靶向干扰前列腺源性ETS因子促进HT29细胞的增殖与侵袭

目的:结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,研究发现在结直肠组织,前列腺源性ETS因子(Prostate-derived Ets factor,PDEF)的表达可以促进分泌性祖细胞向杯状细胞分化,因此结直肠癌的发生可能与PDEF的表达有关。本研究旨在探讨靶向干扰前列腺源性ETS因子对结直肠癌细胞株HT29增殖与侵袭的影响。方法:阳离子脂质体法将PDEF干扰质粒和空白对照空质粒瞬时转染HT29细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR、Western blot技术测定正常对照组、空白对照组和shRNA组中PDEF mRNA和蛋白的表达情况;MTT法检测HT29细胞的增殖情况;采用Transwell迁移实验观察细胞侵袭能力。结果:干扰质粒、空质粒成功转染HT29细胞,通过荧光显微镜可以观察到绿色荧光蛋白的表达;Western blot结果可见shRNA组PDEF蛋白的表达较正常对照组和空白对照组降低;MTT法检测发现干扰PDEF基因的表达能够明显促进HT29细胞的增殖(P<0.05);48 h后,shRNA组细胞侵袭能力明显强于正常对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:在HT29细胞中干扰PDEF的表达,可以促进细胞的增殖与侵袭。

前列腺源性ETS因子对HCT116细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨前列腺源性ETS因子(prostate-derived Ets factor,PDEF)对HCT116细胞增殖与凋亡的影响。方法体外培养HCT116细胞,分成空白对照组,空质粒组和重组表达质粒组,空质粒组转染不含PDEF的空载体,重组表达质粒组转染PDEF重组表达质粒。荧光显微镜下观察PDEF重组质粒表达情况;RT-PCR、Western blot检测3组细胞PDEF mRNA和蛋白的表达情况;CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果荧光显微镜下空质粒组和重组表达质粒组HCT116细胞均可观察到绿色荧光蛋白的表达,表明质粒已成功转染HCT116细胞;RT-PCR结果显示,与空质粒组相比,重组质粒组PDEF基因表达增高263倍;Western blot结果可见重组质粒组有PDEF蛋白的表达,而空质粒组和对照组没有;CCK8法检测发现PDEF基因的表达能够明显抑制HCT116细胞的增殖(P<0.05);流式细胞仪结果显示重组质粒组细胞凋亡率显著高于对照组和空质粒组(P<0.05)。结论在HCT116细胞中表达前列腺上皮源性ETS转录因子,可以抑制细胞的增殖和促进细胞凋亡。

前列腺源性ETS因子在哮喘及鼻黏膜炎性疾病中的研究进展

含SAM尖端结构域的E26转化特异性因子(SPDEF)是ETS转录因子家族的最新成员之一,SPDEF又称为前列腺源性ETS因子(PDEF),首次发现其在前列腺癌中高度表达,参与肿瘤细胞的增殖分化、迁移凋亡和血管形成。近年来研究发现SPDEF与杯状细胞增生和分化密切相关,是调控呼吸道黏液高分泌的核心因子。对SPDEF调控黏液高分泌的机制及其在呼吸道慢性炎性疾病中的研究进展做一综述,以期为呼吸道黏液高分泌疾病的发病机制和诊治提供新思路。

伴有膀胱过度活动症症状的良性前列腺增生患者尿液中脑源性神经营养因子的表达

目的：探讨伴有膀胱过度活动症（overactive bladder,OAB）症状的良性前列腺增生患者尿液中脑源性神经营养因子（brainderived neurotrophic factor,BDNF）的表达水平,以及其与OAB症状严重程度的相关性.方法：根据纳入标准和排除标准共纳入178例拟行经尿道前列腺电切术的良性前列腺增生患者,行常规术前检查及尿动力学检查,采用国际前列腺症状评分表和OAB症状评分表进行症状评估,采用ELISA方法检测患者尿液BDNF表达水平,结果用尿液标本的肌酐（Cr）值进行标准化BDNF/Cr （mg/mol）.结果：中度和重度下尿路症状患者尿液BDNF/Cr平均值分别为（1.189±0.753） mg/mol和（1.817±1.110） mg/mol （P＜0.001）.梗阻Ⅲ～Ⅵ级患者尿液BDNF/Cr平均值分别为（1.382±0.945） mg/mol、（1.435±0.938） mg/mol、（1.640±1.104） mg/mol和（1.653±1.019） mg/mol （P＞0.05）,BDNF/Cr值与梗阻的严重程度无显著的相关关系（r=0.103,P=0.173）.不伴OAB症状和伴OAB症状患者的尿液BDNF/Cr平均值分别为（0.297 ±0.183） mg/mol和（1.913±0.843） mg/mol（P＜0.001）.轻度、中度和重度OAB症状患者的尿液BDNF/Cr平均值分别为（1.501±0.543） mg/mol、（1.806±0.703） mg/mol和（2.560±0.979） mg/mol（P＜0.05）,尿液BDNF/Cr值与OAB症状的严重程度呈显著的相关关系（r =0.743,P＜0.001）.不伴逼尿肌过度活动症状和伴逼尿肌过度活动症状患者的尿液BDNF/Cr平均值分别为（1.194±1.013） mg/mol和（1.917±0.866） mg/mol （P＜0.001）.结论：中度和重度下尿路症状的良性前列腺增生患者尿液中BDNF表达水平与梗阻程度没有明显相关性;与不伴有OAB症状的良性前列腺增生患者相比,伴有OAB症状的患者尿液中BDNF的表达水平会明显升高,且与OAB症状的严重程度相关.

色素上皮源性因子在前列腺增生组织中的表达

目的观察色素上皮源性因子(PEDF)在良性前列腺增生组织中的表达,探讨这种血管源性因子在前列腺良性增生性疾病发生、发展中的作用。方法以临床收集到的确诊为前列腺增生病变37例组织及来自意外死亡成年男性志愿者的正常前列腺组织7例标本作为研究对象。以HE染色观察病理状况下前列腺的组织结构改变;以免疫组织化学染色法定位并定量PEDF在前列腺组织中的表达,并比较两组间表达的差异性。结果 HE染色显示前列腺增生病变表现为特征性的组织病理学改变。免疫组织化学染色观察到PEDF表达主要定位于前列腺组织的腺上皮细胞、基质细胞,尤其是平滑肌细胞;在良性前列腺增生组织中PEDF表达逐渐减少,两组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论正常前列腺组织有PEDF的大量表达,表明其在维持正常机体前列腺的完整性方面发挥一定的作用;前列腺增生组织PEDF表达较正常明显减少,提示减少的血管形成抑制因子可能促进了这种疾病的发生、发展。

加味虎杖散对自身免疫性前列腺炎模型大鼠炎症因子MCP-1及PDGF-BB表达的影响

目的:观察加味虎杖散对自身免疫性前列腺炎模型大鼠炎症因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、血小板源生长因子BB(PDGF-BB)基因及蛋白表达的影响。方法:将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,除正常组外,其余5组应用大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂制备实验性自身免疫性前列腺炎大鼠模型,造模60d时正常组、模型组予生理盐水,西药组予消炎痛,加味虎杖散大剂量、中剂量、小剂量组分别按生药量0.445、0.223、0.089g/kg体重予中药复方连续灌胃,各组给药30d时处死,采用免疫组化、荧光定量RT-PCR等方法检测炎症因子mRNA及蛋白的表达。结果:加味虎杖散大、中、小剂量组前列腺组织MCP-1、PDGF-BBmRNA表达水平(MCP-1:0.31±0.14、0.49±0.21、0.62±0.28;PDGF-BB:0.50±0.22、0.54±0.17、0.71±0.29)及蛋白的IA值(MCP-1:677±208、725±311、1302±884;PDGF-BB:1265±698、1347±827、1655±812)与模型组(MCP-1mRNA:1.12±0.43;MCP-1蛋白:2201±934;PDGF-BBmRNA:1.14±0.51;PDGF-BB蛋白:2754±852)比较显著降低(P<0.05),且大、中剂量组作用要优于小剂量组(P<0.05);西药组MCP-1(mRNA:0.71±0.34;蛋白:1824±1157)、PDGF-BB(mRNA:1.08±0.37;蛋白:2493±924)表达水平显著高于加味虎杖散各组(P<0.01)。结论:调控炎症因子MCP-1、PDGF-BB可能是加味虎杖散治疗慢性非细菌性前列腺炎的重要分子机制之一。

前列腺癌中神经营养因子及其受体的表达

目的:研究神经营养因子(NTFs)及其受体在前列腺癌中的表达。方法:采用免疫印迹法检测35例前列腺癌患者前列腺组织中神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)以及其受体TrkA、TrkB、p75的表达,并以10例意外死亡年轻人正常前列腺组织中表达水平作对照。结果:与对照组相比,癌组织中NGF表达下降,而BDNF表达上调,差异均具有显著性(P<0.01);另外,癌组织中p75表达下调,但TrkA、TrkB表达均上调,且差异都具有显著性(P<0.05)。结论:NGF、BDNF及其受体表达变化与前列腺癌发生发展有关,可作为诊断前列腺癌的参考指标。

谐振效应致椎间盘源性下腰痛血清炎性因子变化的实验研究

目的观察谐振效应引起椎间盘源性下腰痛相关炎性指标血清含量的动态变化,探讨谐振对椎间盘的损伤机制和椎间盘源性下腰痛的早期血清生物标志物。方法取90只成年健康的日本大耳白兔,随机分为5组,每组18只。A组为正常对照组;B为造模对照组;C为4 Hz振动组;D为5 Hz振动组;E为6 Hz振动组。分别于2、4、6周每组在清晨空腹下经耳源静脉穿刺抽取5 ml静脉血,装于抗凝试管,离心取上清液在低温下保存,分别用ELISA法进行6-酮前列腺素1α(6-keto-PGF 1α)、白细胞介素1、肿瘤坏死因子-α的血清含量测定,观察其动态变化。结果振动刺激6 Hz组及5 Hz组血清6-keto-PGF 1α的浓度在第2周末,第4周末、第6周末均明显高于造模对照组(P<0.05),振动刺激6 Hz组血清6-keto-PGF 1α浓度升高时间明显早于血清IL-1β浓度和血清TNF-α浓度。结论谐振与椎间盘源性下腰痛的炎性疼痛机制密切相关,可能导致椎间盘组织通透性增大并产生的高浓度炎性因子;监测血清6-keto-PGF 1α浓度可以较早、稳定地反映椎间盘源性下腰痛内炎性介质的变化,为椎间盘源性下腰痛的早期诊断提供了一个很好的参考。

髓源性抑制细胞与促炎因子在卵巢恶性肿瘤中的研究进展

髓源性抑制细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)是一类具有显著免疫抑制活性的异质细胞群,包括处于不同分化阶段的未成熟的粒细胞、树突状细胞和巨噬细胞等。MDSCs可抑制CD4+、CD8+T细胞介导的适应性免疫应答,介导肿瘤免疫逃逸而促进肿瘤的生长和转移。促炎因子是一类主要由免疫细胞生成的具有许多强大生物学效应的内源性多肽,可介导多种免疫反应。MDSCs与促炎因子在卵巢癌中的分子信号传递及其机制仍不完全清楚,目前的研究提示部分促炎因子可诱导MDSCs扩增,进而促进肿瘤生长及发展。本文就MDSCs及相关促炎因子在卵巢恶性肿瘤中发生、发展和治疗的研究进行综述,以期更全面揭示MDSCs的作用机制,为探讨新的治疗方法提供理论基础。

前列腺上皮源性Ets转录因子在激素非依赖性前列腺癌中的表达

众多研究结果显示前列腺上皮源性Ets转录因子（PDEF）具有较强的肿瘤相关性，提示可以在临床上以PDEF作为靶基因，制定出特异性的肿瘤治疗和控制方案，我们先期研究表明随着前列腺癌临床分期进展，PDEF mRNA的表达强度也不断增强，提示PDEF基因的表达存在明显的临床分期的表达差异，说明PDEF与前列腺癌的转移浸润有关。

雄激素对大鼠腹叶前列腺GDNF mRNA表达的影响

目的 :探讨雄激素对大鼠腹叶前列腺中胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)mRNA表达的影响。 方法 :2 4只SD大鼠分为 3组 ,其中A组 (n =8)为假手术对照组 ,B组 (n =8)为去势组 ,C组 (n =8)为雄激素替代组 (去势后肌注十一酸睾酮 5 0mg/kg) ;术后 3d处死 ,通过半定量RT PCR检测GDNFmRNA在去势前后和雄激素替代组大鼠腹叶前列腺中的表达变化。 结果 :去势后大鼠前列腺的体积萎缩变小 ;雄激素替代组出现前列腺增生变大 ;对照组正常的大鼠前列腺有GDNFmRNA表达 ,去势组GDNFmRNA表达量减少 ,雄激素替代组GDNFmRNA表达量增加。与正常对照组比较 ,去势组的GDNFmRNA表达量显著减少 (P <0 .0 5 ) ,雄激素替代组的GDNFmRNA表达量显著增加(P <0 .0 5 )。 结论 :雄激素可增加GDNFmRNA表达 ,促进前列腺细胞生长。

血小板源性生长因子-D影响前列腺癌细胞迁移及相关机制的研究

目的研究血小板源性生长因子-D（platelet-derivedgrowthfactor—D，PDGF-D）对前列腺癌细胞迁移的影响及其作用机制。方法蛋白质印迹法检测前列腺癌LNCaP、PC-3细胞中PDGF—D的表达。针对PDGF．D基因的mRNA序列合成siRNA，脂质体转染法转染PC-3细胞；外源性PDGF—D作用LNCaP、PC-3细胞。Boyden槽迁移法分析外源性PDGF．D及siRNA转染对前列腺癌LNCaP、Pc．3细胞迁移的影响，RT-PCR法检测血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）及基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase-9，MMP-9）mRNA表达水平的变化。结果LNCaP和PC-3细胞中PDGF．D蛋白的表达分别为29．474-1．68和63．43±2．10，两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）；PC-3细胞转染PDGF—DsiRNA后，siRNA阴性组蛋白表达水平为65．03±2．31，siRNA阳性绀为35．194-1．51，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。外源性PDGF—D可以促进LNCaP和PC-3细胞的迁移，并刺激PC．3细胞VEGF、MMP-9mRNA表达水平升高，与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；PDGF—DsiRNA转染PC-3细胞后，细胞迁移率下降，VEGF、MMP-9mRNA的表达水平由转染前的0．72±0．09、0．654-0．07下降为0．43±0．18、0．22±0．08，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PDGF—D能促进前列腺癌的转移和血管的形成。

组织源性炎症介质包括哪些？它们各自的来源是什么？

答：组织源性炎症介质包括组胺、5-羟色胺、前列腺素、溶酶体成分、淋巴因子。1，组胺：来源于肥大细胞。2．5-羟色胺：来源于嗜碱性粒细胞和血小板。3．前列腺素：来源于体内大多数细胞。4．溶酶体成分：来源于吞噬细胞。5．淋巴因子：来源于淋巴细胞。

0期诊断技术对军事训练所致椎间盘源性下腰痛患者血清IL-1β,6-keto-PGF1α及TNF-α水平的影响及其意义

目的:探讨0期诊断技术对军事训练所致椎间盘源性下腰痛患者血清白介素1β(IL-1β)、6酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响及其意义。方法:随机抽取某部2014年度新兵一营306名新兵为实验组,新兵二营290名新兵为对照组,在入伍复检时为每名士兵抽血检测相关血清学指标,并建立健康档案。由经过技术培训的医师对实验组采用0期诊断技术,分别在新兵训练开始后的第2、4、6、8、10、12周进行0期椎间盘源性下腰痛的筛查,并实施相应的防治措施,同时,按照"军标"对所有实验对象进行下腰痛的常规诊治及登统计,对于诊断为0期椎间盘源性下腰痛阳性和椎间盘源性下腰痛阳性的士兵及时抽血检测IL-1β、6-keto-PGF1α、TNF-α血清值。结果:实验组椎间盘源性下腰痛总发生率(2.94%)明显低于对照组(9.66%)(x^2=11.527,P<0.001)。在新训开始后的第8、10、12周,实验组椎间盘源性下腰痛的发生率均明显低于对照组(P<0.05);实验组和对照组阳性士兵血清IL-1β、6-keto-PGF1α、TNF-α水平比较无差异,0期阳性和阳性士兵血清IL-1β、6-keto-PGF1α、TNF-α水平与训练前相比均明显升高(P<0.05),0期阳性士兵血清IL-1β、6-keto-PGF1α、TNF-α值均明显低于本组和对照组阳性士兵(P<0.05)。结论:0期诊断技术预防军事训练所致新兵椎间盘源性下腰痛的效果明显,通过监测IL-1β、6-keto-PGF1α、TNF-α血清的水平变化也进一步证实0期诊断技术用于预防军事训练所致椎间盘源性下腰痛的可行性。

人精液源性病毒感染增强因子研究进展

人精液前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phosphatase, PAP）多肽片段形成的淀粉样原纤维具有促进人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）感染的作用，这些原纤维被称为精液源性病毒感染增强因子（semen-derived enhancer of viral infection, SEVI），其中PAP第248—286位多肽片段（PAP248-286）促进HIV感染的作用最强。具有阳离子特性的SEVI可通过静电作用捕获HIV颗粒而促进HIV感染。近期研究报道，SEVI对异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒感染也有增强作用，可能与前列腺癌发生有关。某些多聚阴离子化合物和绿茶多酚成分能明显抑制SEVI活性。研究SEVI生物学特性及其功能对于HIV等病毒感染的防治具有重要意义。

针药结合从虚瘀论治老年带状疱疹后遗神经痛疗效观察

目的探讨针药结合从虚瘀论治老年带状疱疹后遗神经痛的临床疗效及可能机制。方法将山东中医药大学第二附属医院2018年1月—2021年1月诊治的80例老年带状疱疹后遗神经痛患者随机分为2组,对照组给予维生素B1片和甲钴胺口服治疗,研究组在对照组治疗基础上给予针药结合治疗,2组均治疗4周。比较2组患者治疗前后疼痛程度VAS评分及血清脑源性神经营养因子(BDNF)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))、β-内啡肽(β-EP)水平和生活质量DLQI评分,统计2组治疗4周后的治疗效果。结果2组治疗后VAS评分、血清PGE_(2)水平及DLQI评分均明显降低(P均<0.05),且研究组均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后血清BDNF、β-EP水平明显升高(P均<0.05),且研究组均明显高于对照组(P均<0.05)。治疗4周后,研究组和对照组总有效率分别为90.0%(36/40)和72.5%(29/40),研究组明显高于对照组(P<0.05)。结论针药结合从虚瘀论治老年带状疱疹后遗神经痛疗效确切,能减轻疼痛程度和改善生活质量,可能与调节BDNF、PGE_(2)、β-EP水平有关。

牙源性囊肿和成釉细胞瘤体外骨吸收的实验研究

目的定量分析牙源性角化囊肿和成釉细胞瘤的体外骨吸收效应,探讨其颌骨吸收机制。方法收集25例牙源性囊肿[牙源性角化囊肿(OKC)14例、牙源性角化囊肿伴感染6例、含牙囊肿(DC)5例]和7例成釉细胞瘤的新鲜组织块行体外培养(24h),取其上清液与SD大鼠(新生5天)颅盖骨培养体系继续培养48h,以原子分光光度计法检测培养体系上清液中的Ca2+含量,从而判断不同牙源性病损在体外导致骨吸收作用的差异。同时采用放射免疫技术检测牙源性病损体外培养上清液中的骨吸收相关因子:白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、前列腺素E2(PGE2)、骨钙素(BGP)和降钙素(CT)等的含量。结果各组牙源性囊肿和肿瘤引起大鼠颅盖骨培养Ca2+析出的浓度显著高于空白组(P<0.01);OKC伴感染组Ca2+浓度显著高于OKC组和成釉细胞瘤组(P<0.05)。各组牙源性囊肿和成釉细胞瘤培养上清液中IL6、TNFα、PGE2和CT含量显著高于空白对照组(P<0.05);OKC组和OKC伴感染组IL6含量显著高于成釉细胞瘤组(P<0.05);OKC伴感染组CT含量显著高于OKC组和含牙囊肿组(P<0.05)。这些因子和Ca2+含量的相关性分析结果显示,IL6与钙值之间呈显著性正相关(P<0.01)。结论颌骨牙源性病损在体外可促进骨吸收,此作用可能与其产生的某些细胞因子有关。

COX-1与血管疾病的发生

花生四烯酸的代谢中存在一种起关键作用的酶-环氧化酶,它存在两种亚型:COX-1和COX-2,这两种亚型的生物学作用存在差异。研究发现血管内皮细胞通过产生内皮源性收缩因子(ED-CFs)引起内皮依赖性收缩,引起内皮依赖性收缩的主要物质是COX-1催化生成的前列腺素类物质,它们通过激活血管平滑肌细胞上的血栓素-前列腺素(TP)受体来启动血管收缩过程,所以COX-1在此过程中起着主导作用。衰老、高血压、糖尿病都可以促进内皮依赖性收缩,这一促进作用可以引起血管内皮功能障碍,造成血管疾病。