复方中药紫龙金对前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用

目的探讨复方中药紫龙金 (简称紫龙金 )对雄激素依赖型人前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用机制。方法应用MTT法、流式细胞术和显微荧光术测定紫龙金对LNCaP的增殖、细胞周期分布和诱导凋亡的影响 ,应用RT PCR方法检测前列腺特异性抗原基因 (PSA)和雄激素受体 (AR) ,凋亡相关基因bcl 2和bax蛋白表达的影响 ;应用Westernblot方法测定对bcl 2和bax蛋白表达的影响。结果紫龙金对LNCaP细胞具有时间和剂量依赖性增殖抑制、G0 /G1期阻滞和诱导凋亡作用 ,作用 72h时IC50 为 0 .79mg/ml;紫龙金可以下调前列腺特异性标志基因PSA、AR和凋亡相关基因bcl 2的表达 ,降低bcl 2蛋白表达 ,对bax蛋白表达无明显作用。结论紫龙金可以通过抑制LNCaP细胞增殖、G0 /G1期阻滞、诱导凋亡、下调PSA、AR和bcl 2基因表达 ,降低bcl 2蛋白表达等作用机制发挥抗肿瘤作用。

染料木黄酮对前列腺癌细胞系PC-3生物学行为影响的意义(英文)

目的:观察染料木黄酮(genistein)对前列腺癌细胞PC-3生物学行为的影响,探讨genistein预防前列腺癌的可能性。方法:用MTT法绘制生长曲线,观察0,10,20,40μmol/L的Genistein对PC-3细胞生长能力的影响;PC-3细胞经Genistein处理3d后,流式细胞术观察Genistein对前列腺癌细胞PC-3细胞周期的影响,Transwell小室法重建基底膜侵袭模型研究Genistein处理后细胞侵袭性的改变。结果:经Genistein处理后,PC-3细胞的生长受到抑制,作用3d时的药物半数致死量(IC50)为25μmol/L;细胞周期改变主要为G2/M阻滞,凋亡率(AI)明显增加,0,10,20,40μmol/L组的G2/M的百分比和AI分别为14.9%,27.4%,33.1%,31.9%和0,6.5%,14.2%,25.4%。侵袭能力分别下降到未加药组的31.8%,8.6%和3.96%。结论:Genistein通过引起PC-3细胞G2/M阻滞,诱导PC-3细胞凋亡,从而抑制PC-3细胞的恶性增殖以及降低PC-3细胞的侵袭能力可能是Genistein降低前列腺癌的发病率的一个重要原因。Genistein有可能成为预防前列腺癌的药物之一。

人前列腺癌细胞系PC-3中PTI-1 cDNA的克隆及序列分析

为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源性为 99.3% ,但第 72 6、74 6、116 7、12 70、132 6、144 9、16 94和 16 95位碱基分别由A、A、C、C、A、A、T和C替代了文献中的C、C、G、G、G、C、C和T .其中 6个碱基的不同 ,导致了第 36、183、2 17、2 36、2 77和 35 9位密码子代表的氨基酸分别由Lys替代Gln ,Arg替代Gly ,Ala替代Gly ,Ser替代Gly ,Thr替代Pro和Arg替代Cys .将所获得的基因在GenBank登录 ,登录号为AF3974 0 3.结果提示 ,获得了PTI 1家族新成员 ,并且与EF 1α分子的同源性较已报道的PTI 1高 .

观察多西紫杉醇和维甲酸对前列腺癌细胞系PC-3的体外体内协同作用

目的研究多西紫杉醇与维甲酸对前列腺癌细胞系PC-3的体内体外协同作用。方法使用四甲基噻唑蓝法、光镜形态学、免疫细胞化学法及流式细胞仪观察多西紫杉醇和维甲酸在体外单药或者协同对前列腺癌细胞系PC-3生长的抑制作用、诱导凋亡等影响。结果各个药物在作用24 h、48 h之后对于前列腺癌细胞系PC-2细胞的生长抑制作用为:细胞存活率和药物浓度存在反比,而且还存在剂量依赖性,最为显著的就是10-6mol/L浓度维甲酸和10-6mol/L多西紫杉醇40 h作用最明显(抑制率为72. 9%,P <0. 05);人前列腺PC-3细胞在利用不同浓度及配伍药物处理以后,其主要表现为不同程度的细胞周所、染色质凝集及边缘毛躁,并且嗜碱性提高为深蓝色,核膜消失。最为显著的为10-7mol/L多西紫杉醇和10-5mol/L浓度的维甲酸结合,最不显著的就是10-7mol/L维甲酸单一用药。结论多西紫杉醇和维甲酸两者的协同作用能够有效提高对前列腺癌细胞系PC-3生长抑制及诱导凋亡的作用。

前列腺酸性磷酸酶负载的树突细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞过继免疫治疗晚期激素难治性前列腺癌的临床研究

目的探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)负载的树突细胞(DC)联合细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)对晚期激素难治性前列腺癌(HRPC)患者的临床疗效。方法回顾性研究吉林大学第二医院肿瘤生物治疗中心2009年4月至2013年2月收治的32例诊断明确且不再适宜手术或放化疗的晚期HRPC患者,随机分成两组:对照组16例,接受前列腺癌细胞系裂解物致敏DC联合CIK过继免疫;实验组16例,接受PAP-DC联合CIK过继免疫治疗,记录两组患者的临床疗效。结果两组患者治疗中均未出现严重不良反应,晚期HRPC患者对DC联合CIK治疗的耐受良好。两组患者治疗后外周血T淋巴细胞亚群较治疗前增高,但并无统计学差异(P>0.05);两组治疗后1 w血清前列腺特异性抗原(PSA)值有所升高,治疗后1个月PSA值下降,且较治疗前有统计学差异(P<0.05),但组间比较无统计学意义(P>0.05);短期疗效评价:实验组3例部分缓解(PR)、9例疾病稳定(SD)、4例疾病进展(PD),对照组2例PR、8例SD、6例PD,实验组的客观缓解率(ORR)高于对照组(P<0.05)。患者治疗后体力状况(KPS评分)改善,两组间无统计学差异;两组总生存期(OS)无统计学意义,而两组中位疾病进展时间(m TTP)差异显著(P<0.05),实验组无进展生存期(PFS)优于对照组(P<0.05)。结论 PAP负载DC联合CIK过继免疫治疗晚期HRPC患者的临床疗效不劣于前列腺癌细胞裂解物负载的DC-CIK免疫治疗,使患者无病生存获益,具有较好的临床应用价值。

小剂量阿司匹林对前列腺癌细胞的增殖抑制作用研究

前列腺癌（prostate cancer ）是男性生殖系最常见的恶性肿瘤之一，发病随年龄的增长而增加，其发病率有明显的地区差异，占男性癌症死亡的第二位［1］。目前，前列腺癌的病因尚未明确，可能与遗传、环境、性激素等因素有关。98％的前列腺癌为腺癌，常从前列腺萎缩的外周部分发生，大多数为多病灶癌［2］。

RK-33通过抑制RNA解旋酶DDX3增加前列腺癌细胞放射敏感性

尽管在前列腺癌诊断和治疗方面已经取得了巨大进步，但其依然是欧美男性中发病率最高的癌症，癌症致死率高居第二。在我们早期研究中发现了一种在前列腺癌中高表达的RNA解旋酶基因——DDx3，并发现它的表达越高，癌细胞的侵袭越强。在侵袭性前列腺癌细胞系中，敲除DDX3可以明显减少集落生成。因此，我们设计了一种可以特异性针对DDX3中ATP相关区域的小分子——RK-33。

冬凌草甲素对体外培养的前列腺癌PC-3细胞生长的影响

目的观察冬凌草甲素对前列腺癌PC-3细胞生长活性的影响,并对其可能机制进行探讨。方法 10、20、40、60μg/mL浓度冬凌草甲素分别作用于前列腺癌PC-3细胞12、24、36h(阳性对照药物为阿霉素),应用MTT法检测各组OD值,并计算抑制率;流式细胞术检测60μg/mL冬凌草甲素作用于PC-3细胞36h的细胞周期分布情况。结果与空白对照组相比较,冬凌草甲素组与阳性对照组的抑制率都显著增加,呈时间与剂量依赖性(P<0.05)。与阳性对照组相比较,冬凌草甲素组抑制率无明显变化(P>0.05)。与空白对照组相比较,冬凌草甲素组与阳性对照组的细胞在G0/G1期显著减少,G2/M期明显增加(P<0.05)。与阳性对照组相比较,冬凌草甲素组细胞在G0/G1期和G2/M期无明显变化(P>0.05)。结论冬凌草甲素能显著抑制PC-3细胞活性,由于毒性更低,副作用更小,其在治疗前列腺癌方面具有较好的临床应用及开采价值。

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对PC-3细胞增殖活性的影响。方法以不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞24h,以中效浓度(40μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞4、12、24、48、72h,后用MTT法检测在不同浓度及时间作用下PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。结果姜黄素对PC-3细胞的增殖抑制作用与顺铂相似(P>0.05),具有剂量时间依赖性,并随着药物浓度及时间的增加,抑制率逐渐增高,流式细胞仪检测显示:姜黄素和顺铂组都能使PC-3细胞生长明显阻滞于G2/M期,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素可以明显抑制PC-3细胞的增殖,在临床治疗前列腺癌方面有着良好的应用前景。

新型棉酚衍生物ApoG2对人前列腺癌PC-3移植瘤生长的抑制

目的:探讨棉酚衍生物ApoG2对前列腺癌的抑制作用,并了解其作用机理。方法:建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,在ApoG2作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中bcl-2、PCNA及caspase-3、-8的表达。结果:ApoG2可明显抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度,肿瘤体积明显减小,ApoG2能增加肿瘤组织中caspase-3、8的表达,减少PCNA表达。结论:ApoG2对人前列腺癌有显著的生长抑制作用。

多沙唑嗪对前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙唑嗪对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC 3在裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法:建立前列腺癌细胞系PC 3的裸鼠体内移植瘤模型,将30只荷瘤裸鼠随机分为5组[A组(对照组),B组(多沙唑嗪3mg/kg),C组(多沙唑嗪10mg/kg),D组(多沙唑嗪30mg/kg),E组(多沙唑嗪100mg/kg) ]。接种肿瘤细胞1周后每天1次灌胃给药,每周测量肿瘤体积2次,给药2周后处死裸鼠,取肿瘤组织做免疫组织化学Ki67及细胞凋亡DNA原位标记法(TUNEL法)检测,并用免疫印迹法研究蛋白Smad 4及IκBα在各组肿瘤组织中的表达情况。结果:多沙唑嗪给药组肿瘤体积较对照组显著缩小,肿瘤的重量较对照组亦显著减轻,而不同剂量的多沙唑嗪给药组间肿瘤大小差异无统计学意义。免疫组织化学结果显示前列腺癌细胞Ki67的阳性率在A至E组依次为36. 5%±8. 5%, 37. 7% ±11. 3%, 40. 1% ±12. 7%, 37. 2% ±12. 3%, 39. 3% ±13. 1%,各组间差异无统计学意义(P>0.O5);而前列腺癌细胞的TUNEL阳性率在A至E组依次为9. 5% ±3. 5%, 24. 7% ±8. 3%, 25. 7%±9. 7%, 28. 2%±12. 1%, 27. 5%±11. 3%,各用药组明显高于对照组(P<0.O1);免疫印迹结果表明用药组蛋白Smad 4及IκBα的表达显著高于对照组。结论:α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙?

人抑癌基因PTEN对前列腺癌细胞系生物学行为的影响

目的 探讨外源性人抑癌基因PTEN表达对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5细胞增殖和侵袭转移能力的影响。 方法 利用携带人PTEN基因的可调控性腺病毒 (Ad PTEN ) ,体外转染人前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5,RT PCR、Westernblot检测目的基因不同水平的表达 ,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术以及Boyden小室法检测LNCaP、DU 14 5转染前后细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞体外侵袭力的变化。 结果 转染Ad PTEN后LNCaP、DU 14 5细胞的PTEN表达由阴性转为阳性 ,转染后对LNCaP、DU 14 5细胞生长有抑制作用 ,阻滞于G0 ～G1期 ,早期细胞凋亡率增加 ,LNCaP细胞 (6.89± 0 .51) % ;DU14 5细胞 (5.44± 1.13 ) % ,与对照组相比差异有显著性 ,Boyden小室法检测转染后体外侵袭力受到明显抑制。 结论 重组腺病毒介导的人PTEN基因在体外对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5的细胞增殖和体外侵袭力有明显抑制作用 。

体外培养人类前列腺组织研究前列腺组织DNA损伤反应

前列腺癌是欧美国家老年男性最常见的恶性肿瘤,居男性肿瘤相关死亡率第二位,仅次于肺癌[1]。前列腺癌的研究需要建立有效的实验方法和实验对象,而目前用于前列腺癌研究的常用对象是前列腺癌细胞系,包括LNCaP细胞、PC-3细胞和CWR22细胞等,以及转基因鼠和裸鼠荷瘤模型。由于前列腺癌细胞系研究无法观察细胞与基质之间的关系,而使用动物模型也并非研究人类前列腺疾病的最佳对象。

还氧合酶-2抑制剂NS398对人前列腺癌细胞系PC-3的增殖抑制作用

目的 观察还氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS398对人前列腺癌细胞系PC-3的增殖抑制作用,探讨NS398的抗癌机理。方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)用于检测PC-3的COX-2 mRNA的表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察 NS398对 PC-3的增殖抑制作用。为进一步探讨NS398对PC-3的增殖抑制机制,通过DNA梯形电泳和透射电镜试验对细胞凋亡的情况进行检测。结果 PC-3的 COX-2 mRNA表达阳性。NS398对 PC-3的增殖抑制作用表现为剂量依赖性和时间依赖性。DNA梯形电泳显示特征性的梯形谱带。透射电镜表现为细胞核膜完整,染色质聚集成块、边集,胞浆内可见明显的“空泡”和“凋亡小体”,细胞膜完整,细胞表面的微绒毛消失。结论 NS398对人前列腺癌细胞系PC-3的增殖具有抑制作用,并能诱导PG-3细胞的凋亡。NS398对PG-3的抑制可能是通过诱导细胞凋亡的途径实现的。

他莫昔芬通过丝裂原活化蛋白激酶抑制前列腺癌细胞系PC3细胞增殖

他莫昔芬是选择性雌激素受体（ER）调节剂（SERM）。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）主要包括细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）、c-JunN端应力激活蛋白激酶（JNK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）。他莫昔芬（TAM）通过ER可以激活MAPK。本实验旨在研究MAPK信号转导通路在他莫昔芬抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3生长中的作用。

三种常见的前列腺癌细胞系LNCap、PC3和DU145的生物学特性

前列腺癌在西方国家男性高发的恶性肿瘤中,其死亡率高居癌症死亡率的第二位,仅次于肺癌,近年来,随着人们生活方式的改变、人口的老龄化以及诊断水平的不断提升,我国前列腺癌的发病率呈明显上升趋势,上海市统计数据显示,前列腺癌的发病率已经从1991年的2.9/10万男性上升至目前的12.6/10万男性,将成为严重危害我国男性身体健康的重要疾病之一.

灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响

目的研究灵芝多糖(GlPS)抗肿瘤作用及其机制。方法通过相差显微镜和间接免疫荧光的方法鉴定了人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。采用MTT法检测GlPS对人前列腺癌细胞(PC-3M)和HUVECs增殖的影响。检测GlPS对PC-3M细胞与HUVECs粘附的影响。采用transwell双层小室观察GlPS对PC-3M迁移穿过单层HUVECs的影响。结果GlPS对PC-3M无直接细胞毒作用,对HUVECs增殖无显著性作用。GlPS能够减少粘附和迁移穿过单层内皮细胞的肿瘤细胞数目。结论灵芝多糖通过抑制肿瘤细胞粘附并迁移穿过内皮细胞发挥其抗肿瘤作用。