淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤SCID小鼠脂肪酸合成酶和LNCaP细胞生物学行为的影响

目的观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对前列腺癌原位移植瘤SCID小鼠前列腺肿瘤组织中脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)mRNA和LNCa P细胞生物学行为的影响。方法 6周龄雄性SCID小鼠30只,从左、右前列腺背外侧叶包膜内注射复苏的人LNCa P前列腺癌细胞株(2×10~7个/mL)悬液各25μL,建立SCID小鼠前列腺癌原位移植瘤模型,2周后随机均分为前列腺癌组(CaP组)、淫羊藿苷高剂量组(80 mg/kg,高剂量组)和淫羊藿苷低剂量组(40 mg/kg,低剂量组),另取健康6周龄雄性SCID小鼠10只设为空白对照组(CON组)。于治疗结束后测量各组SCID小鼠前列腺原位移植瘤瘤体积、瘤重量,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测FAS在前列腺肿瘤组织中的阳性蛋白表达,RT-PCR检测FAS mRNA表达,流式细胞学(Flow cytometry,FCM)检测LNCaP细胞周期,以分析ICA对LNCa P细胞生物学行为的影响。结果 ICA可明显抑制前列腺癌原位移植瘤的生长,高剂量组和低剂量组瘤体积[(0.45±0.04)、(0.47±0.06)cm^3]和瘤重量[(0.69±0.07)、(0.71±0.09)g]明显低于CaP组,FCM检测显示,抑瘤率分别为39.47%和37.28%,且两组S期细胞比值升高(50.34%±1.53%、47.56%±2.67%)、G_0/G_1期细胞比例降低(25.40%±1.84%、26.51%±2.21%),与CaP组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两组组内比较差异无统计学意义(P>0.05);FAS蛋白(21.04%±2.73%、22.49%±1.94%)及FAS mRNA[(13.87±1.12)、(12.73±2.07)/GAPDH]在高剂量组和低剂量组前列腺肿瘤组织中均低表达,与Ca P组比较差异有统计学意义(P<0.05),但两组组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ICA可能通过抑制FAS活性、改变细胞周期分布(阻滞于S期)、诱导肿瘤细胞凋亡和生长抑制,有效抑制前列腺癌LNCa P细胞增殖,并降低细胞侵袭能力。

淫羊藿苷对SCID小鼠前列腺癌原位移植瘤雄激素受体信号通路的影响

目的观察淫羊藿苷对SCID小鼠前列腺癌原位移植瘤雄激素受体信号通路的影响。方法将64只雄性SCID小鼠,随机均分为模型组、实验A组、B组和C组,采用人LNCaP前列腺癌细胞株悬液前列腺内注射的方法建立前列腺癌原位移植瘤模型,实验A组、B组和C组于建模2周后分别用淫羊藿苷按10 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg剂量灌胃给药5周,模型组灌生理盐水做对照。采用RT-PCR检测雄激素受体(androgen receptor,AR)和张力蛋白同源第10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)表达,采用Western blotting检测前列腺癌特异性抗原(Prostate specific antigen, PSA)和磷酸化AR(p-AR),流式细胞学方法检测LNCaP前列腺癌细胞周期。结果模型组治疗前后AR、p-AR、AR mRNA均高表达,PTEN mRNA低表达,模型组抑瘤率较低,瘤质量和瘤体积组内治疗前后比较差异无显著性(P> 0.05)。而实验B组、C组治疗后抑瘤率达(42.53±5.72)%,(44.81±4.76)%,两组AR mRNA、p-AR和PSA低表达,PTEN mRNA高表达,且G_0/G_1期细胞比例降低、S期细胞比值升高,肿瘤细胞增殖被阻滞于S期,与治疗前和模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论淫羊藿苷可能通过抑制AR磷酸化、增强PTEN表达并将肿瘤细胞增殖被阻滞于S期而发挥抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖效应。

干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响

目的探讨干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响。方法采用腋下皮肤接种22Rv1细胞的方法制作SCID鼠前列腺癌模型,待成瘤后给予三种不同处理方法,观察荷瘤部位肿瘤的生长情况,并取肿瘤组织标本,使用RT-PCR以及western印痕法检测实验组与对照组肿瘤相关指标的差异。结果①给予mir-21 antagomirs治疗后实验组移植瘤肿瘤体积增长变缓;②RT-PCR检测miR-21在移植瘤中的表达,给予anti-miR21antagomirs治疗组的miR-21表达较空白对照组明显降低,有显著性差异(P<0.05)。而anti-miR21 antagomirs治疗组与anti-miR21 antagomirs合并去势治疗组的miR21的表达不具有显著性差异(P>0.05);③Western blot检测各组PDCD4的变化。给予anti-miR21 antagomirs治疗组对照组PDCD4的表达增高(P<0.05),去势治疗组的PDCD4表达于对照组比较未发现显著性差异(p>0.05)。结论 (1)抑制miRNA-21在肿瘤细胞中的表达,可以延缓裸鼠移植瘤的生长;(2)anti miR-21 antagomirs治疗组移植瘤体积增长慢于手术去势治疗组;(3)在前列腺癌22Rv1细胞裸鼠移植瘤中,PDCD4的表达受到了miRNA-21的反向调节。