β-淀粉样肽(25-35)对PC12细胞前列腺凋亡反应蛋白-4和bcl-2基因表达的影响

目的观察β-淀粉样肽(25—35)(β-amyloidpeptide25—35,Ap25-35)诱导PC12细胞凋亡及对前列腺凋亡反应蛋白-4(prostateapoptosisresponse-4,par-4)和bel-2基因表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT—PCR检测par-4和bcl-2基因mRNA表达变化,Westernblot检测Par-4和Bcl-2蛋白表达变化。结果随Aβ25-35浓度的增加,PC12细胞存活率降低,荧光染色可见细胞核固缩、核碎裂,par-4mRNA及蛋白表达增加,bcl-2mRNA及蛋白表达降低。结论在Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡过程中Par-4和Bcl-2蛋白分子可能起重要作用。

前列腺凋亡反应蛋白-4在神经退行性疾病发病机制作用的研究进展

中枢神经退行性疾病主包括阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、亨廷顿病（HD）及肌萎缩型侧索硬化症（ALS）等。在AD、PD、HD、ALS等神经退行性疾病的动物或患者的尸检中发现前列腺凋亡反应蛋白（Par）-4升高,阻断这些疾病中Par-4的表达能抑制神经元的死亡,表明Par-4在神经系统退行性疾病中起关键作用。

母爱剥夺对大鼠行为及纹状体前列腺凋亡反应蛋白基因表达的影响

目的 研究早期母爱剥夺对大鼠成年后的抑郁水平及纹状体前列腺凋亡反应蛋白（par-4）表达的影响，以及甲基化是否参与par-4基因表达的调控。方法按照随机数字表法，将新生幼鼠按窝分为母爱剥夺组和对照组，每组17只；母爱剥夺组仔鼠在出生后的第1～14天，每天接受6h母子分离，对照组不接受任何实验处理；13周龄时，采用强迫游泳实验和糖水偏爱实验测定大鼠的抑郁水平，采用实时定量聚合酶链反应检测纹状体par-4及多巴胺受体2（DRD2）信使RNA（mRNA）表达水平，采用亚硫酸盐测序法检测par-4基因启动子区DNA甲基化水平。结果母爱剥夺组大鼠漂浮时间[（152．80±74．21）S]较对照组[（63．80±80．55）s]延长，糖水偏爱率（0．454-0．23）较对照组（0．69±0．25）降低，差异均有统计学意义（t=2．79，P〈0．05；t=-2．57，P〈0．05）；母爱剥夺组大鼠纹状体内par-4（0．02±0．02）及DRD2mRNA表达量（0．11±0．09）分别为对照组[（0．04±0．02）、（0．32±0．21）]的0．53倍和0．31倍；母爱剥夺组大鼠par-4基因启动子区DNA甲基化水平与对照组相比差异无统计学意义（t=-0．748，P〉0．05）。结论母爱剥夺能引发大鼠抑郁样行为表现，并能抑制纹状体par-4的表达，基因甲基化可能不是其调控机制。

前列腺凋亡反应蛋白-4在神经退行性疾病和精神疾病中的作用

前列腺凋亡反应蛋白-4（Par-4），由Sells等从前列腺癌细胞中分离出来。人类par-4基因位于染色体12q21上，蛋白质分子量约为38KDa，含442个氨基酸残基，有三个重要的功能区：羧基末端的亮氨酸拉链区（LZ），及氨基末端的核定位序列（NLS）NLS1和NLS2。

前列腺凋亡反应蛋白-4抗肿瘤作用研究进展

前列腺凋亡反应基因-4(prostate apoptosis response gene-4,par-4)是从凋亡的前列腺癌细胞中分离出来的一种基因,该基因编码的产物是前列腺凋亡反应蛋白4(Par-4)。Par-4可通过细胞内、外途径调节各种分子表达,诱导癌细胞凋亡,选择性抑制肿瘤细胞生长,因此,Par-4的表达与肿瘤的发生、发展及预后有密切的联系。Par-4在治疗恶性肿瘤中表现出良好的肿瘤细胞靶向杀伤效应,对正常组织细胞无明显影响,故具有极其重要的应用价值。就Par-4特异性诱导肿瘤细胞凋亡及其潜在抗肿瘤作用的进展进行综述。

Par-4特异诱导肿瘤凋亡及其机制的研究新进展

前列腺凋亡反应基因-4(prostate apoptosis response gene-4,par-4)基因是最早在前列腺癌细胞中发现,这个基因在正常细胞和肿瘤细胞中均可表达,其编码产物前列腺凋亡蛋白-(prostate apoptosis response protein,Par-4)可通过内源性和外源性途径选择性的诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有影响。Par-4发挥作用可包括内源性Par-4裂解和磷酸化、内源性Par-4转运Fas/Fas L并激活Fas/Fas L促凋亡通路、及外源性的Par-4和细胞膜上的GPR78结合诱导细胞凋亡等过程。特别是Par-4的外源性途径在肿瘤的靶向治疗中有很重要的应用价值。本文就Par-4诱导凋亡机制及外源性Par-4在肿瘤治疗方面的最新研究进展进行综述。

鱼藤酮致PC12细胞凋亡中Par-4蛋白的表达

目的探讨鱼藤酮致大鼠多巴胺能嗜铬细胞瘤(PC12)细胞凋亡中前列腺凋亡反应蛋白(Par-4)表达变化,为帕金森病(PD)的基因治疗提供新的靶点。方法以1、5、10μmol/L的鱼藤酮分别作用于PC12细胞6、24 h,采用MTT比色法检测细胞存活率;采用Western blot法筛选出Par-4表达改变明显的鱼藤酮浓度和作用时间,给予信号转导抑制剂,检测Par-4表达量的变化。结果1、5、10μmol/L鱼藤酮干预后,PC12细胞出现不同程度的受毒形态改变,6 h后,10μmol/L组光密度比值显著升高(P=0.029 646);20μmol/L c-jun氨基末端激酶(JNK)信号通路抑制剂Ginestin预处理1 h,光密度比值与单纯鱼藤酮作用组比较显著降低(P=0.013 1);24 h后,PC12细胞的存活率降低显著,1、5μmol/L 2组光密度比值均升高,与对照组差异有统计学意义(P=0.018 461,P=0.043 415)。结论鱼藤酮可诱导PC12细胞Par-4凋亡蛋白表达升高,具有时间和浓度依赖性,JNK通路参与其信号转导途径。

慢性应激诱导的抑郁大鼠纹状体par-4基因的表达

为研究慢性温和应激诱导的抑郁大鼠纹状体内前列腺凋亡反应蛋白(prostate apoptosis response-4,par-4)的表达,及甲基化是否参与par-4基因表达的调控,将10周龄大鼠随机分为实验组和对照组,实验组接受慢性温和应激,对照组不接受实验性处理。于大鼠13周龄时,采用强迫游泳、糖水偏爱测验测定大鼠的抑郁水平,以实时定量PCR检测纹状体par-4及多巴胺D2受体(Dopamine receptor D2,DRD2)mRNA表达水平,免疫印迹法检测纹状体par-4蛋白质表达水平,用亚硫酸盐测序法检测par-4基因启动子区甲基化水平。结果发现,与对照组大鼠相比,实验组大鼠漂浮时间延长,糖水偏爱率降低,脑纹状体par-4、DRD2mRNA及par-4蛋白质表达水平均降低,par-4基因启动子区甲基化水平两组差异不显著。提示慢性温和应激诱导大鼠产生了抑郁样行为,并能抑制纹状体par-4基因的表达,而基因甲基化可能并不参与其调控机制。

活性小分子提高Par-4水平的研究进展

新兴的化疗药使肿瘤治疗从传统的细胞毒性药物治疗时代跨越到精准分子靶向治疗时代。在众多促凋亡抑癌基因中,前列腺凋亡反应基因-4编码的前列腺凋亡反应蛋白-4(Par-4)与肿瘤细胞表面过表达受体——葡萄糖调节蛋白78结合,通过胞内线粒体凋亡途径、死亡受体凋亡途径和胞外旁分泌通路共同诱导肿瘤细胞凋亡而不进攻正常细胞,在体外和体内显示出良好的抗肿瘤活性,无明显的细胞和全身毒性。来源于植物和微生物衍生物以及人工合成的活性小分子可调节Par-4水平,这些活性小分子通过结合细胞内的波形蛋白,将Par-4从波形蛋白中置换出来,从而发挥抗肿瘤活性。但目前关于这类活性小分子的报道较少,未来应进行深入研究。