物响应蛋白
原核表达
山新杨
抗病诱导剂
Keywords
eliciting plant response protein
prokaryotic expression
Populus davidiana ×P. alba var.pyramidlis
disease resistance inducer
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
下载PDF
职称材料
题名
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
2
作者
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
机构
东北林业大学林学院
黑龙江省森林保护研究所
出处
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
基金
哈尔滨市科技局青年科技创新人才项目(2013RFQXJ02)资助
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2572014BA08)
文摘
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
Keywords
Trichoderma atroviride ACCC30153
Eliciting plant response protein
P.pastoris
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
下载PDF
职称材料
题名
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
被引量:
1
3
作者
遇文婧
刘志华
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
机构
东北林业大学林学院
黑龙江省森林保护研究所
出处
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015年第16期93-97,共5页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(NSFC:31170601)
黑龙江省青年科学基金资助项目(QC2011C003)
+1 种基金
黑龙江省教育厅科学技术研究资助项目(12513024)
黑龙江省级基本科研业务费资助项目(省财政自拟项目)
文摘
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以cDNA为模板进行PCR获得TatEpl1基因片段,并将目的片段插入原核表达载体pGEX-4T-2的相应位置,获得重组表达载体pGEX-TatEpl1,并将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中获得重组菌株BL21-TatEpl1,经检测均呈阳性。
关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
原核表达
Keywords
T.atroviride ACCC30153
eliciting plant response protein
prokaryotic expression
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探
遇文婧
宋小双
邓勋
平晓帆
周琦
刘志华
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
下载PDF
职称材料
2
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014
0
下载PDF
职称材料
3
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
遇文婧
刘志华
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015
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