肿瘤相关成纤维细胞在晚期前列腺癌免疫诊疗中的研究进展

晚期前列腺癌存在预后差、易复发、易转移以及耐药等预后不良的情况,其特点为间质结缔组织显著增生。目前,在治疗晚期前列腺癌时,免疫疗法是一种常用的方法,其作用是通过免疫活化来实现。既往研究显示,在肿瘤微环境中,患者的预后与其自身免疫反应相关。肿瘤微环境主要由肿瘤相关成纤维细胞、免疫细胞和细胞外基质组成。其中肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤间质的主要成分,不仅具有较强的增殖能力,还可通过与免疫细胞的相互作用来影响免疫细胞的活性,进而影响患者的免疫治疗效果。但是,目前关于前列腺癌组织中的肿瘤相关成纤维细胞的作用机制尚不明确。本文详述了肿瘤相关成纤维细胞对前列腺癌免疫细胞的调节机制,以期推动晚期前列腺癌的免疫治疗策略。

良性前列腺增生患者前列腺组织及外周血Th1/Th2/Th17及相关细胞因子多参数检测的临床意义

目的:探讨良性前列腺增生(BPH)患者前列腺组织与外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2/Th17相关细胞因子的表达及临床意义。方法:选取120例接受外科手术治疗的BPH患者为BPH组,采集术中前列腺组织标本,根据病理检查是否伴有前列腺炎症(PI)分为单纯BPH组和BPH-PI组。检测前列腺组织中相关细胞因子蛋白表达,术前检测外周血Th1/Th2/Th17细胞比例和IL-17A、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平,并选取40例健康男性作为对照组。结果:BPH组患者Th1细胞数、Th1/Th2比值和Th17细胞数较对照组明显升高(P<0.05),且BPH-PI组显著高于单纯BPH组(P<0.05)。BPH组外周血IL-17A、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平均显著高于对照组(P<0.05),且BPH-PI组显著高于单纯BPH组(P<0.05)。BPH-PI组患者前列腺组织中IL-17A、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10蛋白表达显著高于单纯BPH组(P<0.05)。结论:BPH患者存在Th1/Th2/Th17相关细胞因子表达紊乱,且合并PI时更为显著。Th2优势分化和Th17过表达与BPH的发生发展显著相关。

加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达水平的影响

目的通过加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达水平影响的研究,探讨加味桂枝茯苓颗粒对良性前列腺增生症(BPH)的作用机制。方法2013年1月—2015年6月,选取90只雄性SD大鼠,采用随机数字表法将其分成正常组(A组,25只)和模型组(65只),A组随机取20只,模型组在验证造模成功后随机取60只,模型组采用随机数字表进一步分为对照组(B组,20只)、加味桂枝茯苓颗粒组(C组,20只)、非那雄胺片组(D组,20只)。A组大鼠正常饲养,模型组造模,之后B组大鼠0.9%氯化钠溶液灌胃,C组大鼠加味桂枝茯苓颗粒溶液灌胃,D组大鼠非那雄胺片溶液灌胃。于末次灌胃治疗结束24 h后进行前列腺组织标本采集。记录各组大鼠前列腺体积、前列腺增生指数,采用免疫组化SP法检测VEGF、b FGF表达水平。结果 B组前列腺体积、前列腺增生指数大于A组(P<0.05);C组、D组前列腺体积、前列腺增生指数小于B组(P<0.05)。B组、C组、D组VEGF、b FGF表达水平高于A组(P<0.05);C组、D组VEGF、b FGF表达水平低于B组(P<0.05)。结论加味桂枝茯苓颗粒通过降低大鼠前列腺增生腺体组织中VEGF、b FGF表达水平,进而缩小前列腺体积,降低前列腺增生指数,从而达到治疗BPH的效果。

碱性成纤维细胞生长因子在前列腺增生和癌组织中表达的临床意义

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在前列腺增生和前列腺癌组织中表达的临床意义。方法 :采用斑点杂交技术和免疫组化染色 ,测定 40例正常前列腺 (NP)、3 8例前列腺增生症 (BPH )和 3 6例前列腺癌组织 (Pca)中b FGF的表达。结果 :BPH和Pca组织中 ,b FGF的表达明显高于NP组织 (P <0 .0 1)。b FGF表达升高的程度与BPH的分度、Pca的病理分级和临床分期均无明显关系。结论 :b FGF可能为BPH和Pca组织自身分泌 。

前列腺增生症合并前列腺炎患者促炎性细胞因子的变化特点

目的：观察促炎性细胞因子在前列腺增生症合并前列腺炎患者中的变化特点。方法选取2012年6月—2014年1月住院的前列腺疾病患者70例，前列腺增生症合并前列腺炎患者35例为观察组，单纯患有前列腺增生症患者35例为对照组。采用免疫组化方法和免疫荧光定量PCR检测法对患者的促炎性细胞因子进行检测，包括白介素8（IL－8）、成纤维生长因子2（FGF－2）和基质金属蛋白酶2（MMP－2）、转化生长因子－β（TGF－β1）。然后再通过免疫组织化学法检测患者的肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白介素6（IL－6）和分化簇3（CD3）的含量；最后对检测结果进行统计分析。结果观察组IL－8、FGF－2和MMP－2蛋白及IL－8 mRNA、FGF－2 mRNA和MMP－2 mRNA水平均高于对照组（ t ＝2．5401、2．8599、12．7551、19．1245、12．2944、8．5323， P均＜0．01）；TNF－α水平高于对照组但差异无统计意义（ t ＝1．4275， P ＞0．05），IL－6、CD3水平高于对照组（ t ＝3．9420、6．9881， P ＜0．01）；bFGF－2蛋白表达中度以上患者对照组占37．1％低于观察组的80．0％，TGF－β1蛋白表达情况中度及以上患者对照组占20．0％低于观察组的82．8％（χ2＝2．7218、2．6784， P ＜0．01）。结论促炎性细胞因子在前列腺增生症合并前列腺炎患者中均较单纯前列腺增生症患者高表达，前列腺炎可能影响前列腺增生症的变化。

碱性成纤维细胞生长因子在前列腺癌和良性前列腺增生组织中表达的意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在前列腺癌和良性前列腺增生组织中表达的意义。方法采用斑点杂交和免疫组化法测定50例正常前列腺组织(正常对照组)、40例良性前列腺肥大(BPH)组织和48例前列腺癌组织中bFGF的表达情况。结果BPH和前列腺癌组织中bFGF的表达明显高于正常对照组(P<0.01)。bFGF表达升高的程度与BPH的分度、前列腺癌的病理分级和临床分期关系不显著。结论bFGF与前列腺癌和前列腺增生的发生发展过程有关。

前列腺癌与良性前列腺增生患者血清细胞因子差异的蛋白质组学研究

目的:探讨前列腺癌与BPH患者血清细胞因子的差异,为前列腺癌的早期诊断提供血清蛋白质组学依据。方法:应用细胞因子抗体芯片技术,对12例PSA在灰度范围内、经穿刺活检证实的前列腺癌和BPH患者的血清进行细胞因子芯片检测。结果:筛选出19种有明显差异表达的蛋白质(差异>1.5倍),其中前列腺癌组表达明显上调的有IL-3、IL-6、IL-16等16个细胞因子,表达明显下调的有Fas/TNFRSF6、TRALR-3、IGFBP-6等3个细胞因子。其中多个蛋白与细胞的转录、增殖、信号转导和细胞凋亡等生物过程有关。结论:细胞因子抗体芯片技术能够对较小血清样本同时检测多个指标,能够筛选出与癌细胞生物学行为密切相关的"关键细胞因子",有助于寻找用于前列腺癌早期诊断、判断疗效和预后的分子标志物。

湿热消腰部热敷疗法对EAP模型前列腺Th17细胞相关因子表达的影响

目的：通过检测湿热消腰部热敷疗法对实验性自身免疫性前列腺炎（EAP）（湿热证）小鼠模型前列腺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-6（IL-6）和IL^（-1）7A表达的影响,探讨湿热消腰部热敷疗法可能的作用机制。方法：120只健康雄性KM小鼠,随机抽取20只为正常组,其余100只应用Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂及中医病因造模法制备实验性自身免疫性前列腺炎（湿热证）小鼠模型,造模成功后的小鼠随机分为模型组、基质组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。脱去各组小鼠腰1~腰3椎体处毛发,低剂量组、中剂量组和高剂量组用湿热消棉垫、基质组用凡士林棉垫、正常组及模型组用生理盐水棉垫,所用棉垫加热至45℃左右外敷于小鼠脱毛区,每次治疗10min,正常组、模型组、基质组和低剂量组1次/d,中剂量组2次/d,高剂量组3次/d,连续干预4周后处死,用免疫组化法和Western Blot检测检测各组小鼠前列腺组织中TGF-β1、IL-6和IL^（-1）7A的表达。结果：造模后,模型小鼠的症状、体征及病理学改变基本符合慢性前列腺炎（湿热证）的表现。免疫组化法和Western Blot结果显示,模型组与正常组相比,前列腺组织中TGF-β1表达明显下降,IL-6和IL^（-1）7A表达显著提高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组比较,高、中、低剂量组IL-6和IL^（-1）7A显著下降（P〈0.05）,高、中剂量组TGF-β1显著提高（P〈0.05）。结论：湿热消腰部热敷疗法通过调节TGF-β1和IL-6的表达,抑制Th17细胞的分化而在CP的治疗中发挥作用。

癌胚抗原相关细胞黏附分子6、血管内皮生长因子、血管生成素2在前列腺腺癌中的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测前列腺腺癌中癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素(ANG)2的表达,观察其临床价值。方法 83例经病理学确诊为前列腺腺癌患者作为研究组,留取术后蜡块组织,83例前列腺增生患者作为对照组,留取术后蜡块组织。CEACAM6、VEGF和ANG2蛋白表达的检测应用免疫组化二步法。结果研究组CEACAM6、VEGF和ANG2表达阳性率明显高于对照组。研究组CEACAM6、VEGF和ANG2阳性率与Gleason评分、TNM分期、脉管内瘤栓和Ki67增殖指数密切相关。相关性分析显示研究组中CEACAM6和VEGF、CEACAM6和ANG2具有正相关性。结论 CEACAM6、VEGF和ANG2在前列腺腺癌术后组织表达明显升高,三者参与肿瘤的进展及细胞增殖。CEACAM6可能与VEGF和ANG2蛋白的表达有协同作用。

紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用

目的探讨紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的抑制作用。方法MTT法测定紫杉醇、TRAIL及紫杉醇联合TRAIL作用于LNCAP、Du145、PC3细胞后的细胞生存率,同时,用流式细胞技术测定3种细胞的凋亡率。结果2ng/ml TRAIL对LNCAP、PC3细胞有明显的抑制作用,但对Du145细胞抑制作用不明显;当TRAIL与紫杉醇联用则对3种癌细胞均显示出明显的抑制作用,且发生在给药24h后,72h时抑制作用最强。TRAIL对3种癌细胞有诱导凋亡作用,5ng/ml较2ng/ml作用强;紫杉醇与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用。结论紫杉醇与TRAIL联合应用能明显增强对LNCAP、Du145、PC3细胞的抑瘤效果和诱导凋亡作用。

成纤维细胞生长因子10在前列腺增生组织中的表达

目的 检测前列腺增生组织中成纤维细胞生长因子 10(FGF 10 )的表达 ,探讨其在前列腺增生中的作用。方法 应用半定量RT PCR技术和免疫组织化学方法 ,检测 2 0例前列腺增生组织中FGF 10的表达 ,并与正常的前列腺组织进行比较。结果 前列腺增生组织中FGF 10mRNA的水平高于正常前列腺组织 ;前列腺组织中均见FGF 10阳性染色 ,前列腺增生组织中表达显著高于正常的前列腺组织。结论 前列腺增生组织中FGF 10的表达高于正常前列腺组织 ,提示FGF

人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达及意义

目的检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2(Nrf2)、人类线粒体转录因子A(TFAM)的表达,并分析其表达与Gleason评分的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman相关分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达与Gleason评分正相关(P值为0.0052,0.0003);Nrf2与TFAM的表达也有相关性(P=0.006)。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。

DIM联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用

目的探讨3,3-二吲哚基甲烷(DIM)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的抑制作用。方法CCK-8法测定DIM、TRAIL及DIM联合TRAIL作用于PC-3细胞后的细胞生存率,同时用流式细胞术测定细胞凋亡率,Western印迹检测caspase-3表达水平的变化。结果各给药组与对照组比较均能不同程度抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡,且caspase-3表达上调;DIM与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用。结论DIM与TRAIL联用均可明显增强PC-3细胞抑制效果和诱导凋亡作用,其凋亡作用机制可能与其上调caspase-3表达有关。

血管瘤患儿血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及转录激活因子3水平与瘤体增生的相关性

目的探索血管瘤患儿血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及转录激活因子3(STAT3)的表达水平并分析其与瘤体增生的相关性。方法选取2020年1月—2023年1月收治的152例血管瘤增生患儿作为研究对象,分为增生期组(87例)与退化期组(65例),另选择同期确诊为血管畸形的53例患儿作为血管畸形组。对血清GM-CSF、STAT3及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管生成素-1(Ang-1)的表达水平进行检测;Pearson法相关性分析血清GM-CSF、STAT3与bFGF、VEGF、HIF-1α、Ang-1的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GM-CSF、STAT3对血管瘤瘤体增生的预测价值;多因素Logistic回归分析血管瘤瘤体增生的影响因素。结果增生期组患儿血清bFGF、VEGF、HIF-1α、GM-CSF、STAT3表达水平高于血管畸形组及退化期组患儿(P<0.05),但血清Ang-1表达水平低于血管畸形组及退化期组患儿(P<0.05);Pearson法相关性分析显示,增生期组患儿血清GM-CSF及STAT3水平均与bFGF、VEGF、HIF-1α水平正相关,与Ang-1水平负相关;ROC曲线下面积显示,GM-CSF和STAT3单独预测血管瘤瘤体增生风险的AUC分别为0.847,0.822,联合预测的AUC为0.918,联合预测的效能显著大于GM-CSF单独诊断的AUC(Z=2.459,P=0.014),STAT3单独诊断的AUC(Z=3.371,P=0.001)。多因素Logistic回归分析显示GM-CSF、STAT3是血管瘤瘤体增生的影响因素(P<0.05)。结论血管瘤瘤体增生患儿血清GM-CSF及STAT3表达水平升高,是瘤体增生的影响因素,联合检测能较好的预测血管瘤瘤体增生风险。

性激素受体及相关生长因子在前列腺基质细胞中的表达

目的 :探讨前列腺基质增生的发病机制与性激素以及相关生长因子的关系。方法 :应用RT PCR的方法研究了在人前列腺不同细胞类型中Smoothelin的表达 ,研究了雄、雌激素受体及相关生长因子在前列腺基质细胞中的表达 ,以及它们在前列腺基质细胞分化中表达的变化。结果 :Smoothelin是前列腺平滑肌细胞特异性的标记蛋白 ;雄激素受体 (AR)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、角化细胞生长因子 (KGF)主要在前列腺成纤维细胞中表达 ,而雌激素受体 (ER)、转移生长因子 β1 (TGFβ1 )主要在平滑肌细胞中表达。结论 :前列腺基质增生与雌激素受体和转移生长因子 β1

A型肉毒毒素对大鼠前列腺增生组织中缺氧诱导因子-1α及血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的探讨A型肉毒毒素(BTX-A)对大鼠前列腺增生组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法取60只大鼠,实验组45只,空白对照组15只。实验组大鼠均制作前列腺增生模型,1周后两组均随机处死5只大鼠观察建模是否成功。实验组剩余大鼠随机分为高剂量组(注射10U/0.1ml BTX-A)、中剂量组(注射6U/0.1ml BTX-A)、低剂量组(注射2U/0.1ml BTX-A)、阴性对照组(注射0.1ml0.9%氯化钠溶液),术后各组继续给予长效雄激素(十一酸睾酮针4mg·kg^(-1)·d^(-1))维持。空白对照组仍给予等量橄榄油皮下注射。4周后处死各组大鼠,取出前列腺称重,免疫组化法检测比较各组大鼠前列腺组织中HIF-1α和VEGF的表达情况。结果大鼠前列腺增生模型建立成功。实验组大鼠HIF-1α在细胞质与细胞核均有表达,在新生血管周围表达明显增强,而VEGF的表达主要在细胞质中。与空白对照组比较,其他各组大鼠前列腺湿重均发生明显变化,差异均有统计学意义(均P<0.05);与阴性对照组比较。低、中、高剂量组大鼠前列腺湿重均发生明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。空白组及阴性对照组均未见HIF-1α的表达;与空白对照组比较,高、中、低剂量组VEGF及HIF-1α的阳性表达率及灰度值、阴性对照组VEGF灰度值均发生明显变化(均P<0.05);与阴性对照组比较,中、低剂量组VEGF及HIF-1α的阳性表达率和高、中、低剂量组VEGF及HIF-1α的灰度值均发生明显变化(均P<0.05);与低剂量组比较,高、中剂量组VEGF及HIF-1α的阳性表达率及灰度值均发生明显变化(均P<0.05);与中剂量组比较,高剂量组VEGF的阳性表达率及灰度值和HIF-1α的阳性表达率均发生明显变化(均P<0.05)。实验组大鼠HIF-1α与VEGF的表达呈明显正相关关系(r=0.575,P<0.01)。结论前列腺内注射BTX-A可以通过抑制HIF-1α和VEGF的表达,从而抑制前列腺组织的血管形成.促使前列腺缩小。

经尿道等离子电切术治疗前列腺增生及对疼痛介质、单核细胞趋化因子-1和前列腺特异抗原的影响

目的研究经尿道等离子电切术(TUPKRP)治疗前列腺增生及对疼痛介质、单核细胞趋化因子(MCP)-1和前列腺特异抗原(PSA)的影响。方法2016年9月~2019年10月在我院接受治疗的前列腺增生病人100例,依据随机数字表法分为对照组和研究组,每组50例。对照组采用经尿道前列腺电切术(TURP)治疗,研究组采用TUPKRP治疗,观察并对比两组围术期情况,手术前后疼痛介质,MCP-1和PSA水平,最大尿流率(Q_(max)),国际前列腺症状评分表(IPSS),生活质量(QOL)评分变化情况及并发症。结果研究组术中出血量、手术时间、膀胱冲洗时间、导管留置时间和住院时间少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后24小时,两组疼痛介质均上升,研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月,两组MCP-1和PSA水平均下降,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月,两组Q_(max)均上升,IPSS和QOL评分均下降,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。研究组并发症总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TUPKRP治疗前列腺增生能够达到和TURP相似的手术效果,均可降低MCP-1和PSA水平,但TUPKTP的疼痛介质影响较小,安全性更高。

前列腺增生组织中碱性成纤维细胞生长因子表达的研究

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在前列腺增生组织中的表达、分布及其临床意义。方法 :利用免疫组织化学方法检测 5例正常前列腺组织 (NP)、4 0例良性前列腺增生症 (BPH)组织中b FGF的分布和表达。结果 :BPH组织中b FGF的阳性率为 84 .8% ,主要分布于间质细胞 ,少数腺上皮细胞胞浆也可见染色 ,而正常前列腺组织中b FGF表达均为阴性 ,二者之间阳性率差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。结论 :表明b

血管新生相关因子mRNA在前列腺增生大鼠组织中的表达

目的探讨血管生长相关因子与大鼠良性前列腺增生(BPH)的相关性。方法将成年SD大鼠随机分为正常组、BPH模型组,每组10只,采用去势后皮下注射丙酸睾酮法建立大鼠BPH模型,30 d后观察2组大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)和转化生长因子(TGF-β_1)mRNA表达情况。结果大鼠前列腺指数BPH模型组显著大于正常组(P<0.05);光镜显示BPH模型组前列腺上皮细胞增生明显,与正常组比较,VEGF、EGF、bFGF的mRNA表达显著增多,TGF-β_1表达显著减少(P<0.05)。结论VEGF、EGF、bFGF在大鼠的BPH组织中表达上调和TGF-β_1表达下调,它们可能通过影响前列腺组织中血管内皮细胞增殖,参与BPH的发生发展过程,并促进其血管新生。