肿瘤中前列腺癌基因表达标记物1的调控作用研究

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200 nt的非编码RNA,不具备编码蛋白质能力,曾被认为是基因组中的暗物质。大量研究表明lncRNA能够抑制肿瘤细胞凋亡并具有调控表观遗传学、调节转录及翻译等重要分子生物学功能,在肿瘤中起原癌基因或抑癌基因的作用。前列腺癌基因表达标记物1(PCGEM1)作为一种lncRNA,在诸多人类肿瘤中呈现异常表达并能够调控肿瘤增殖和侵袭迁移等恶性生物学行为。本文就肿瘤中PCGEM1的调控作用进行综述。

ODC1基因对前列腺癌细胞PC-3 LncRNA表达影响的初步观察与分析

目的探讨鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)基因对前列腺癌细胞PC-3 LncRNA表达的影响,为进一步研究其作用及调控机制提供一些实验基础和线索。方法以前列腺癌细胞PC-3作为研究对象,敲低ODC1基因,经q-PCR检测及WB检测验证后采用Illumina Novaseq 6000,PE150模式进行高通量测序,测序结果应用编码潜能分析方法(CPC分析、CNCI分析、CPAT分析、LGC分析)进行预测筛选,对筛选出的lncRNAs行差异分析、顺式作用元件分析以及GO和KEGG富集分析。再选择文献报道中与前列腺癌关系密切的几个功能lncRNAs,采用q-PCR进行验证。结果(1)在ODC1敲低PC-3细胞中筛选到341个lncRNA,差异表达的lncRNA中上调154个,下调128个。符合条件的差异lncRNA与差异表达基因共表达的顺式调控靶标有38个。(2)差异表达lncRNAs行GO和KEGG富集分析显示,lncRNA靶标基因参与体内多种生物学通路,如磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路(PI3K-Akt信号通路)、Ras信号通路等,还与肿瘤血管生成、细胞群增殖、正调控细胞分裂等密切相关。(3)q-PCR法验证结果:LINC00973、TERC表达显著下调、LINC00638表达显著上调,与GO和KEGG富集分析得到的lncRNA差异表达情况一致。结论敲低ODC1基因可导致PC-3细胞lncRNAs差异表达,ODC1基因有可能通过lncRNAs影响细胞信号通路,促进肿瘤的发生发展。本实验为进一步研究ODC1基因在前列腺癌中的作用提供了一些新的实验基础。

基于生物信息学分析LIX1基因在前列腺癌中的表达与免疫浸润的关系

目的:探讨肢体和中枢神经系统表达因子1 (Limb and CNS expressed 1, LIX1)在前列腺癌(prostate cancer, PCa)中的表达及临床意义。方法:利用Oncomine和UALCAN数据库分析LIX1在PCa组织中的表达;利用R3.6.3软件绘制受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic curve,ROC曲线)和临床基线表,分析LIX1表达与PCa患者临床特征参数的关系;应用CANCERTOOL、GEPIA和TIMEER数据库分析LIX1表达水平与PCa患者预后及其与免疫细胞浸润的关系。利用LinkedOmics数据库筛选LIX1共表达基因及进行GSEA分析,探讨LIX1在PCa中潜在作用的信号通路。结果:LIX1 mRNA在PCa组织中表达水平显著降低且对PCa的诊断具有一定准确性。LIX1表达水平与PCa患者的TNM分期、Gleason分期、年龄和PSA水平显著负相关。LIX1低表达患者预后不佳,具有更高的复发风险。LIX1表达水平与PCa巨噬细胞的浸润水平呈正相关。LIX1及其共表达的基因主要富集在线粒体呼吸链复合物的组装,胞质分裂,核糖体和细胞周期途径等信号通路。结论:LIX1在PCa中表达降低,且与免疫浸润有关,可作为PCa诊断和不良预后的新型标志物。

RASSF1A基因在前列腺癌中甲基化检测及其表达

目的探讨RASSF1A基因在中国人前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及其甲基化检测。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测33例前列腺癌、28例前列腺增生和5例癌旁组织中的RASSF1AmRNA表达,并采用甲基化特异性PCR法分析其甲基化状态。结果48.5%的前列腺癌组织和17.9%的前列腺增生组织中RASSF1A表达缺失,66.7%的肿瘤组织中发现甲基化,高前列腺特异性抗原(PSA)和高TNM者启动子区甲基化的频率明显高于低PSA和低TNM者(P=0.01和0.049)。启动子区甲基化与发病年龄、细胞分化不相关,仅在2例前列腺增生组织中发现甲基化。结论RASSF1A甲基化可作为一个分子标志物,成为诊断肿瘤和预后的新方法。

RNA干涉技术稳定抑制PC-1基因表达对前列腺癌细胞C4-2的影响

目的:研究用RNA干涉技术(RNAi)稳定抑制PC-1基因表达对前列腺癌细胞C4-2生物学行为的影响。方法:用DNA重组技术构建携带与短的发夹结构的干涉RNA相对应DNA序列的重组质粒pSC394-414,采用脂质体将pSC394-414重组质粒稳定转染C4-2细胞,PCR分析外源DNA序列的整合情况,RTPCR及Western印迹鉴定RNAi抑制PC1基因表达的细胞株,MTT试验分析该细胞的生长速度,软琼脂克隆形成实验检测其非锚着依赖性生长能力。结果:获得了用RNAi稳定抑制PC-1基因表达的细胞株C4-2-pSC394-414,该细胞株中的PC-1mRNA及PC1蛋白的表达均显著降低,细胞生长速度显著减慢,软琼脂克隆形成能力显著下降。结论:抑制PC-1基因表达,可降低C4-2细胞生长速度及非锚着依赖性生长能力。

乳腺癌高表达基因1对前列腺癌细胞神经内分泌转化的影响

目的观察乳腺癌高表达基因1(BCOX1)在前列腺癌细胞神经内分泌转化中的表达水平和生物功能。方法构建去雄激素诱导的神经内分泌样前列腺癌细胞模型。并检测BCOX1在LNCaP和AI-NEPC细胞中的表达差异。RNA干扰技术下调BCOX1在AI-NEPC细胞中表达后,检测神经内分泌细胞标记物NSE和CHGA的表达,并检测STAT3的表达和磷酸化水平。结果在AI-NEPC中BCOX1蛋白表达水平与LNCaP细胞相比明显增加。BCOX1mRNA水平在AI-NEPC中与LNCaP细胞相比显著增高(P<0.05)。shRNA转染组中NSE和CHGA表达水平与未转染组和空载体转染组比较均明显下降(P<0.05)。shRNA转染组中STAT3和磷酸化STAT3的表达水平较空载体转染组明显下调(P<0.05)。结论 BCOX1在神经内分泌分化的前列腺癌细胞中高表达,下调BCOX1的表达可以影响前列腺癌细胞的神经内分泌样表型,并抑制STAT3的表达和磷酸化。

PC-1基因表达增强C4-2B前列腺癌细胞生存

建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3·1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT-PCR技术,分别从蛋白水平和RNA水平确定外源PC-1基因表达.MTT和软琼脂集落形成能力等一系列方法,研究PC-1基因的功能,RT-PCR和实时定量PCR检测前列腺癌发生发展相关基因表达的变化.结果表明,PC-1基因的高表达能够诱导雄激素受体(AR)调控基因和一系列重要的信号通路成员基因PSA、PSMA、NKX3·1、Jagged1、EphA3、SGEF和NOTCH3等表达发生变化.实验结果初步证明,PC-1基因表达在晚期前列腺癌中,以及在雄激素非依赖的转变中可以发挥作用,PC-1基因表达可调控一些重要信号通路.对PC-1基因功能深入研究将有可能为发现新的前列腺癌的诊断治疗分子靶标提供线索.

乳腺癌高表达基因1在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌高表达基因1(BCOX1)在良恶性前列腺组织中的表达及其与前列腺癌患者病理特征和预后的相关性。方法通过免疫组化观察100例前列腺癌和80例良性前列腺增生组织标本中的BCOX1蛋白表达,分析其表达水平与患者年龄、Gleason评分、临床分期、血清前列腺特异抗原(PSA)、精囊侵犯、血管侵犯和切缘状态等临床病理参数之间的关系,探讨BCOX1对患者预后的影响。结果BCOX1蛋白表达水平在前列腺癌组织中的表达水平显著高于良性前列腺增生组织(P<0.05)。在前列腺癌组织中,BCOX1蛋白表达水平在不同Gleason评分和PSA水平之间差异具有统计学意义(P<0.05),而在不同年龄、TNM临床分期、周围血管侵犯、术后切缘状态和精囊侵犯之间差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示BCOX1高表达在前列腺癌患者的无生化复发生存期(BCRFS)及总生存期(OS)中显著低于低表达患者(P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析结果显示BCOX1是前列腺癌患者BCRFS和OS的独立危险因素(P<0.05)。结论BCOX1在前列腺癌组织中高表达,异常表达的BCOX1与前列腺癌患者的病理特征及预后关系密切,可能作为前列腺癌不良预后的监测指标。

前列腺癌过表达蛋白1作为鼻咽癌患者疾病预后不良生物标志物的可行性研究

目的前列腺癌过表达蛋白1（prostate tumor overexpressed 1,PTOV1）对多种肿瘤的增生具有促进作用,然而其在鼻咽癌（NPC）患者临床疾病的发生和发展中的作用尚未见报道,本研究旨在探讨PTOV1在NPC中表达情况及其与患者临床病理学特征相关性。方法以NPC细胞系为对照,采用Western blotting和real-time PCR对NPC患者和健康人群进行PTOV1蛋白和基因检测。采用免疫组织化学方法对123例患者的肿瘤病灶进行检测,对PTOV1的表达结果进行显著性统计检验。结果 NPC细胞系和NPC患者临床样本中PTOV1 mRNA和蛋白表达水平明显升高。免疫组织化学结果表明,NPC患者中PTOV1高表达患者68例（55.3%）,统计结果表明,PTOV1的表达与患者疾病临床分期（P〈0.001）、T分期（P=0.042）和N分期（P=0.001）密切相关。PTOV1高表达患者的总生存期显著短于低表达患者。多变量分析表明PTOV1表达是NPC患者生存的独立诊断标志物。结论 PTOV1过表达与患者预后不良密切相关,特别是对于N0-1患者。因此,PTOV1可以帮助检测鼻咽癌患者早期淋巴结转移,作为鼻咽癌的独立的预后标志物。

缺氧诱导因子-1α与前列腺癌生物学行为的关系

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF1α)与前列腺癌侵袭转移、分化增殖及凋亡的关系。方法采用免疫组化方法检测40例前列腺癌和10例前列腺增生(BPH)中HIF1α与增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤基因2(Bcl2)、CD34的表达及计算微血管密度(MVD)。结果前列腺癌中HIF1α的表达明显高于BPH;HIF1α在前列腺癌中的表达水平与前列腺癌的病理分级和临床分期均呈正相关;前列腺癌中HIF1α的表达与PCNA及MVD呈正相关,与Bcl2呈负相关。结论HIF1α水平升高在前列腺癌的发生、发展过程中可能起重要作用;HIF1α的表达水平可用于预测前列腺癌的生物学行为,可作为前列腺癌治疗的新靶点。

前列腺癌组织中Twist和缺氧诱导因子-1α的表达及意义

目的探讨Twist和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在前列腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化(EnVision)法分别检测30例前列腺增生组织、30例前列腺上皮内瘤变组织及70例前列腺癌组织Twist、HIF-1α蛋白表达情况。结果①Twist、HIF-1α在前列腺增生组织、前列腺上皮内瘤变组织及前列腺癌组织中的阳性表达率分别为13.3%、43.3%、61.4%和16.7%、40.0%、64.3%,Twist、HIF-1α在前列腺癌组织中的阳性表达率均高于前列腺增生组织和前列腺上皮内瘤变组织,差异有统计学意义(P<0.01);Twist、HIF-1α在相同前列腺病变组织间表达差异无统计学意义(P>0.05)。②Twist及HIF-1α的表达均与前列腺癌的Gleason分级、临床分期及骨转移相关(P<0.01,P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。③Twist、HIF-1α在前列腺癌组织中过度表达,且两者之间呈显著正相关(r=0.63,P<0.01)。结论 Twist、HIF-1α在前列腺癌发生演变过程中起着重要作用,同时检测两者的表达将有助于判断前列腺癌的预后。

内皮素-1对前列腺癌PC3细胞环氧化酶-2表达的影响

目的:探讨在激素非依赖性前列腺癌(HRPC)PC3细胞中,内皮素-1(ET-1)刺激对环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,以及内皮素受体A(ETAR)与内皮素受体B(ETBR)在此调控通路中的作用。方法:用不同浓度(0.1、1.0、10.0、100.0nmol/L)ET-1刺激前列腺癌PC3细胞相同时间(24h);另外用BQ123(ETAR拮抗剂)、BQ788(ETBR拮抗剂)单独作用于PC3细胞或与100nmol/LET-1联合作用于细胞24h。均采用Western blot技术检测细胞中COX-2蛋白含量的变化;采用RT-PCR技术检测细胞中COX-2mRNA的变化情况。结果:PC3细胞在0.1～100.0nmol/L浓度的ET-1刺激后COX-2的蛋白及mRNA表达水平均显著上调,并显示有明显的浓度依赖性。BQ123在蛋白质和mRNA水平均显著抑制ET-1介导的COX-2的上调,与单纯应用ET-1组有显著差别(P<0.05),BQ788则对ET-1介导的COX-2的表达没有抑制作用(P>0.05)。结论:在前列腺癌PC3细胞中,ET-1对COX-2的表达有上调作用;ETAR参与了这一调控过程,ETBR可能未参与此过程。这为ETAR拮抗剂和选择性COX-2抑制剂联合应用于HRPC的治疗提供了分子生物学基础。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1在肿瘤进展中的作用

癌症是一种与多种基因突变、表观遗传变异、染色体易位、缺失和扩增相关的复杂疾病。非编码RNA(ncRNA)是一类新兴的转录本,由基因组编码,但大多数不会翻译成蛋白质。虽然没有翻译,但ncRNAs是各种细胞和生理功能的重要参与者。特别是长链非编码RNA(长度>200 nt的ncRNA)在调节染色质动力学、基因表达、生长、分化和发育中起着关键作用。现有的研究发现人类基因组编码超过28 000种不同的长链非编码RNA(lncRNA),然而其中有许多仍然尚未被发现及研究。现被发现的一些特定lncRNA表现出发育和组织特异性表达模式。

基因芯片技术和前列腺癌分子标志物的新发现(文献综述)

前列腺癌的高发生率要求发展新的诊断和治疗策略。近年来 ,DNA微阵列技术的开发和应用标志着生命科学研究领域的一次变革 ,它有望彻底揭示肿瘤进展过程中的基因调节机制。这对于肿瘤诊断准确性的提高、开发作用于致病基因的分子药物从而对肿瘤进行精确治疗 ,具有极其重大的意义。本文对 DNA微阵列技术的原理、在肿瘤研究特别是在前列腺癌研究领域中的应用做一简要介绍 。

Id-1基因与前列腺癌之关系

Id蛋白是碱性螺旋 -环 -螺旋 (bHLH)转录因子之抑制因子。Id - 1蛋白是细胞分化的负性调节因子所以有促进肿瘤发生之功能。本文概述近几年我们研究室在探索Id - 1基因及其功能方面的工作。从动物前列腺癌模型中首次发现Id - 1蛋白之过度表达到人前列腺癌标本中得到验证 ,以及最后在体外培养的前列腺癌细胞株对Id - 1基因之功能研究。实验表明Id - 1是通过抑制P16 RB抑癌基因以及激活有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的途径而引起前列腺癌细胞增殖。结果并提示Id -

前列腺癌差异基因标志物筛选有助于预后评价

目的通过生物信息学分析筛选前列腺癌预后相关的潜在预测基因。方法对前列腺癌基因组图谱中的基因表达数据进行生物信息学分析,确定肿瘤与正常样本之间的差异表达基因,并进行了功能和通路的富集分析。使用KM生存分析确定与前列腺癌的预后有关的基因。最后结合患者的临床病理资料对各差异基因的临床意义进行深度挖掘。结果共确定了334个上调的差异基因和26个下调的差异基因。肌肉和神经相关通路是其主要的生物学过程。通过KM生存分析得出由12个基因(PATE1、TGM4、TPSB2、PRLR、UGT2B17、BCAN、KLHL40、MEI4、CACNG7、CRYGD、OR52E8、OLIG2)组成的在预测总体生存率方面表现良好的预后标志物。同时,构建了其对于TNM分期、高低风险的相关预测分析。并进行了肿瘤和正常样本之间(全部/配对)boxplot图验证。结论本研究发现了一组基于基因的标志物,可用于预测前列腺癌患者的预后,这可能有助于临床医生的决策,并可作为前列腺癌药物合成的潜在新靶点。

结直肠癌组织和血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p的表达及其临床意义

目的:研究结直肠癌组织和血清外泌体长链非编码核糖核酸前列腺癌基因表达标记物1(lncRNA PCGEM1)、微小RNA-152-3p(miR-152-3p)的表达及其临床意义。方法:选取2020年1月至2021年10月南京医科大学附属无锡人民医院收治的138例结直肠癌患者作为结直肠癌组,另选取同期体检健康的90例健康人群作为健康组。检测血清外泌体、结直肠癌组织与癌旁组织中lncRNA PCGEM1、miR-152-3p相对表达量。分析结直肠癌组织、血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。Cox模型分析结直肠癌患者预后的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA PCGEM1、miR-152-3p对结直肠癌的诊断价值。结果:结直肠癌组织、血清外泌体lncRNA PCGEM1相对表达量分别高于癌旁组织和健康组,miR-152-3p相对表达量均低于癌旁组织和健康组(P<0.05)。血清外泌体与癌组织中lncRNA PCGEM1、miR-152-3p表达与TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。LncRNA PCGEM1高表达组的生存率低于lncRNA PCGEM1低表达组,miR-152-3p低表达组生存率低于miR-152-3p高表达组(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p及分化程度、淋巴结转移、浸润深度是影响患者预后的因素(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p联合应用的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度均较各指标单独应用明显提升(P<0.05)。结论:结直肠癌患者癌组织和血清外泌体中lncRNA PCGEM1表达上调、miR-152-3p表达下调,血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p联合诊断结直肠癌的效能更高。

前列腺癌生物标志物的研究进展

前列腺癌（PCa）是一种发生于前列腺组织中的恶性肿瘤,是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果.PCa发病率具有明显的地理和种族差异,在欧美等发达国家和地区,是男性最常见的恶性肿瘤,病死率居各种癌症第2位[1];在亚洲,其发病率低于西方国家,但近年来随着人口老龄化及生活条件的改善,发病率呈迅速上升趋势[2];在我国,PCa在男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率已跃居第3位,患者主要是老年人,严重影响着我国老年男性的晚年生活质量[3,4].PCa的生存率有赖于早期的诊断和治疗,生物标志物往往能先于其他手段如直肠指检（DRE）、超声等检出癌症,故寻找有效的生物标志物一直是研究的热点.现就PCa生物标志物研究进展作一综述.