刺玫叶中金丝桃苷和总黄酮含量的测定

目的:建立测定刺玫叶中金丝桃苷和总黄酮含量的方法。方法:以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法于418nm测定总黄酮含量;采用高效液相色谱法测定金丝桃苷含量,采用Shim-pack VP-ODS C_(18)色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸(45:55,V/V)溶液,检测波长为360nm,流速为1.0mL/min,柱温40℃。结果:总黄酮在0.02～0.12mg/mL(R^2=0.9996)、金丝桃苷在9.60～57.60μg/mL(R^2=0.9993)质量浓度范围内呈良好线性关系;总黄酮和金丝桃苷平均回收率分别为100.87%和100.36%,RSD分别为2.79%和2.26%。结论:所建立的方法快速、准确、操作简便,适用于刺玫叶中金丝桃苷和总黄酮的含量测定。

微波协同酶法提取刺玫叶总黄酮工艺研究

采用微波协同酶法提取刺玫叶总黄酮,以刺玫叶总黄酮提取率为主要指标对微波协同酶法提取工艺进行了优化,确定了最佳的工艺条件:提取溶剂为75%乙醇、料液比1∶25,复合酶(纤维素酶∶果胶酶=2∶1),酶解温度55℃、酶解时间120min、酶解提取2次、酶解体系pH 4.5、微波功率600 W,微波处理时间15min、微波温度60℃、微波提取2次,在此工艺条件下,刺玫叶总黄酮平均提取率为32.21mg·g-1。表明微波协同酶法可用于刺玫叶总黄酮的提取。

大孔树脂法纯化刺玫叶总黄酮工艺

建立了大孔树脂纯化刺玫叶总黄酮的最佳工艺条件。以吸附率、解吸率为主要考察指标,采用静态吸附及解吸、动态吸附及解吸实验,确定了LX-36型大孔树脂纯化刺玫叶总黄酮的效果较理想,并对其纯化条件进行了优化。其最佳纯化条件:上样量为m(生药)∶m(树脂)=1∶2.5,吸附速率为2BV·h^(-1),静置15min,吸附后用2BV蒸馏水洗脱,再用5BV的70%乙醇以3BV·h^(-1)的流速洗脱,在此最佳条件下,其吸附率平均可为94.24%,解吸率平均为88.59%,纯化后刺玫叶干浸膏中总黄酮含量由原来的8.21%提高到25.12%,树脂富集倍数约为3倍。结果表明,采用LX-36型大孔树脂对刺玫叶总黄酮的纯化具有一定效果。

刺玫叶总皂苷富集工艺条件优化

以吸附率和解吸率为考查指标,采用静态吸附-解吸、动态吸附-解吸试验,确定了D-101型大孔树脂富集刺玫叶总皂苷的工艺条件。结果发现,最佳富集条件为：上柱液浓度为原提取液稀释5倍、吸附速率为2 BV/h、上柱液p H值为7~9,解吸液为95%乙醇、洗脱速率为2 BV/h、洗脱液用量为7 BV。在此条件下,其平均吸附率为81.33%,平均解吸率为86.31%,纯化后刺玫叶干浸膏中总皂苷含量由原来的16.32%提高到48.13%,树脂富集倍数约为3倍。结果表明,D-101型大孔树脂对刺玫叶总皂苷的富集具有一定的效果。

三氯化铝显色法测定刺玫叶提取物总黄酮的含量

建立了刺玫叶提取物中总黄酮含量的测定方法。以芦丁为对照品,于405nm处采用三氯化铝-醋酸/醋酸钠缓冲溶液显色法测定总黄酮含量,刺玫叶提取物中总黄酮平均含量为10.06%。总黄酮含量在3.84μg/m L^23.02μg/m L(R=0.9998)范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.64%,RSD为1.68%。所建立的含量测定方法快速、准确、操作简便,适用于刺玫叶提取物中总黄酮的含量测定。

二氯氧锆显色法测定刺玫叶提取物总黄酮含量

建立测定刺玫叶提取物总黄酮含量的方法.以芦丁为对照品,采用二氯氧锆显色法于469 nm测定总黄酮含量,并对显色条件进行了优化.总黄酮在3.89~15.57μg/m L(R=0.999 9)范围内呈良好线性关系,总黄酮平均回收率为101.04%,RSD为0.85%.所建立的含量测定方法快速、简便,适用于刺玫叶提取物总黄酮的含量测定.

山刺玫叶总黄酮的抗衰老作用研究

【目的】研究山刺玫叶总黄酮的抗衰老作用机制,为山刺玫叶的开发利用提供参考。【方法】选取SPF级昆明种小鼠60只,雌雄各半,随机分为空白组、衰老模型组、维生素E组和山刺玫叶总黄酮低、中、高剂量组共6组(n=10),其中空白组小鼠用等体积生理盐水灌胃;衰老模型组小鼠颈背部皮下注射125 mg/(kg·d)D-半乳糖,灌胃等体积生理盐水;维生素E组小鼠颈背部皮下注射125 mg/(kg·d)D-半乳糖,灌胃维生素E溶液50 mg/(kg·d);山刺玫叶总黄酮低、中、高剂量组小鼠均颈背部皮下注射125 mg/(kg·d)D-半乳糖,并依次灌胃山刺玫叶总黄酮溶液1.0,2.0,4.0 g/(kg·d),同样条件下饲养。6周后分别测定各组小鼠免疫器官指数及血清、脑和肝脏组织中的SOD、GSH-Px活性和MDA浓度,HE染色法观察各组小鼠脑组织的形态学变化,ELISA法检测各组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的质量浓度。【结果】山刺玫叶总黄酮能显著或极显著提高衰老模型组小鼠脑、胸腺和脾脏指数(P<0.05,P<0.01),显著或极显著提高其脑、肝脏、血清中的SOD、GSH-Px活性(P<0.05,P<0.01),同时显著或极显著降低小鼠肝脏、血清和脑组织中的MDA浓度(P<0.05,P<0.01)。与衰老模型组比较,山刺玫叶总黄酮剂量组小鼠脑组织的神经元细胞数量增加,细胞的坏死及变性情况减轻,且随着山刺玫叶总黄酮剂量的增加恢复程度逐渐增加,即存在剂量依赖性。山刺玫叶总黄酮高、中剂量组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4的质量浓度显著或极显著高于衰老模型组小鼠(P<0.05,P<0.01),而IL-6、TNF-α的质量浓度则显著或极显著低于衰老模型组小鼠(P<0.05,P<0.01)。【结论】山刺玫叶总黄酮对机体的衰老有延缓作用,其机制与清除过多自由基、预防脂质过氧化及增强免疫功能有关。