民族药刺齿凤尾蕨抑制人源结肠癌细胞活性成分研究

目的研究民族药刺齿凤尾蕨抑制人源结肠癌细胞活性成分。方法采用95%乙醇提取药材,聚酰胺色谱、葡聚糖凝胶色谱以及制备型高效液相色谱等技术获取化合物,磁共振波谱技术(NMR)对得到的化合物进行结构鉴定。磺酰罗丹明B比色法(SRB)对化合物进行体外抗肿瘤活性筛选。结果从刺齿凤尾蕨中分离得到5个二萜类化合物,分别鉴定为geopyxin A(1),geopyxin C(2),ent-11β-acetoxykaur-16-en-18-ol(3),7β,16α,17-trihydroxy-ent-kauran-19-oic acid(4)和neolaxiflorin K(5)。活性筛选表明化合物1,2和5具有显著的抑制人源结肠癌细胞活性,IC50值分别为1.20、2.45和3.26μmol/L。结论化合物1~5首次从刺齿凤尾蕨中分离得到。

刺齿贯众的组织培养

对刺齿贯众孢子萌发、原叶体增殖、孢子体的诱导进行了试验、观察和分析,研究了培养基和植物激素对其生长的影响。结果显示:成熟孢子在1/2 MS蔗糖浓度为1%培养基上59 d萌发90%以上,且有利于原叶体的形成。原叶体在1/2 MS+Kt0.5 mg/L培养基上60 d增殖速率可达1∶11。试管苗在1/2 MS+IBA2.0 mg/L的培养基上长势较好,根系粗壮且发达。该物种组培和快繁的成功,为它离体保存和持续利用提供了技术支撑。

刺齿凤尾蕨中对映-贝壳杉烷二萜类化学成分研究

目的研究刺齿凤尾蕨中的对映-贝壳杉烷二萜类化学成分。方法将刺齿凤尾蕨用95%乙醇提取后,通过有机溶剂萃取,提取液过聚酰胺树脂,中、高压制备液相色谱等多种色谱技术得到单体化合物。运用NMR、ESI-MS等波谱学技术进行结构鉴定。研究各单体化合物对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用。结果从该植物提取物中分离并鉴定了10个二萜类化合物,分别为ent-kaurane-16β,17,19-triol-3-one(1),broussonetone A(2),broussonetone B(3),3α-angeloyloxy-17-hydroxyentkaur-15-en^(-1)9-oic acid(4),3α-tigloyloxy-17-hydroxy-ent-kaur-15-en^(-1)9-oic acid(5),tricalysiolide C(6),tricalysiolide D(7),12α-(β-D-glucopyranosyloxy)-7β-hydroxykaurenolide(8),7β-(β-Dglucopyranosyloxy)-12α-hydroxykaurenolide(9)和acantrifoside D(10)。化合物8、9和10对皮质酮诱导PC12细胞损伤具有较强的保护作用。结论化合物1~10,均首次从刺齿凤尾蕨中分离获得。

薄层色谱法鉴别半边旗和刺齿半边旗

目的:研究半边旗和刺齿半边旗化学成分的差异,促进用药安全、有效。方法:采用薄层色谱法,展开剂为石油醚∶丙酮∶冰醋酸(7∶3∶0.05)。结果:二者薄层斑点数目不同,荧光显色也有区别。结论:两种药材的化学成分有差异,不能盲目等同使用。

刺齿贯众化学成分的研究

从鳞毛蕨科植物刺齿贯众(Cyrtomium caryotideum)地上部分通过溶剂提取、硅胶柱层析、SephadexLH-20柱层析和MCI柱层析等方法分离得到4个化合物,经核磁共振氢谱、碳谱和质谱确定了它们的结构,分别为山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(1)、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷(2)、大黄素(3),5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(4)。化合物3和4为首次从本植物中分离得到。

刺齿报春苣苔酮脂酰-辅酶A合成酶基因的鉴定及序列分析

【目的】为进一步探讨刺齿报春苣苔酮脂酰-辅酶A合成酶基因的分子结构和功能,并为刺齿报春苣苔适应极端干旱环境提供分子依据。【方法】总RNA的提取采用改良Trizol法,通过转录组测序获得与刺齿报春苣苔( Primulina spinulosa )抗旱及应对生物胁迫反应有关的基因:酮脂酰-辅酶A合成酶基因,并运用DNAman、Finder、TMPRED、SWISS-MODEL、NetPhos2.0、SignaIP4.1等软件对序列的开放阅读框(ORF)、编码氨基酸、编码蛋白质等理化特性进行分析,并构建系统发育树。【结果】序列分析结果表明,该基因全长1 935 bp(GenBank登录号为MH543314),开放阅读框(ORF)为1 599 bp,共编码532个氨基酸,编码蛋白质的分子量为59.82 kDa,理论等电点(pI)为9.16,为亲水性蛋白,含7个跨膜区,30个可能的磷酸化位点,1个与查尔酮合成酶家族蛋白相同的保守结构域;它与同科旋蒴苣苔( Dorcoceras hygrometricum, KZV37788)的同源性高达92%,两者在系统进化树上聚为一支。【结论】酮脂酰-辅酶A合成酶基因与刺齿报春苣苔叶表面的蜡质合成有关,对植物的抗旱及应对生物胁迫发挥重要调控作用。

刺齿贯众及贯众配子体发育的培养观察

用腐叶土为基质培养刺齿贯众和贯众的孢子,在光学显微镜下观察其配子体的发育过程。结果表明,刺齿贯众和贯众的配子体发育特征极为相似:孢子均为单裂缝,具周壁,培养5～7 d后萌发;原丝体形态多样;35 d后发育为原叶体,心形,具毛状体;60 d后性器出现,多数为雌雄异株;85～90 d后配子体发育出幼孢子体。

刺齿报春苣苔肌醇半乳糖苷合成酶基因的鉴定及序列分析

肌醇半乳糖苷合成酶基因与植物光合产物运输、种子耐脱水性、抵御生物与非生物胁迫和自我保护等生理生化过程密切相关。基于刺齿报春苣苔(Primulina spinulosa)转录组测序数据,获得(鉴定)1个肌醇半乳糖苷合成酶基因。序列分析结果表明,该基因全长1 347 bp(GenBank登录号为MG521418),开放阅读框(ORF)为1 008 bp,共编码335个氨基酸。进一步基于氨基酸序列的分析表明,该基因编码的蛋白质分子量为38.05 ku,理论等电点为5.09,为亲水性蛋白,含有1个与糖基转移酶家族蛋白相同的保守结构域;刺齿报春苣苔的肌醇半乳糖苷合成酶基因与同科的旋蒴苣苔(Boea hygrometrica,FJ222452)的相似性高达90%,两者在系统进化树上聚为1支。研究结果为进一步研究刺齿报春苣苔的肌醇半乳糖苷合成酶基因的分子结构和功能奠定了基础。

长江秽蝇和二刺齿股蝇雌性首次发现(双翅目:蝇科)

首次发现长江秽蝇及二刺齿股蝇雌性成蝇,对其外部形态进行了补充描述,并绘制了产卵管、受精囊及腹板图.研究标本保存于沈阳师范大学昆虫研究所.

中国新记录刺齿跳属(弹尾纲:长角跳科)

记述了中国一新记录种刺齿跳属Homidia similis Szeptycki,1973。采用Szeptycki的背部毛序系统,对该种进行了特征描述,同时提供了更多的特征数据与图片。

哈萨克族常用药材刺齿青兰的质量标准研究

目的:对哈萨克药材刺齿青兰进行系统的生药学鉴定,为其鉴别及开发利用提供科学依据。方法:采用原植物、性状、显微、薄层鉴定方法。结果:通过原植物、性状、显微、薄层色谱图研究能够很好地鉴定药材。结论:方法简便易操作,可作为哈药萨克药刺齿青兰的定性鉴别方法。

刺齿凤尾蕨中金雀异黄酮的提取与分离

对凤尾蕨属植物刺齿凤尾蕨的化学成分进行系统研究。将刺齿凤尾蕨全草干燥后用95%乙醇加热回流提取3次,每次3 h,减压回收得到1.1 kg浸膏。用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到四个部分萃取物。二氯甲烷萃取物先后经聚酰胺树脂和ODS柱进行化合物的分离和纯化,根据其理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构,并从刺齿凤尾蕨中鉴定出黄酮类化合物金雀异黄酮。

黔产刺齿凤尾蕨中抗肿瘤活性二萜的含量测定

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定黔产刺齿凤尾蕨中特征性抗肿瘤活性二萜成分ent-11α--hydroxy-15-oxo-kauran-16-en-19-oic acid(5F)及ent-11α-hydroxy-15-oxo-kauran-16-en-19-oic acid-β-D-Glucoside(5F-Glc)的含量。方法:采用Aglient ZORBAX SB-CN C(4.6*250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水(B),梯度洗脱;进样量:10μL;流速:1 mL/min;检测波长:242 nm;柱温:30℃。结果:5F及5F-Glc分别在0.004~0.020 mg/mL(r=0.9993)及0.072~0.360 mg/mL(r=0.9993)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.81%、97.71%,RSD%分别为2.93%、1.38%。结论:该方法简便、准确、稳定、重复性好,可用于刺齿凤尾蕨中5F及其葡萄糖苷(5F-Glc)的含量测定。

优化刺齿凤尾蕨抗癌二萜的超声提取工艺

目的:优选刺齿凤尾蕨抗癌二萜的超声提取工艺。方法:采用L9(34)正交设计试验考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数和料液比4个影响因素,以抗肿瘤活性二萜化合物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)的含量为评价指标,采用HPLC进行含量测定。结果:超声提取最佳工艺为A2B2C3D3,即加12倍量75%乙醇超声提取3次,每次65 min。结论:优选得到的工艺稳定可行。

刺齿凤尾蕨化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

乙醇提取刺齿凤尾蕨药材,提取物依次经过有机溶剂萃取,聚酰胺柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱和制备型HPLC色谱分离得到10个对映-贝壳杉烷型二萜类化合物。采用核磁共振(NMR)和质谱(ESI-MS)技术鉴定获得的化合物分别为geopyxin B(1),geopyxin E(2),ent-11α-hydroxy-18-acetoxykaur-16-ene(3),ent-14β-hydroxy-18-acetoxykaur-16-ene(4),neolaxiflorin L(5),ent-3β,19-dihydroxy-kaur-16-ene(6),ent-3β-hydroxy-kaur-16-ene(7),7β,17-dihydroxy-16α-ent-kauran-19-oic acid 19-O-β-Dglucopyranoside ester(8),crotonkinin C(9)和crotonkinin C(10)。化合物1~10均为首次从刺齿凤尾蕨中获得。体外活性研究表明,化合物1和2对Bel-7402细胞具有抑制作用,IC50分别为7.50,10.60μmol·L-1;化合物1和2对Hep G2细胞具有抑制作用,IC50分别为6.68,11.80μmol·L-1。

刺齿凤尾蕨抗肿瘤活性成分5F的含量测定

目的:建立测定刺齿凤尾蕨中抗肿瘤成分5F含量的方法,并测定其不同部位中5F的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为HypersilC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-1%醋酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL·min-1,检测波长为242nm,柱温为30℃。结果:5F检测浓度在6～96μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9981);低、中、高浓度对照品加入量对应的平均加样回收率分别为103.33%、100.84%、100.39%,RSD分别为5.86%、3.05%、1.02%(n均为6)。5F在刺齿凤尾蕨叶中含量最高,茎中含量其次,根中含量最低。结论:本方法稳定、快速且杂质干扰小,可用于刺齿凤尾蕨中5F的含量测定。

齿缘刺猎蝽生活史及其生物学特性

齿缘刺猎蝽是国内广泛分布的一种捕食性天敌昆虫,能捕食多种农林业害虫。为了充分利用该虫,我们对齿缘刺猎蝽的生活史、形态特征和行为进行了研究。结果表明,齿缘刺猎蝽在湖南一年发生一代,以成虫越冬;5月份产卵,若虫4龄,初孵若虫黄褐色,2-4龄若虫由黄绿色到淡绿色,4龄若虫可见明显白色翅芽,8月份羽化为成虫,成虫灰褐色。各龄若虫和成虫体表均分布有较多棘或刺。成虫平均寿命长达312.5 d,不太活跃,有一定的飞行能力,取食和交配的时间较长,整个产卵期产卵量为每头雌虫35-41粒。

齿缘刺猎蝽成虫触角和跗节感器的扫描电镜观察

利用扫描电镜观察了齿缘刺猎蝽(Sclomina erinacea Stal)成虫触角及前足跗节上的感受器,结果表明:齿缘刺猎蝽触角5节,由柄节、梗节和3个鞭节构成,梗节最短;雌、雄虫前足跗节均为3节。触角上共有3种感器,分别为毛形感器、刺形感器和锥形感器,其中,毛形感器、锥形感器各有两种类型,刺形感器有3种类型。雌、雄个体间触角感器类型及分布未见明显差异。前足跗节上仅存在刺形感器,该感器在雄虫前足跗节上的分布较雌虫密集。

不同温度对双齿多刺蚁养殖及其保护酶系的影响

在不同温度下长期养殖双齿多刺蚁,观察其存活率和活动状况,测定了不同温度对其SOD,POD,CAT活力的影响,并进行了保护酶活性和存活率的相关分析.实验表明,在较低和较高温度下其存活率明显低于10-40℃测定值.在40-45℃时,酶的活性随着温度升高急速下降;在-5-10℃时,酶的活性随着温度降低而下降.保护酶活性和存活率密切相关.10℃以下的低温和40℃以上的高温对其有不同程度的伤害,其适宜温区为10-40℃,最适温度为20-30℃.