铁调素与铁过载相关疾病关系的研究进展

铁是人体内必不可少的微量元素之一,具有十分重要的生物学功能,但如铁含量过高或者过低都会对机体造成影响。铁可以催化形成氧自由基,从而引发脂质过氧化、酶变性等,铁还是微生物和肿瘤细胞生长所必须的因子,可为它们的生长提供很好的营养环境。铁调素（hepcidin）是由肝脏合成并分泌的一种小分子多肽,是铁经肠黏膜吸收、由巨噬细胞回收、转移至肝储存的最终自我平衡调节器,在铁代谢中起着关键的作用。

红曲有效成分洛伐他汀对高脂小鼠血脂代谢及脂蛋白脂酶mRNA表达的作用

目的探讨红曲有效成分洛伐他汀对高脂小鼠血脂代谢调节的分子机制。方法昆明种雌性小鼠48只,按血清总胆固醇(TC)分为A、B、C、D、E、F 6组:正常对照组、高脂对照组、绞股蓝总苷阳性对照组、洛伐他汀低、中、高(5、15、30 mg/kg)剂量组。A组喂饲基础饲料,其他各组喂饲高脂饲料;按剂量分别ig给药6周,禁食12 h后,测定小鼠血脂水平相关指标;用Trizol试剂法提取总RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝、脾组织脂蛋白脂酶(LPL)mRNA的表达。结果实验6周末,洛伐他汀低、中、高各剂量组使小鼠动脉硬化指数(AI)均极显著低于高脂组(P<0.01);洛伐他汀中、高剂量组和绞股蓝总苷阳性对照组使高脂小鼠血清TC、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)均极显著低于高脂组(P<0.01);洛伐他汀低、中、高剂量组与高脂组相比,显著升高血清高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)(P<0.01);洛伐他汀低、中、高剂量组均提高肝组织中LPLmRNA的表达,且呈剂量依赖关系。结论洛伐他汀通过促进LPL mRNA转录而调节高脂小鼠血清血脂代谢水平,这可能是其调节血脂,预防动脉粥样硬化(AS)等心脑血管疾病的机制之一。

Smad信号传递途径调节肾小管上皮细胞转分化实验

目的:研究转化生长因子β1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮细胞(HKC)转分化作用与其细胞内信号传递途径的关系。方法:以细胞间粘连蛋白(Ecadherin)和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)作为肾小管上皮细胞转分化的观察指标,借助细胞培养、蛋白印迹和基因转染等方法,检测TGFβ1引发的Smad信号途径的变化,和TGFβ1诱导的肾小管上皮细胞转分化作用。将含有Smad7基因表达质粒转染HKC细胞,观察高表达的Smad7蛋白对TGFβ1作用的影响。结果:实验结果表明①TGFβ1作用HKC细胞10min即可磷酸化HKC细胞内Smad2/3蛋白,而且此作用可持续48h以上;②TGFβ1作用HKC细胞6h即可下调Ecadherin蛋白的表达,24h后能诱导该细胞表达αSMA,其作用呈明显的剂量依赖关系;③转染Smad7表达质粒的HKC细胞,可拮抗TGFβ1诱导HKC细胞表达αSMA以及下调Ecadherin蛋白表达的作用;④应用特异性MAP激酶抑制剂(PD98059和SC68376)和PI3激酶抑制剂(Wortmannin)均不能拮抗TGFβ1的作用。结论:TGFβ1诱导的上皮细胞转分化作用是依赖其引发的Smad信号途径,阻断该信号传递途径则能够拮抗TGFβ的作用。

龙葵总提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株的作用

目的:研究龙葵总提取物对U266细胞的细胞毒作用及其机制。方法:U266细胞株与龙葵总提取物共同培养,用CCK 8试剂检测细胞毒作用;用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡。结果:龙葵总提取物对U266细胞有细胞毒作用,半数抑制(质量)浓度约为117mg/L;龙葵总提取物影响U266细胞周期,G0 /G1 期细胞减少,S期、G2 /M期细胞增加,凋亡细胞增加。用AnnexinV/PI染色及TFAR19染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与龙葵总提取物有剂量依赖关系。结论:龙葵总提取物对U266细胞有体外细胞毒作用,其作用机制部分是诱导细胞凋亡。

复方鳖甲软肝片对5/6肾切除大鼠肾组织ET-1mRNA表达的影响

探讨复方鳖甲软肝片对5 /6肾切除(5 /6NT)大鼠肾组织内皮素(ET- 1)mRNA表达的影响。120只SD大鼠随机均分为正常组,假手术组, 5 /6NT模型组,苯那普利组,尿毒清组和复方弊甲软肝片大、中、小剂量组。连续用药28周后,处死大鼠,无菌取肾,制作肾组织冰冻制片,用原位杂交方法检测各组ET 1mRNA的表达。结果:正常组、假手术组,仅见少量ET- 1mRNA阳性反应物; 5 /6NT模型组,肾小球系膜细胞浆、肾小管上皮细胞浆均见ET -1mRNA强阳性蓝色反应物;苯那普利组、尿毒清组ET -1mRNA阳性反应物减少,与5 /6NT组比,P<0. 05;复方鳖甲软肝片ET -1mRNA阳性反应物明显减少,并呈剂量依赖关系;与5 /6NT组比,P<0. 05。结论:复方鳖甲软肝片能抑制5 /6NT大鼠肾组织ET- 1mRNA的表达,这可能是该方防治肾小球硬化的作用机制之一。

银杏叶提取物EGb761对TNF-α诱导HeLa细胞凋亡的影响

目的 初步研究银杏叶提取物EGb761对重组人肿瘤坏死因子- α(rhTNF- α)诱导HeLa细胞凋亡的影响。方法 采用MTT法观察EGb761对HeLa细胞生长的影响;细胞凋亡实验分5组,即空白对照组,rhTNF -α对照组(10 0 μg/L ) ,EGb761低浓度组[rhTNF- α(10 0 μg/L) +EGb761(10mg/L) ] ,EGb761中浓度组[rhTNF -α(10 0 μg/L ) +EGb761(2 0mg/L ) ] ,EGb761高浓度组[rhTNF -α(10 0 μg/L) +EGb761(4 0mg/L) ] ,采用流式细胞术和Hoechst3 3 2 5 8荧光染色检测凋亡。结果 EGb761在5 .0～80 .0mg/L终浓度范围内对HeLa细胞生长无明显影响;流式细胞术测定各组亚倍体细胞峰积分百分率(% )为:空白对照组(5 .3 5±2 .2 ) ,rhTNF- α对照组(3 7.8±6.1) ,EGb761低浓度组(19.2±3 .4) ,EGb761中浓度组(16.5±5 .7)和EGb761高浓度组(11.3±3 .9) ;荧光染色检测各组凋亡百分率(% ) :对照组(4 .2 3±2 .0 )、rhTNF α对照组(2 7.8±4.3 )、EGb761低浓度组(14 .9±3 .4)、EGb761中浓度组(12 .1±3 .7)和EGb761高浓度组(9.61±2 .3 ) ;结果显示,EGb761在10～40mg/L终浓度范围内对rhTNF α诱导的HeLa细胞凋亡均有显著的抑制作用(P <0 .0 1) ,且呈剂量依赖关系。结论 EGb761能有效抑制rhTNF- α诱导的HeLa细胞凋亡。

曲古抑菌素A对人胃腺癌SGC-7901细胞株增殖及其端粒酶hTERT—mRNA表达影响的研究

目的探讨不同浓度的曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)对人胃腺癌SGC-7901细胞增生及其端粒酶hTERT-mRNA表达的作用。方法不同浓度的TSA与人胃腺癌SGC-7901细胞株共培养，MTT检测细胞增生，RT—PCR法检测细胞端拉酶hTERTH-mRNA的表达，同时用相差显微镜动态观察细胞形态及生长方式上的改变。结果TSA呈时间剂量依赖性抑制胃癌细胞株SGC-7901的生长，同时它也能显著减少hTERT-mRNA的表达，呈剂量依赖关系。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能抑制胃癌细胞株SGC-7901的hTERT-mRNA表达，进而抑制其生长，这可能是组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA抗肿瘤的另一机制。

药物的诱变作用和它的DNA的圆二色谱的影响

一个药物若与DNA反应则往往有诱变作用。因此分析药物与DNA的关系是一个重要的课题。已有多种方法,从不同的角度分析药物与DNA之间的相互作用,其中园二色谱(circular dichroism,CD)是一种可靠、灵敏、简便的方法。DNA分子有它特有的CD谱,若药物分子嵌入DNA分子或与之形成复合物,这将改变DNA的构型而导致CD谱的变化。我们试图探索药物的诱变作用和它对DNA的CD谱影响之间的关系。

^(60)Coγ射线对原代培养神经细胞增殖的影响

目的 研究发育期神经细胞在辐照后损伤效应及其机理。方法 以不同剂量γ射线辐照原代培养神经细胞 ,通过3H -TdR掺入及MTT比色试验等观察辐照对神经细胞增殖、存活能力的影响。结果 0 .2 5Gyγ射线即可引起神经细胞增殖及生存活性的抑制 ,并在一定剂量内具有剂量依赖关系 (0 .2 5～ 2 .0Gy) ;且抑制效应随着时间变化而改变。结论 低剂量γ射线对神经细胞的增殖和存活具有明显抑制作用 。

血管内皮生长因子对口腔鳞癌细胞系尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法 采用发色底物反应法测量不同浓度VEGF作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后u -PA和PAI- 1的活性,同时用BoydenChamber观察VEGF诱导口腔鳞癌TSCCa细胞转移作用。结果 不同浓度的VEGF (1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml)作用于GNM细胞2小时后,u -PA和PAI - 1活性与对照组相比,无明显差异;而不同浓度的VEGF作用于TSCCa细胞2小时后,u -PA和PAI- 1活性与对照组相比,有显著性差异,u-PA和PAI- 1活性与VEGF有剂量依赖关系,用VEGF 1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml培养口腔鳞癌TSCCa细胞系2小时,BoydenChamber小室下室浸润的口腔鳞癌细胞数分别为6 .6 7±1 .78、1 7.1 7±2 .38、2 2 .33±2 .5 4×1 0 4/ml,分别高于对照组2 .4 8±1 .0 2×1 0 4/ml(P <0 .0 5或0 .0 1 )。结论 VEGF可促进口腔鳞癌细胞侵袭转移。

醋酸甲羟孕酮对卵巢癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用

目的 观察醋酸甲羟孕酮(MPA)对人卵巢癌裸鼠移植瘤内血管生成及肿瘤细胞的抑制作用。方法 将人卵巢癌COC1细胞制成裸鼠移植瘤模型,肿瘤形成后,将30只裸鼠随机分成对照组和2个治疗组,每组各10只。2个治疗组分别皮下注射MPA 60 mg/kg、120mg/kg,2次/周,共4周,对照组注射相同体积生理盐水。测定抑瘤率,用Ⅷ因子多克隆抗原抗体测定肿瘤内微血管密度(MVD),用光学显微镜和透射电子显微镜进行形态学观察。结果 MPA对人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑瘤率和新生微血管的抑制作用呈明显的剂量依赖关系。MPA剂量60 mg/kg治疗组,抑瘤率为23.8％;120 mg/kg治疗组,抑瘤率为43.8％。对照组MVD为5.14±0.74;MPA 60 mg/kg治疗组为3.64±0.02,120 mg/kg治疗组为2.11±0.12,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。两个治疗组间,差异亦有极显著性(P<0.01)。实验组可见大量的凋亡细胞、凋亡小体及变性坏死,而对照组少见。结论 MPA对人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤内的肿瘤细胞及新生微血管具有明显抑制作用,并呈现剂量-效应关系。其对肿瘤细胞的作用,可能是抑制和破坏了肿瘤区新生血管的生长,阻断血供所产生的结果,而不是直接对肿瘤细胞的作用。

阿克拉霉素A聚氰基丙烯酸异丁酯毫微粒冻干针剂体内外抗肝癌活性

提要阿克拉霉素A聚氰基丙烯酸异丁酯毫徽粒冻干针剂能明显抑制体外培养人肝癌细胞株7703的生长,ID50为0.28μg/ml,在0.8μg/ml浓度时,克隆形成抑制率为90％,抑制作用有明显剂量依赖关系而未见明显时间依赖关系。静脉给药后.

六六六的果蝇伴性隐性致死试验

六六六在50年代初作为杀虫剂用于农业和卫生方面。有关六六六的致畸、致癌,致突变的研究国内外均有不少报导,但对其生殖细胞遗传危害的远期效应报导较少。为此,我们以工业品六六六进行果蝇伴性臆性致死试验。现将结果报道如下:材料与方法一,材料:实验用的雄蝇为3～4天龄的 Canton—

猪、小牛胸腺免疫抑制提取物的制备及生物活性的研究

经氯化钠水溶液提取免疫促进成分后的猪、小牛胸腺丙酮粉以氢氧化钠水溶液提取,调等电点去杂蛋白后再经透析得一部分纯化的胸腺免疫抑制提取物。此提取物对淋巴细胞转化有显著的抑制作用且有明显的剂量依赖关系。小牛胸腺提取物抑制作用微高于猪胸腺提取物。

冠心病药物性晕厥11例分析

我院1990～1992年间观察11例硝酸盐制剂所致虚脱病人就其诊断和治疗进行讨论。临床资料本组11例,男5例,女6例,年龄29～74岁,均有硝酸盐急性给药史,立位或坐位8人,使用过量9人,使用喷雾剂8人。既往长期使用硝酸盐类、β受体阻滞剂,钙离子拮抗剂及利尿剂5人。有头晕者11例,恶心10人,呕吐3人,均有血压下降。

大鼠脑内GAB含量与细胞免疫在ACTH镇痛中的相互作用

ACTH腹腔注射后,采用痛阈测定、氨基酸自动分析仪测定海马、下丘脑内GABA含量和进行淋巴细胞转化实验与脾细胞产生IL—Ⅱ能力的检测等方法观察脑内GABA含量与细胞免疫在ACTH镇痛中的相互作用。结果表明:(1)腹腔注射ACTH能使海马内GABA含量升高,呈剂量依赖关系。在下丘脑。