凤尾草的化学成分及其对体外大鼠前列腺上皮细胞增生的抑制效应(英文)

目的:研究凤尾草抑制前列腺上皮细胞增生的活性化学成分。方法:大孔树脂、凝胶、正相及反相硅胶柱层析方法用于化合物的分离;红外、紫外、核磁和质谱等方法用于鉴定化合物结构。化合物对大鼠前列腺上皮细胞的抑制活性用MTT方法测定。结果:从凤尾草的丙酮和20%乙醇提取物中,分离并鉴定了22个化合物,其中化合物木犀草素,棕榈酸和芹菜素4′-O-α-L-鼠李糖苷显示与爱普列特相比拟的大鼠前列腺上皮细胞增生体外抑制效应。结论:化合物ptero-sideP′(1)是一个新的C14的倍半萜苷;化合物木犀草素、棕榈酸和芹菜素4′-O-α-L-鼠李糖苷可能是凤尾草能抑制良性前列腺增生的主要活性成分。

麝香配伍乳香对大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响

目的:探讨麝香-乳香配伍处理对正常及慢性前列腺炎模型大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响。方法:80只雄性SD大鼠随机分为8组:正常空白对照组、正常麝香-乳香组、正常麝香组、正常乳香组、模型空白组、模型麝香-乳香组、模型麝香组、模型乳香组。制备慢性前列腺炎大鼠模型,造模60 d时根据组别分别给予麝香0.021 g/(kg·d)、乳香1.05 g/(kg·d)剂量灌胃,麝香-乳香组给予联合剂量,空白组给予生理盐水灌胃。各组别连续灌胃3 d,处死大鼠,取前列腺组织,固定后以免疫组化法检测大鼠前列腺上皮屏障紧密连接功能相关蛋白紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白、胞质附着蛋白1(ZO-1)的表达情况。结果:在病理状态下,仅紧密连接蛋白1的表达增高有统计学意义。麝香、乳香处理后,在生理/病理状态下对4种蛋白的调节作用不同:生理状态下,单用麝香(824.6±393.3)、乳香(982.0±334.0)或配伍处理(1 088.1±640.2)均可大幅度增高紧密连接蛋白1的表达(P<0.05,P<0.01);对于紧密连接蛋白3,单用乳香表达上调(1 009.5±243.6,P<0.05),单用麝香(597.5±80.7)差异无统计学意义,配伍麝香(678.4±255.1)可降低乳香上调表达作用;单用麝香(693.0±424.8)、乳香(732.1±302.0)或配伍处理(560.2±202.3)对闭锁蛋白表达影响差异无统计学意义;单用麝香(290.0±166.8)、乳香(419.7±108.1)对ZO-1表达影响差异无统计学意义,配伍处理后表达明显下调(197.7±98.2,P<0.05)。慢性前列腺炎病理状态下,大鼠前列腺组织紧密连接蛋白1(823.0±100.1)、闭锁蛋白(1 160.0±32.2)表达显著增高(P<0.01,P<0.05);单用麝香(764.9±179.0)、乳香(468.4±220.4)或配伍(335.1±204.0)使用可下调紧密连接蛋白1表达(P<0.05);单用麝香(700.1±223.7)或乳香(744.6±94.5)可上调紧密连接蛋白3表达(P<0.05);单用麝香(749.6±321.7)、乳香(615.0±221.0)或配伍处理(505.8±523.7)均可下调闭锁蛋白表达;单用乳香可上调ZO-1表达(443.2±144.9),与麝香配伍处理后表达下调(213.5±24.9),与单用乳香组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:麝香、乳香对生理/病理状态下前列腺上皮屏障结构紧密连接相关蛋白的调节作用具有选择性和双向性,主要通过ZO-1蛋白的下调实现促通透性作用,而通过调节紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白表达以维持结构稳定性。

大鼠前列腺上皮细胞体外培养及其屏障功能的初步研究

目的:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,并观察其屏障功能。方法:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,采用免疫组化观察腺上皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,光镜以及电镜观察大鼠前列腺上皮细胞的结构组成。采用跨膜电阻测量仪检测前列腺上皮细胞的跨膜电阻,采用酚红渗漏实验检测前列腺上皮细胞的通透性。结果:大鼠前列腺上皮细胞在体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,紧密连接蛋白在相邻的腺上皮细胞之间表达,透射电镜结果显示相邻的单层腺上皮细胞之间存在紧密连接。体外培养的大鼠前列腺上皮细胞跨膜电阻在培养第8天可以达到(201.3±3.5)Ω/cm2,酚红渗漏实验显示随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低。结论:大鼠前列腺上皮细胞具有与脑毛细血管内皮细胞、肠上皮细胞等具有屏障功能的细胞相似的结构和功能,体外培养的大鼠前列腺上皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型。

单纯前列腺上皮内瘤临床和病理特征分析——附23例报告

目的：探讨单纯前列腺上皮内瘤（prostatic intraep ithelial neop lasia,PIN）的临床和病理特征。方法：对23例低度（PIN 1级）PIN（低度组）和8例高度（PIN 2～3级）PIN（高度组）的临床资料进行数理分析,并以同期确诊为前列腺癌、BPH患者作为对照,分析上述各组患者临床和病理特征的差异。结果：高度组的血清总前列腺特异性抗原水平与低度组及BPH组比较差异均有统计学意义（均为P〈0.05）、前列腺特异性抗原密度与低度组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。前列腺癌组的总前列腺特异性抗原、游离前列腺特异性抗原水平,前列腺体积及前列腺特异性抗原密度与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0.05～0.01）。免疫组织化学结果示低度PIN的特征类似于BPH而与前列腺癌有所不同,而少数（1/16）高度PIN患者的肿瘤标志物p504 s呈阳性。结论：低度PIN的临床和病理特征与BPH相似,而高度PIN的临床和病理方面具有一定的前列腺恶性肿瘤特征,需要积极进行临床追踪观察。

活化白细胞粘附分子在前列腺上皮内瘤和前列腺癌中的表达及意义

目的 :探讨活化白细胞粘附分子 (ALCAM)在前列腺上皮内瘤 (PIN)和前列腺癌中的表达及与前列腺癌临床病理特征的关系。 方法 :用免疫组化EnVisionTM方法检测ALCAM蛋白在 4 1例前列腺癌和癌旁PIN、良性腺上皮的表达情况。 结果 :ALCAM在前列腺腺上皮普遍表达 ,在大部分PIN和低分化的前列腺癌表达增加 ,在部分高分化前列腺癌出现表达降低。ALCAM蛋白表达与前列腺癌病理分级相关 ,与术前血清前列腺特异性抗原水平、肿瘤分期无相关性。 结论 :ALCAM在PIN和前列腺癌中存在表达紊乱 ,提示ALCAM在前列腺癌发生发展中起一定作用。

人端粒酶逆转录酶在良性前列腺增生、前列腺上皮内瘤及前列腺癌中的表达及其意义

目的:探讨人端粒酶逆转录酶在良性前列腺增生、前列腺上皮内瘤及前列腺癌组织中的原位表达及其意义。方法:收集良性前列腺增生15例、前列腺上皮内瘤11例及前列腺癌17例。应用免疫组织化学法检测组织中人端粒酶逆转录酶的原位表达,分析良性前列腺增生、前列腺上皮内瘤及前列腺癌中的表达差异并探讨Gleason评分与人端粒酶逆转录酶表达强度的相关性。统计学分析采用Fisher确切概率法和Spearman秩相关分析。结果:人端粒酶逆转录酶的阳性表达率差异在良性前列腺增生组与前列腺癌组间有统计学意义(0%vs 88.24%,P<0.001);在前列腺上皮内瘤组与前列腺癌组间有统计学意义(36.36%vs 88.24%,P=0.01);在前列腺上皮内瘤组与良性前列腺增生组间也有统计学意义(36.36%vs 0%,P=0.022)。Gleason评分与人端粒酶逆转录酶表达强度呈正相关(P<0.05)。结论:人端粒酶逆转录酶在前列腺组织中的高表达,对于鉴别病变的良恶性具有重要意义;人端粒酶逆转录酶在前列腺癌中的表达强度随着Gleason评分的增加而呈现增强趋势;而人端粒酶逆转录酶在前列腺上皮内瘤中表达阳性的患者应列为密切的临床监控对象。

前列腺上皮内肿瘤与前列腺癌的病理形态学研究

目的：探讨前列腺上皮内肿瘤（ＰＩＮ）与前列腺癌的关系。方法：用常规ＨＥ染色、免疫组化、电镜方法，对１１３例前列腺标本进行形态学研究。结果：（１）ＰＩＮ由分泌细胞异型增生所致，其１、２级基底细胞及基底膜完整，３级则为局限性缺失和断裂。（２）ＰＩＮ检出率在前列腺癌例中明显高于非癌例中，癌旁高于远癌区，提示与癌关系密切。（３）免疫组化对ＰＩＮ的分级、ＰＩＮ与癌的鉴别有意义。（４）利用电镜观察癌细胞微足状浸润，对前列腺癌的早期浸润和诊断有价值。结论：ＰＩＮ为前列腺的癌前病变。

三叶因子1和3在前列腺癌及前列腺上皮内瘤中的表达及临床意义

目的:探讨三叶因子1(TFF1)及三叶因子3(TFF3)在前列腺癌(PCa)及前列腺上皮内瘤(PIN)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化法检测89例前列腺癌(PCa)、50例PIN及65例癌旁良性前列腺增生(BPH)组织中TFF1及TFF3的表达情况。结果:TFF1和TFF3在PCa和PIN中的阳性表达率分别为77.53%、48.31%和66.00%、30.00%,显著高于癌旁BPH组织中表达率(分别为49.23%和13.85%,P<0.05),TFF1与PCa Gleason评分无关(P>0.05),TFF3在Gleason评分≤7分PCa组中阳性率(70.00%)高于Gleason评分>7分组(42.03%),差异有统计学意义(P<0.05)。TFF1和TFF3在PCa中的表达无相关性(P>0.05)。结论:TFF1和TFF3可能与PCa的发生有关,并对PCa可能起促进作用,两者有望成为PCa的诊断、鉴别诊断及预后的检测指标。

大鼠前列腺上皮细胞培养鉴定及体外炎症模型建立初探

目的:在体外培养大鼠前列腺上皮细胞,建立脂多糖和蛇毒诱导的大鼠前列腺上皮细胞的体外炎症模型。方法:采用WAJC404培养基在体外培养大鼠的前列腺上皮细胞,通过免疫细胞化学方法对其进行鉴定,加入脂多糖和蛇毒用以建立体外的前列腺炎症模型。结果:在体外培养了大鼠的前列腺上皮细胞,泛细胞角蛋白染色阳性,脂多糖和蛇毒可损伤体外培养的前列腺上皮细胞,但不影响体外培养的前列腺上皮细胞培养液中细胞因子TNF-α和IL-1β及免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量。结论:在体外培养了大鼠的前列腺上皮细胞,对大鼠前列腺体外炎症模型的建立进行了初步探索。

缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素的表达

目的:观察在缺氧条件下前列腺上皮细胞体外培养生长类激素表达的变化。方法:前列腺上皮细胞株RWPE-1体外培养。在缺氧或有氧培养环境中分别于接种后4、8、12、24、48 h检测其生长类激素[表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),转化生长因子β(TGF-β),胰岛素样生长因子-1(IGF-1),血管内皮生长因子(VEGF)]基因和蛋白表达。基因表达采用RT-PCR法检测,蛋白表达采用ELISA法检测。结果:RT-PCR结果显示,随时间延长各类生长因子基因表达均上调,缺氧条件较有氧条件上调尤为明显。以bFGF mRNA表达为例,接种后8 h缺氧条件和有氧条件下bFGF mRNA分别为0.14±0.01和0.12±0.01,差异有统计学意义(P=0.01),至48 h时分别为0.29±0.01和0.14±0.01(P<0.001)。ELISA结果显示,上皮细胞TGF-β表达在缺氧条件下亦显著增加,接种后4 h缺氧和有氧条件下分别为0.32±0.01和0.26±0.01,差异有统计学意义(P=0.017),至48 h时分别为1.56±0.13和0.87±0.06(P<0.001)。其他4种生长因子的蛋白表达在有氧和无氧条件下没有显著性差异。结论:缺氧可刺激前列腺上皮细胞上述各类生长因子基因表达的上调,但仅TGF-β分泌增加。

前列腺上皮内瘤中微血管密度、DNA倍体、免疫表型与其生物学特性的关系

目的探讨微血管密度(MVD)、DNA倍体、免疫表型与前列腺上皮内瘤(PIN)及其生物学特性的关系。方法应用免疫组织化学SP法和计算机图像分析技术,对24例前列腺增生症(BPH)、23例低级别上皮内瘤(LGPIN)、26例前列腺癌(PC)伴发高级别上皮内瘤(HGPIN)的石蜡包埋标本进行CD34、34βE12、P63、P504s表达的检测,定量测定其MVD和细胞核DNA倍体。结果不同级别的PIN中MVD和DNA平均倍体均明显高于BPH组,但明显低于PC组(P<0.01),且随PIN级别的增高,DNA倍体的异多倍体数及MVD值随之升高(P<0.01)。DNA倍体与MVD呈正相关关系。34βEl2和P63在BPH和LGPIN腺体周围的基底细胞呈连续阳性,在HGPIN中呈断续阳性,在PC中呈阴性。P504s在HGPIN中呈灶状阳性,在PC中呈强阳性,在BPH和LGPIN中呈阴性。结论DNA倍体、MVD与PIN密切相关,是反映其生物学特性的重要参考指标;免疫表型进一步证实PIN特别是HGPIN是PC的癌前病变。

EGFR及TGF-α在前列腺腺癌及前列腺上皮内瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)和转化生长因子α(TGF-α)蛋白在前列腺腺癌(PAC)和高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)以及癌旁前列腺良性增生(BPH)组织中的表达,阐明其表达在PAC发生过程中的作用。方法:收集41例PAC和癌旁BPH组织以及32例HGPIN病变组织,采用免疫组化SABC方法检测EGFR和TGF-α在不同病变中的表达。结果:①EGFR在PAC、HGPIN及BPH组织中的阳性表达率分别为56.6%、53.7%及85.4%,在BPH中的表达率高于PAC和HGPIN,差异有统计学意义(P<0.01)。PAC和HGPIN组织中EGFR的表达差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR的表达与肿瘤细胞的分化程度无关,在高、中和低分化PAC组织中阳性表达率分别为53.9%、55.6%及52.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。②TGF-α在PAC中的阳性表达率为56.1%,在癌旁BPH组织中阳性表达率为85.4%,差异有统计学意义(P<0.01),但与肿瘤细胞的分化程度无关,在高、中和低分化PAC阳性表达率分别为53.8%、66.7%及52.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。③TGF-α在HGPIN病变中的阳性表达率为56.3%,与PAC比较差异无统计学意义(P>0.05),但与BPH比较差异有统计学意义(P<0.01)。EGFR和TGF-α在PAC中共同阳性率为81.8%,分别阳性率EGFR为18.2%,TGF-α为26.3%,两者呈正相关(r=0.558,P<0.001),但在HGPIN病变(r=0.111,P=5.450)和BPH(r=0.024,P=0.883)中两者无相关性。结论:EFFR和TGF-α蛋白在PAC、HGPIN和BPH组织中的表达水平不同,可以作为良恶性前列腺疾病的诊断及鉴别诊断指标。

SD大鼠前列腺上皮Kv1.3表达的实验研究

目的探讨Kv1.3钾离子通道在前列腺疾病发病机制中的作用。方法选择年轻的和老年的SD大鼠各30只,先取出前列腺,使用光学显微镜观察其HE切片的组织学特点,应用SP法对其进行免疫组化染色,分别检测Kv1.3钾离子通道在SD大鼠前列腺上皮细胞中的表达。结果30例老年SD大鼠前列腺标本中Kv1.3钾离子通道强表达的有19例,中表达的8例,低表达的3例;30例年轻SD大鼠前列腺标本中Kv1.3钾离子通道强表达的有6例,中表达的9例,低表达的15例;χ2=14.819,P=0.001,两组间差别有统计学意义。结论Kv1.3钾离子通道在SD大鼠前列腺上皮细胞中表达有明显差异,钾离子通道的改变可能参与某些前列腺疾病的发生的机制之一。

前列腺上皮内瘤的临床病理探讨

前列腺上皮内瘤(PIN)是前列腺导管、小管及腺泡上皮细胞的异常增生,近年来研究证实与前列腺癌关系密切,前列腺上皮内瘤(PIN)分为低级别PIN(LGPIN)和高级别PIN(HGPIN),目前,临床说的PIN指的是高级别PIN,低分级PIN不作为独立的病理诊断,高级别PIN被公认是前列腺癌的癌前病变。

乳酸盆底注射诱导小鼠非细菌性前列腺炎及前列腺上皮内瘤样变

目的乳酸的盆底聚集可能在慢性非细菌性前列腺炎发病过程中起着始动作用,采用盆底注射乳酸诱导小鼠前列腺组织的炎症改变加以验证。方法对小鼠进行第1、2、4、7天多次盆底乳酸注射诱发前列腺炎症,并于第2、3、5、8天摘取前列腺组织制作组织学标本,进行HE染色观察。结果组织切片反映出前列腺组织按照盆底乳酸注射时间的延长依次出现了以间质充血水肿,间质及腺泡周围炎性浸润,腺泡腔内出现炎性分泌物为代表特征的炎症病变,最后一组标本中除炎症反应外还观察到了较为明显的腺泡上皮增生,类似于人类的前列腺上皮内瘤(prostatic intra-epithelial neopla-sia,PIN)样变。结论经乳酸盆底注射诱导的小鼠前列腺炎症改变类似于临床患者的病理表现,提示乳酸的盆底聚集在慢性前列腺炎发病机制中起到了重要作用;本实验中观察到的前列腺炎症后PIN样改变为研究慢性前列腺炎与前列腺癌前病变的发生提供了良好的动物模型。

前列腺上皮内瘤的研究进展

前列腺上皮内瘤与前列腺癌关系密切 ,近来的研究进一步证实了这一观点 ,同时为阐明前列腺癌的发生机制以及防治提供了依据。

前列腺上皮内瘤的临床诊治

目的探讨前列腺上皮内瘤(prostatic intraepithelial neoplasm,PIN)的临床诊断和治疗。方法分析37例PIN患者的临床资料。良性前列腺增生合并PIN24例,其中高级别PIN(high grade PIN,HGPIN)8例,低级别PIN(low grade PIN,LGPIN)16例,行TURP手术22例,耻骨上经膀胱前列腺摘除术2例;前列腺癌并发PIN 7例(均为HGPIN),行前列腺根治性切除术5例,2例行雄激素全阻断治疗;其余病例为单纯HGPIN 4例,LGPIN 2例。结果 24例前列腺增生合并PIN患者随访1～6年,22例健康存活,2例HGPIN因年龄>75岁,6个月后重复前列腺穿刺为HGPIN,复查PSA>10ng/L行雄激素全阻断治疗,至今仍健康存活。7例前列腺癌并发HG-PIN者随访1～5年,6例均健康存活,1例5年后死亡。2例单纯HGPIN重复前列腺穿刺活检发现前列腺癌行前列腺根治性切除术,随访2～5年均健康存活。另2例单纯HGPIN及2例单纯LG-PIN予临床密切观察,随访2～6年均健康存活。结论病理检查是诊断PIN的唯一方法,HG-PIN是前列腺癌的癌前病变,应给予严密随访,必要时采取积极的治疗措施。

雌二醇对前列腺上皮细胞增殖的影响及相关机制

目的探讨雌二醇对前列腺增生(BPH)上皮细胞增殖的影响及相关机制。方法0(对照组)、10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mmol/L雌二醇作用BPH-1细胞48 h,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞活力,Ed U染色检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹检测B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Cyclin E表达及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路激活情况。结果10^(-9)mmol/L雌二醇对细胞活力无影响(P>0.05),10^(-5)mmol/L雌二醇显著降低细胞活力(P<0.05),10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)mmol/L雌二醇显著提高细胞活力和细胞增殖率,显著缩短G_1期,显著下调Bax表达,显著上调Bcl-2、Cyclin D1、Cyclin E、PI3K及p-AKT表达(均P<0.05)。结论雌二醇能显著促进BPH-1前列腺上皮细胞增殖,与激活PI3K/AKT信号通路有关。