前列腺癌相关转录物6在肝癌患者血清中的表达及干扰其表达对肝癌细胞生物学功能的影响

目的观察前列腺癌相关转录物6(PCAT6)在肝癌患者血清中的表达及其表达对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法定量聚合酶链反应(qPCR)法检测2017年6月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的64例肝癌患者血清和正常肝细胞THLE-3、肝癌Hep3B、HepG2细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)PCAT6水平;将肝癌Hep3B细胞随机分为空白对照组(NC组)、阴性空载体转染组照(si-con组)和lncRNA PCAT6沉默组(si-PCAT6组),通过蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达;通过噻唑蓝(MTT)检测NC组、si-con组和si-PCAT6组细胞增殖;流式细胞术检测3组细胞凋亡率;Transwell小室法检测3组细胞迁移和侵袭。应用SPSS 22.0统计软件分析。结果中或高分化患者血清lncRNA PCAT6高表达(60.94%)多于低分化程度患者(6.25%,χ^2=22.968,P<0.01),差异有统计学意义,T分期Ⅱ~Ⅳ患者血清lncRNA PCAT6高表达占比(57.81)多于Ⅰ期患者(9.38%,χ^2=8.529,P<0.01),差异有统计学意义;Hep3B细胞(3.72±0.67)和HepG2细胞(3.38±0.53)中lncRNA PCAT6表达高于THLE-3(1.03±0.14,t=9.322、8.144,P<0.05),差异有统计学意义。si-PCAT6组lncRNA PCAT6表达(0.21±0.11)显著低于si-con组(0.96±0.15,t=9.915,P<0.05),24、48、72 h细胞活力显著降低(t=3.280、6.144、6.373,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot检测si-PCAT6组cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白、p-PI3K和p-Akt表达表达显著增加(t=11.408、14.628、8.683、9.585,P<0.01),差异有统计学意义,MMP-2和MMP-9蛋白表达减少(t=10.568、10.814,P<0.01),差异有统计学意义;流式细胞术检测Hep3B细胞凋亡率显著增高(t=21.075,P<0.01),差异有统计学意义;Transwell细胞迁移和侵袭显著降低(t=12.816、12.707,P<0.01),差异有统计学意义。结论HCC患者血清中lncRNA PCAT6处于高表达状态,与HCC分化程度、T分期有关,沉默lncRNA PCAT6可抑制其生物学行为,抑制Akt信号通路活化是其作用机制。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1在肿瘤进展中的作用

癌症是一种与多种基因突变、表观遗传变异、染色体易位、缺失和扩增相关的复杂疾病。非编码RNA(ncRNA)是一类新兴的转录本,由基因组编码,但大多数不会翻译成蛋白质。虽然没有翻译,但ncRNAs是各种细胞和生理功能的重要参与者。特别是长链非编码RNA(长度>200 nt的ncRNA)在调节染色质动力学、基因表达、生长、分化和发育中起着关键作用。现有的研究发现人类基因组编码超过28 000种不同的长链非编码RNA(lncRNA),然而其中有许多仍然尚未被发现及研究。现被发现的一些特定lncRNA表现出发育和组织特异性表达模式。

miR-135a与前列腺癌细胞增殖相关因子信号转导及转录激活因子6的相关性研究

目的探讨miR-135a与前列腺癌细胞增殖相关因子信号转导及转录激活因子(STAT6)的相关性。方法选取前列腺癌DU145细胞,随机分为miR-135a转染组和空白转染组,miR-135a转染组细胞转染miR-135a序列,空白转染组转染空白序列,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,采用Transwell细胞迁移侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p-STAT6和STAT6蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miR-135a表达。结果转染后48h,miR-135a转染组miR-135a相对表达量为(0.932±0.061),明显高于空白转染组(P<0.05);miR-135a转染组培养24、48h的OD值分别为(0.210±0.045)和(0.281±0.052),明显低于空白转染组(P<0.05);miR-135a转染组G0/G1期细胞比例为(60.02±6.39)%,明显高于空白转染组(P<0.05);miR-135a转染组迁移细胞数和侵袭细胞数分别为(116.93±30.02)个和(133.02±28.51)个,明显低于空白转染组(P<0.05);miR-135a转染组p-STAT6和STAT6蛋白相对表达量分别为(0.947±0.114)和(0.437±0.077),明显低于空白转染组(P<0.05)。结论miR-135a可抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,可能与其抑制前列腺癌细胞STAT6表达有关。

免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的分析免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(HHLA2)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法选取2017年9月至2019年10月唐山市妇幼保健院收治的120例的EC患者作为研究对象,收集其的EC组织和癌旁正常组织。检测EC组织和癌旁正常组织VISTA、HHLA2的表达;采用Spearman分析免疫检查点VISTA、HHLA2的相关性;Kaplan-Meier分析VISTA、HHLA2与预后的关系;Cox回归分析影响EC患者预后的危险因素。结果EC组织中VISTA、HHLA2阳性表达率显著高于正常癌旁组织(P<0.05)。Spearman相关性结果显示EC组织中VISTA与HHLA2表达呈正相关性(r=0.587,P<0.05)。EC组织中VISTA、HHLA2表达与临床病理特征有关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示VISTA阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=11.864,P<0.05),HHLA2阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=4.975,P<0.05)。Cox回归分析结果显示VISTA和HHLA2是影响EC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论免疫检查点VISTA、HHLA2在EC中高表达,其是影响EC预后的危险因素,二者可能是有价值的预后标志物。

长链非编码前列腺癌相关转录因子6靶向微小RNA-139-3p对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)前列腺癌相关转录因子6(PCAT6)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和分子机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测20例骨肉瘤组织和与其对应的癌旁组织中PCAT6和微小RNA-139-3p(miR-139-3p)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证PCAT6对miR-139-3p的靶向调控关系。将PCAT6小干扰RNA(si-PCAT6)、miR-139-3p模拟物(miR-139-3p mimics)分别转染骨肉瘤细胞SAOS2,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测SAOS2细胞增殖活力,流式细胞术检测SAOS2细胞凋亡,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和P21、的表达水平。将si-PCAT6和miR-139-3p抑制物(anti-miR-139-3p)共转染至SAOS2细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移侵袭能力以及凋亡变化。结果与瘤旁组织相比,骨肉瘤组织中PCAT6的表达水平[(2.76±0.27)比(1.01±0.09)]显著升高,miR-139-3p的表达水平[(0.51±0.05)比(1.00±0.08)]显著降低(P<0.05)。miR-139-3p是PCAT6的靶基因,PCAT6靶向负性调控miR-139-3p表达。抑制PCAT6表达或过表达miR-139-3p均可下调SAOS2细胞CyclinD1和Bcl-2蛋白表达,上调p21和Bax蛋白表达,降低细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.05)。抑制miR-139-3p表达可逆转si-PCAT6对骨肉瘤SAOS2细胞增殖抑制和凋亡的影响(P<0.05)。结论lncRNA PCAT6在骨肉瘤组织中表达上调,抑制miR-139-3p通过靶向miR-139-3p抑制骨肉瘤细胞增殖,诱导骨肉瘤细胞凋亡。

E6相关蛋白对前列腺癌细胞增殖与侵袭的作用

目的建立稳定表达E6-AP的前列腺癌细胞系,通过对E6-AP表达调控的研究,探讨E6相关蛋白对前列腺癌细胞增殖与侵袭作用.方法以人前列腺癌细胞株(LNCa P)为基础,将调控质粒pRev Tet-offin和E6-AP表达质粒p GEM-E6-AP转染至LNCa P细胞,建立既能表达E6-AP蛋白又能受DOX调控的LNCa P/E6-AP细胞系.Western bloting检测LNCa P/E6-AP细胞E6-AP蛋白表达及其受DOX调控情况; MTT方法检测细胞增殖及受LY294002抑制情况;基质胶侵袭实验检测细胞浸润迁移能力.结果 LNCa P/E6-AP细胞E6-AP表达量明显高于LNCa P细胞,且可受DOX负向调控;实验组LNCa P/E6-AP细胞的增殖能力明显高于对照组LNCa P细胞,且两组细胞增殖能力均受PI3K抑制剂LY294002的抑制;实验组LNCa P/E6-AP细胞的侵袭能力明显高于对照组LNCa P细胞.结论 E6-AP可以促进前列腺癌细胞的增殖,并增加其侵袭能力; DOX可以调控E6-AP的表达;PI3K抑制剂LY294002可有效抑制前列腺癌细胞的增殖能力.

癌胚抗原相关细胞黏附分子6、血管内皮生长因子、血管生成素2在前列腺腺癌中的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测前列腺腺癌中癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素(ANG)2的表达,观察其临床价值。方法 83例经病理学确诊为前列腺腺癌患者作为研究组,留取术后蜡块组织,83例前列腺增生患者作为对照组,留取术后蜡块组织。CEACAM6、VEGF和ANG2蛋白表达的检测应用免疫组化二步法。结果研究组CEACAM6、VEGF和ANG2表达阳性率明显高于对照组。研究组CEACAM6、VEGF和ANG2阳性率与Gleason评分、TNM分期、脉管内瘤栓和Ki67增殖指数密切相关。相关性分析显示研究组中CEACAM6和VEGF、CEACAM6和ANG2具有正相关性。结论 CEACAM6、VEGF和ANG2在前列腺腺癌术后组织表达明显升高,三者参与肿瘤的进展及细胞增殖。CEACAM6可能与VEGF和ANG2蛋白的表达有协同作用。

人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达及意义

目的检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2(Nrf2)、人类线粒体转录因子A(TFAM)的表达,并分析其表达与Gleason评分的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman相关分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达与Gleason评分正相关(P值为0.0052,0.0003);Nrf2与TFAM的表达也有相关性(P=0.006)。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。

基于生物信息数据库分析前列腺癌组织特异性lncRNA表达及临床意义

目的研究前列腺癌组织特异性长链非编码RNA(lncRNA)表达及其临床意义。方法利用生物信息学方法深入分析TCGA及GEO基因组数据库,对数据库收录的492例前列腺癌组织和152例癌旁组织做基因差异分析,筛选出差异表达的lncRNA,并进一步分析上述lncRNA的前列腺组织特异性及对前列腺癌患者预后的影响。结果筛选出差异表达的5个lncRNA包括:前列腺相关转录因子14(PCAT14)、前列腺抗原3(PCA3)、C末端结合蛋白1-AS(CTBP1-AS)、DRAIC、GPC5-AS1。其中,PCAT14、PCA3在前列腺癌组织中特异性表达,二者升高提示与前列腺癌预后相关,且二者与激肽释放酶相关肽酶3(KLK3)、α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)、溶质转运蛋白家族45A3(SLC45A3)等前列腺癌特异抗原相关性好。针对PCAT14、PCA3进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析提示:PCA3差异表达与吞噬作用、细胞识别、对细菌的防御反应、免疫球蛋白复合物、高尔基体、抗原结合、趋化因子受体结合、蛋白质消化吸收、肾素-血管紧张素系统等信号通路等密切相关;PCAT14差异表达与高尔基体、离子通道的活动相关通路,同时与肾素分泌、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路、促性腺激素分泌相关信号通路等密切相关。结论PCA3、PCAT14在前列腺癌组织中特异性表达,在正常组织中基本不表达,可以作为前列腺癌诊断的潜在指标。

前列腺癌相关肿瘤标志物的研究进展

前列腺癌与其他恶性肿瘤一样,应争取早防、早诊、早治。寻求肿瘤标志物是目前肿瘤早期诊断常用的方法。本文就前列腺特异性抗原（prostatespecific antigen,PSA）和新发现的几种相关肿瘤标志物综述如下。1 PSAPSA是目前临床上广泛应用的检测指标,它是20世纪60年代末在研究免疫避孕过程中发现的。

STAT6、HMGA2在前列腺癌中的表达及与患者临床病理特征的相关性研究

目的分析转录激活因子6(STAT6)、高迁移率蛋白A2(HMGA2)在前列腺癌中的表达及与患者临床病理特征的相关性。方法选择2016年7月到2019年7月商丘市第一人民医院行手术切除的前列腺癌患者60例,留取前列腺癌组织和距离癌组织边缘2 cm以上癌旁组织。免疫组化法检测前列腺癌组织、癌旁组织标本STAT6、HMGA2表达。分析STAT6、HMGA2与前列腺癌患者临床病理特征的关系。结果前列腺癌组织中STAT6、HMGA2阳性率较高,STAT6、HMGA2阳性表达率与Gleason评分、临床分期、病理分级、组织分化程度、淋巴结转移、PSA水平呈正相关(P<0.05)。前列腺癌患者3年生存率为65.45%(36/55),STAT6、HMGA2阳性表达患者生存率低于STAT6、HMGA2阴性表达患者(χ^(2)=6.254、7.254,P=0.008、0.001)。结论前列腺癌中STAT6、HMGA2呈高表达,且STAT6、HMGA2与患者临床病理特征相关。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录本7对三阴性乳腺癌MDA-MB-436细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA前列腺癌相关转录本7(lncRNA PCAT7)对三阴性乳腺癌MDA-MB-436细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法设计合成lncRNA PCAT7-siRNA1、lncRNA PCAT7-siRNA2、lncRNA PCAT7-siRNA3及control siRNA。MDA-MB-436细胞培养至细胞融合度达80%时,将细胞分为lncRNA PCAT7-siRNA1组、lncRNA PCAT7-siRNA2组、lncRNA PCAT7-siRNA3组3个干扰组和1个空载组,分别转染lncRNA PCAT7-siRNA1、lncRNA PCAT7-siRNA2、lncRNA PCAT7-siRNA3和control siRNA,转染6 h后细胞用完全培养基继续培养48 h,收集各组细胞,采用实时聚合酶链反应法检测转染后各组细胞lncRNA PCAT7表达情况,选择lncRNA PCAT7表达水平最低的lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞用于后续实验。采用克隆形成实验检测lncRNA PCAT7-siRNA3组和空载组MDA-MB-436细胞的增殖能力,划痕实验检测lncRNA PCAT7-siRNA3组和空载组MDA-MB-436细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测lncRNA PCAT7-siRNA3组和空载组MDA-MB-436细胞的侵袭能力,流式细胞术检测lncRNA PCAT7-siRNA3组和空载组MDA-MB-436细胞周期分布情况,Western blot法检测lncRNA PCAT7-siRNA3组和空载组MDA-MB-436细胞p27蛋白表达情况。结果lncRNA PCATT-siRNA1干扰组MDA-MB-436细胞中lncRNA PCAT7 mRNA相对表达量与空载组比较差异无统计学意义(t=-4.286,P>0.05),lncRNA PCAT7-siRNA2组、lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞中lncRNA PCAT7 mRNA相对表达量显著低于空载组(t=-28.028、-47.748,P<0.05),lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞中lncRNA PCAT7 mRNA相对表达量显著低于lncRNA PCAT7-siRNA2组(t=12.705,P<0.01),选用转染lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞进行后续实验。培养14 d后,lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞克隆形成数显著少于空载组(t=-7.434,P<0.01)。细胞划痕培养48 h后,lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞划痕愈合率显著低于空载组(t=-11.340,P<0.01)。lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞侵袭数显著少于空载组(t=-7.120,P<0.01)。lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436组细胞G 0/G 1期细胞比例显著高于空载组,G 2/M期细胞比例显著低于空载组(t=4.920、-6.990,P<0.01),lncRNA PCAT7-siRNA3组与空载组MDA-MB-436细胞S期细胞比例比较差异无统计学意义(t=0.083,P>0.05)。lncRNA PCAT7-siRNA3组MDA-MB-436细胞中p27蛋白相对表达量显著高于空载组(t=3.200,P<0.05)。结论下调lncRNA PCAT7可抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-436细胞的增殖、迁移与侵袭能力,其调控机制可能与增加细胞周期抑制蛋白p27表达及阻滞细胞周期有关。

前列腺癌组织Nrf2 MSH6表达与肿瘤发生发展的相关性

目的 探讨前列腺癌组织核转录因子E2相关因子2、错配修复蛋白的表达与肿瘤发生发展的关系.方法 采用免疫组化染色技术检测80例前列腺癌组织标本(前列腺癌组)和80例前列腺良性增生组织标本(前列腺增生组)的核转录因子E2相关因子2、错配修复蛋白的表达,并对其阳性率进行组间比较,分析不同病理学特征前列腺癌的阳性表达率差异.结果 前列腺癌组核转录因子E2相关因子2阳性表达率为72.5%、错配修复蛋白阳性表达率为68.8%,前列腺增生组分别为21.2%、26.2%,前列腺癌组显著高于前列腺增生组(P<0.01).不同肿瘤分期系统分期、淋巴结转移状况前列腺癌组织核转录因子E2相关因子2蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05),不同淋巴结转移状况前列腺癌组织错配修复蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 前列腺癌组织核转录因子E2相关因子2、错配修复蛋白表达显著上调,与肿瘤的发生发展关系密切.

前列腺癌组织转移相关基因CD44v6的表达意义

目的 探讨转移相关基因 CD4 4 v6在前列腺癌中的表达及意义 .方法 以免疫组化 S- P法对 6 7例前列腺癌标本进行染色及分析 .结果 CD4 4 v6在前列腺癌中有较高的表达 ,阳性率为 4 1.8% (2 8/ 6 7) .其中无转移者阳性率为 16 .0 %(4/ 2 5 ) ,有淋巴结或远处转移者阳性率 5 7.1% (2 4 / 4 2 ) ,两者比较差异有显著性 (P<0 .0 1) CD4 4 v6阳性表达与前列腺癌分化程度 (r=0 .4 6 3,P<0 .0 5 )及临床分期 (r=0 .4 12 ,P<0 .0 5 )相关显著 .CD4 4 v6阳性的前列腺癌患者术后生存期显著低于阴性患者 (9.5 % vs 39.3% ,P <0 .0 5 ) .结论 CD4 4 v6阳性表达与前列腺癌的发生。

E6相关蛋白与前列腺癌细胞迁移浸润的实验研究

目的:研究E6相关蛋白与前列腺癌细胞迁移浸润的相关性,为探讨前列腺癌的浸润转移机制提供实验依据。方法:应用电穿孔方法将线性化的PrevTet-off-in调控质粒和PrevTRE2-flag-E6AP重组质粒导入前列腺癌细胞(Lncap),建立稳定表达E6-AP的前列腺癌细胞。应用MTT实验检测细胞的增殖;应用Matrigel Invasion Chamber检测肿瘤细胞迁移浸润特性。结果:MTT结果显示,稳定转染表达E6-AP的前列腺癌细胞比未转染的细胞具有较强的增殖活性;在细胞的迁移浸润试验中,表达E6-AP的稳定转染细胞具有较强的爬行与附着能力。结论:E6相关蛋白与前列腺癌细胞迁移浸润性密切相关。

去势抵抗性前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平与骨转移及预后的关系

目的:探讨TNF受体相关因子6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF6)、神经元降钙素基因相关肽(neuronal calcitonin gene-related peptide,CGRP)与老年去势抵抗性前列腺癌患者骨转移以及预后的关系分析。方法:选择2020年01月至2023年01月我院收治的157例老年去势抵抗性前列腺癌患者(前列腺癌组)和101例健康志愿者(对照组),根据是否发生骨转移分为骨转移(84例)和非骨转移组(73例)。检测血清TRAF6、CGRP水平,出院后随访去势抵抗性前列腺癌患者生存情况。结果:前列腺癌组血清TRAF6、CGRP水平高于对照组(P<0.01)。Gleason评分≥8分、TNM分期Ⅲc-Ⅳb期去势抵抗性前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平高于Gleason评分<8分、TNM分期Ⅲa-Ⅲb期期患者(P<0.05)。骨转移组血清TRAF6、CGRP水平高于非骨转移组(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析显示高TRAF6水平组、高CGRP水平组OS生存率低于低RAF6水平组、低CGRP水平组(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示TNM分期Ⅲc-Ⅳb期、骨转移、高水平TRAF6、高水平CGRP是去势抵抗性前列腺癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:老年前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平增高与前列腺癌恶性临床病理特征、骨转移和不良预后有关,可作为骨转移和预后评估的标志物。

前列腺癌“劫持”肿瘤相关成纤维细胞通过外泌体MALAT1调控糖代谢重编程的机制研究

目的:阐明外泌体转移性肺腺癌相关转录因子1(MALAT1)介导的前列腺癌(PCa)细胞与癌相关成纤维细胞(CAFs)间相互作用,探究CAFs来源的外泌体MALAT1在PCa糖代谢重编程中的作用及其机制。方法:分析肿瘤基因组图谱(TCGA)资料,探讨MALAT1在多种肿瘤中的表达模式,尤其是其与PCa的临床关联性。运用单细胞RNA测序(scRNA-seq)及相关技术,研究MALAT1在介导PCa细胞与CAFs之间相互作用的机制。过表达CAFs细胞中的MALAT1,提取上清外泌体,并与PCa细胞共培养,通过RNA纯化的染色质分离—质谱(ChIRP-MS)等方法,研究外泌体MALAT1在PCa进展中的功能及作用机制。结果:利用TCGA数据集进行分析,观察到MALAT1与前列腺腺癌、乳腺浸润癌、胆管癌等多种肿瘤恶性程度相关,且与PCa不良预后相关。scRNA-seq分析显示,PCa肿瘤微环境细胞中的CAFs不仅存在PCa分子标记物KLK3,而且MALAT1在CAFs中的表达显著高于PCa细胞,提示PCa细胞能够“驯化”CAFs,并通过CAFs中MALAT1促进PCa进展。进一步地,共培养和ChIRP-MS实验发现外泌体MALAT1通过与PCa糖代谢关键酶的直接结合调控PCa的能量代谢。ChIRP-MS和RNAseq联合分析发现外泌体MALAT1能够与4个糖酵解关键基因(GPI、ALDOC、PGK1、ALDOA)直接结合,从而调控PCa细胞的糖代谢重编程。结论:PCa细胞能够“驯化”CAFs,并通过CAFs释放外泌体MALAT1直接作用于PCa糖酵解关键分子,从而调控糖代谢重编程加速PCa发展。

微小染色体维持蛋白复合物6、细胞分裂周期相关蛋白6在肾透明细胞癌组织中的表达及其与恶性生物学行为的相关性研究

目的:探讨微小染色体维持蛋白复合物6(MCM6)、细胞分裂周期相关蛋白6(CDC6)在肾透明细胞癌组织中的表达及其与恶性生物学行为的相关性。方法:2021年1月-2023年12月就诊于天津市中西医结合医院泌尿外科的77例肾透明细胞癌患者,选取其癌组织作为研究组,同源远侧的正常肾组织为对照组;基于GEPIA数据库MCM6和CDC6相关信息,应用单克隆抗体免疫组化技术比较研究MCM6和CDC6在肾透明细胞癌组织和正常组织中的表达;采用qRT-PCR和Western Blotting检测shRNA对MCM6表达的影响:应用CCK-8和集落形成试验检测HTB-47和CRL-1932细胞系的体外增殖结果。结果:与正常肾组织相比,MCM6/CDC6在肾透明细胞癌组织中明显上调,且MCM6上调与患者无病生存率降低相关(P<0.05);敲低HTB-47和CRL-1932细胞系的MCM6基因可显著抑制肿瘤细胞的增殖,并显著阻滞了肿瘤细胞分裂周期停留在G2/M期;MCM6的表达与肾癌体积大小显著相关(P=0.010),根据GEPIA数据库显示,CDC6与MCM6有明显的相关性(P<0.01),所有表达结果均通过免疫组化染色检测进一步验证。结论:MCM6的表达上调与肾透明细胞癌的恶性生物学行为和临床进展有关,其可通过影响细胞周期来调控细胞增殖,在肾透明细胞癌组织中,MCM6和CDC6表达量均显著上调且关系密切,表明MCM6/CDC6可能成为预测肾透明细胞癌的潜在生物标记物,并可能成为该病靶向治疗一个新的治疗靶点。

前列腺癌相关转录因子1在恶性肿瘤中的研究进展

越来越多的长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)被发现在肿瘤中发挥极其重要的作用。前列腺癌相关转录因子1(prostate cancer associated transcript-1, PCAT-1)作为一种lncRNA,在许多人类肿瘤组织中过表达,并与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭转移及患者的预后密切相关,其机制却不十分清晰与完善。本文就PCAT-1作为新的分子标志物或潜在靶点,在肿瘤的诊断、治疗及患者预后评估等方面一一阐述。

miR-135a靶向调控STAT6对前列腺癌细胞生物学行为的影响

目的分析微小RNA-135a(miR-135a)靶向调控信号传导和转录激活因子6(STAT6)对前列腺癌细胞生物学行为的影响。方法选取DU145前列腺癌细胞株,细胞培养后分为空白组、miR-135a阴性对照组、miR-135a转染组,构建miR-135a慢病毒载体,空白组加入常规细胞培养液、生理盐水做空白处理,miR-135a阴性对照组加入miR-135aNC、Lipofectamine 2000试剂行无义序列转染,miR-135a转染组加Hsa-miR-135a、Lipofectamine 2000试剂行细胞转染。鉴定miR-135a转染效率及STAT6mRNA表达量,分析对细胞生物学行为、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax蛋白的影响。结果与空白组相比,miR-135a阴性对照组miR-135a表达量降低,miR-135a转染组miR-135a表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),说明miR-135a转染成功。空白组、miR-135a阴性对照组、miR-135a转染组STAT6mRNA表达量、增殖、凋亡率、侵袭、迁移个数、MMP-2、MMP-9、TIMP-2、Bcl-2、Bax蛋白表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与miR-135a阴性对照组相比,miR-135a转染组STAT6mRNA表达量、细胞增殖率、侵袭、迁移个数、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,细胞凋亡率、TIMP-2、Bax蛋白表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-135a对STAT6表达有一定的调控作用,通过调控MMP-2、MMP-9、TIMP-2表达抑制前列腺癌细胞迁移和侵袭,通过调控Bcl-2、Bax相关蛋白表达抑制前列腺癌细胞增殖,促进其凋亡,为临床前列腺癌靶向治疗提供理论依据。