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足月妊娠子宫蜕膜组织环氧化酶Ⅱ与前列腺素E合成酶2的表达与引产成功率的关系 被引量:2
1
作者 贾瑞喆 刘晓梅 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期402-405,共4页
目的研究足月妊娠人子宫蜕膜组织中环氧化酶Ⅱ(COXⅡ)与前列腺素E合成酶2(PTGES2)蛋白的表达与缩宫素引产成功率的关系。方法选择缩宫素引产成功与缩宫素引产失败的孕妇,于剖宫产术中取子宫蜕膜组织。行Western blot检测子宫蜕膜中COXⅡ... 目的研究足月妊娠人子宫蜕膜组织中环氧化酶Ⅱ(COXⅡ)与前列腺素E合成酶2(PTGES2)蛋白的表达与缩宫素引产成功率的关系。方法选择缩宫素引产成功与缩宫素引产失败的孕妇,于剖宫产术中取子宫蜕膜组织。行Western blot检测子宫蜕膜中COXⅡ与PTGES2蛋白的表达。结果缩宫素引产成功组与引产失败组子宫蜕膜组织COXⅡ蛋白的表达水平无明显差异。缩宫素引产成功组比引产失败组子宫蜕膜PTGES2蛋白的表达明显增高(P<0.05)。结论子宫蜕膜组织中PTGES2蛋白的表达量与缩宫素引产成功率关系密切。 展开更多
关键词 氧化酶Ⅱ 前列腺E合成酶2 引产
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冠状动脉粥样硬化组织环氧化物酶-2、诱导型前列腺素合成酶-1表达及塞来昔布的影响 被引量:2
2
作者 李新华 刘恒方 +1 位作者 杨期东 苗旺 《中国心血管杂志》 2007年第3期175-177,181,共4页
目的探讨兔冠状动脉粥样硬化组织环氧化物酶-2(Cox-2)、诱导型前列腺素合成酶-1(mPGES-1)表达机制及塞来昔布对其表达的影响。方法采用32只雄性新西兰大白兔,正常对照组8只(A 组);另24只将给予1%高胆固醇喂养2周,建立兔动脉粥样硬化动... 目的探讨兔冠状动脉粥样硬化组织环氧化物酶-2(Cox-2)、诱导型前列腺素合成酶-1(mPGES-1)表达机制及塞来昔布对其表达的影响。方法采用32只雄性新西兰大白兔,正常对照组8只(A 组);另24只将给予1%高胆固醇喂养2周,建立兔动脉粥样硬化动物模型。将模型兔随机分为无干预组(B 组)、小剂量塞来昔布治疗组(15mg/kg,C 组),大剂量塞来昔布治疗组(35 mg/kg,D 组),每组8只。治疗4周后取双侧冠状动脉并分为平等2段,分别行半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印记法(Western blot)测定各组冠状动脉粥样硬化组织 Cox-2及 mPGES-1表达。结果与 A 组比较,B 组冠状动脉粥样硬化组织 Cox-2及 mPGES-1表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05);与 B 组比较,C、D 组冠状动脉组织的 Cox-2及 mPGE-1表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);与 B 组比较,C 组的 ALD 明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在动脉粥样硬化的病理过程中炎症反应可能起着主导作用,塞来昔布干预可抑制 Cox-2及 mPGES-1表达,减缓动脉粥样硬化的进展。 展开更多
关键词 塞来昔布 动脉粥样硬化 氧化物酶-2 诱导型前列腺合成酶-1
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肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2表达水平与表皮生长因子受体基因突变的相关性分析
3
作者 闫琛 徐小艳 杨金花 《临床心身疾病杂志》 CAS 2024年第4期6-10,共5页
目的 分析肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)表达水平与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的相关性。方法 选取57例肺腺癌患者为研究对象,收集肺腺癌组织及其相应癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测癌组织及癌旁组织... 目的 分析肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)表达水平与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的相关性。方法 选取57例肺腺癌患者为研究对象,收集肺腺癌组织及其相应癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测癌组织及癌旁组织中PTGS2 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法分析PTGS2蛋白表达;采用RT-PCR法检测癌组织及癌旁组织EGFR基因突变情况。分析肺腺癌患者临床病理参数与PTGS2 mRNA水平、EGFR基因突变情况的关系。采用Spearman秩相关分析探讨肺腺癌患者EGFR基因突变情况与PTGS2 mRNA水平的相关性。结果 57例肺腺癌患者中,5例癌旁组织EGFR基因突变型患者,其对应癌组织也均发生突变,且为同一突变类型。26例(45.61%)癌组织EGFR基因突变型患者,未发现双重突变,其中19外显子突变17例(29.82%),均为缺失突变;21外显子突变9例(15.79%),均为L858R点突变。癌组织中PTGS2mRNA表达水平、PTGS2蛋白阳性率及EGFR基因突变型比例高于癌旁组织,EGFR基因野生型比例低于癌旁组织(P<0.01)。肺腺癌患者性别、TNM分期、吸烟与PTGS2 mRNA表达水平、EGFR基因突变情况有关(P<0.05或0.01)。EGFR基因突变型PTGS2 mRNA表达水平高于EGFR基因野生型(P<0.01)。肺腺癌患者EGFR基因突变与PTGS2 mRNA表达水平呈正相关(r=0.512,P<0.01)。结论 肺腺癌患者癌组织中PTGS2mRNA表达水平及PTGS2蛋白阳性率升高,且与EGFR基因突变关系密切,二者可能共同影响疾病进程。 展开更多
关键词 肺腺癌 前列腺内过氧化物合酶2 表皮生长因子受体 基因突变 相关性
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靶向调控前列腺素内过氧化物合成酶2基因抑制MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化 被引量:2
4
作者 罗鸣然 范文豪 +3 位作者 李鑫 周鹏 吴泽睿 袁峰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第12期1888-1893,共6页
背景:骨质疏松症可归因于成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收之间的不平衡。成骨细胞是骨形成的基础,对于骨骼的生长和维持必不可少,成骨细胞功能的紊乱会导致骨骼生长发育不良和骨质疏松症。然而目前对于成骨细胞成骨分化过程中的关键基... 背景:骨质疏松症可归因于成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收之间的不平衡。成骨细胞是骨形成的基础,对于骨骼的生长和维持必不可少,成骨细胞功能的紊乱会导致骨骼生长发育不良和骨质疏松症。然而目前对于成骨细胞成骨分化过程中的关键基因仍不清楚。目的:使用生物信息学鉴定MC3T3-E1细胞成骨分化过程中的关键基因及其上游miRNA,并验证其对MC3T3-E1细胞成骨分化和增殖的影响。方法:从基因表达综合数据库(GEO)下载基因表达谱GSE46400成骨诱导数据,使用R语言limma包获得差异表达基因。利用DAVID数据库对DEGs进行了基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析。通过STRING网站建立蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并利用CytoHubba插件筛选网络中的重要模块,以鉴定其中的关键基因。培养MC3T3-E1细胞并分别转染siRNA和miRNA,转染72 h后进行实时荧光定量PCR检测前列腺素内过氧化物合成酶(prostaglandin-endoperoxide synthase,Ptgs)2和骨化相关水平变化,转染72 h后进行Western Blot检测PTGS2蛋白水平变化;转染14 d后进行碱性磷酸酶定量检测;转染21 d后进行茜素红染色及定量检测。结果与结论:(1)筛选出差异表达基因229个,其中114个基因表达上调,115个基因表达下调。富集在骨矿化生物学过程的5个基因:Mmp13,Ibsp,Gpnmb,Ptgs2及Aspn均为显著高表达。进一步使用CytoHubba鉴别高表达差异基因中的核心模块中只有Ptgs2参与骨矿化生物学过程,即定义Ptgs2为成骨分化过程的关键基因。(2)通过Targetscan对Ptgs2上游miRNA进行预测,发现mmu-miR-107-3p可以靶向调控Ptgs2。(3)在MC3T3-E1细胞中敲减Ptgs2后可以显著抑制细胞增殖和成骨分化(P<0.05);在转染mmu-miR-107-3p后,细胞的增殖和成骨分化同样被抑制。(4)双荧光素酶报告基因结果显示mmu-miR-107-3p可以直接靶向抑制Ptgs2的转录(P<0.05)。(5)mmu-miR-107-3p可以通过靶向Ptgs2进而抑制MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化,Ptgs2可能是MC3T3-E1细胞成骨分化过程中的关键基因。 展开更多
关键词 生物信息学 差异表达基因 MC3T3-E1前成骨细胞 前列腺内过氧化合成酶2 mmu-miR-107-3p 成骨分化 增殖
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前列腺素合成酶基因调控与前列腺疾病关系的研究进展 被引量:8
5
作者 吴双双 吴建辉 孙祖越 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期663-667,共5页
前列腺素合成酶(PGS)能催化各种类型前列腺素的生成,调节相关物质的基因表达水平,其基因调控机制与前列腺疾病的发生和发展密切相关。目前有关PGS在前列腺疾病如良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)中调控机制的研究很少,鲜有研究直接对... 前列腺素合成酶(PGS)能催化各种类型前列腺素的生成,调节相关物质的基因表达水平,其基因调控机制与前列腺疾病的发生和发展密切相关。目前有关PGS在前列腺疾病如良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)中调控机制的研究很少,鲜有研究直接对PGS基因调控与前列腺疾病关系进行探讨。本文拟对两者的关系进行分析,为从干预PGS调控途径防控BPH和PCa提供研发思路。 展开更多
关键词 前列腺合成酶 基因调控 良性前列腺增生 前列腺
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Lipocalin型前列腺素D合成酶的结构、定位与特性 被引量:11
6
作者 陈德宇 黄宇烽 周开亚 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期134-138,共5页
Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)是一种糖基化、双功能、单体蛋白质 ,具有催化PGD2的合成和转运亲脂性物质的作用。它在中枢神经系统、雄性生殖器官和人与猴的心脏等器官中有分布 ,并被分泌到脑脊液、精浆及血浆内。L PGDS浓度的... Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)是一种糖基化、双功能、单体蛋白质 ,具有催化PGD2的合成和转运亲脂性物质的作用。它在中枢神经系统、雄性生殖器官和人与猴的心脏等器官中有分布 ,并被分泌到脑脊液、精浆及血浆内。L PGDS浓度的检测对神经错乱、精子生成障碍、心血管疾病和肾功能障碍等疾病具有辅助诊断作用。 展开更多
关键词 Lipocalin型前列腺D合成酶 前列腺D2
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人睾丸前列腺素D合成酶在毕赤氏酵母中的表达、纯化及鉴定 被引量:6
7
作者 高云 黄宇烽 +1 位作者 夏欣一 马百坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期757-762,共6页
L PGDS是一种双功能蛋白 ,即催化PGD2产生和运输亲脂 疏水分子 .L PGDS主要分布于脑和男性生殖器官 ,并分泌到脑脊液、血清、精液、尿液等体液中 .测定体液中L PGDS的含量可辅助诊断一些神经系统疾病、生殖系统疾病、心血管疾病和肾脏... L PGDS是一种双功能蛋白 ,即催化PGD2产生和运输亲脂 疏水分子 .L PGDS主要分布于脑和男性生殖器官 ,并分泌到脑脊液、血清、精液、尿液等体液中 .测定体液中L PGDS的含量可辅助诊断一些神经系统疾病、生殖系统疾病、心血管疾病和肾脏疾病等 .在毕赤氏酵母中表达人睾丸前列腺素D合成酶 ,以利于进一步的生物学功能及临床应用研究 .用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS成熟肽基因编码序列 ,经测序证实后 ,将其插入到质粒pPIC9中 ,构建该基因的酵母表达质粒 .电转化毕赤氏酵母GS1 1 5 ,经甲醇诱导后 ,可实现L PGDS的高效、分泌性表达 .镍离子亲合层析法对表达上清进行纯化 ,SDS PAGE分析证实 ,在 2 7kD处有重组蛋白的表达 ,表达量为 2 7mg L .纯化蛋白可与视黄酸结合 。 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 酵母表达系统 金属亲合层析 糖基化
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Lipocalin 型前列腺素D合成酶与男性生殖 被引量:7
8
作者 陆金春 黄宇烽 张锡然 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期119-122,共4页
Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)在男性生殖系统中广泛表达 ,且表达程度与男性生殖器官的发育成熟有关。附睾中L PGDS的合成可能受睾酮和睾丸因子的调节 ,而局部生殖细胞对睾丸L PGDS的表达亦起一定作用。男性生殖系统中的L PGDS... Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)在男性生殖系统中广泛表达 ,且表达程度与男性生殖器官的发育成熟有关。附睾中L PGDS的合成可能受睾酮和睾丸因子的调节 ,而局部生殖细胞对睾丸L PGDS的表达亦起一定作用。男性生殖系统中的L PGDS为一种多形性的糖蛋白 ,可催化精浆中PGD2 的产生。L PGDS为一种生育相关蛋白 ,且与类视色素的运输和跨越血 睾屏障或血 附睾屏障的物质转运有关 ;PGD2 不仅与精子在女性生殖道中运行有关 ,亦可能与免疫性不育有关。人睾丸L PGDS的体外克隆和表达的研究 ,对进一步探索L 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 男性生殖 前列腺D2
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人睾丸前列腺素D合成酶的cDNA克隆和序列分析 被引量:4
9
作者 陆金春 张锡然 黄宇烽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期170-173,共4页
目的 对人睾丸 L ipocalin型前列腺素 D合成酶 (L - PGDS) c DNA进行克隆和序列分析。 方法 用人脑 L - PGDS的特异性引物对人睾丸 RNA进行逆转录和 PCR扩增 ,并对扩增产物进行纯化和测序。 结果 人睾丸 L - PGDS c DNA核苷酸序列... 目的 对人睾丸 L ipocalin型前列腺素 D合成酶 (L - PGDS) c DNA进行克隆和序列分析。 方法 用人脑 L - PGDS的特异性引物对人睾丸 RNA进行逆转录和 PCR扩增 ,并对扩增产物进行纯化和测序。 结果 人睾丸 L - PGDS c DNA核苷酸序列与人外周血淋巴细胞的 L - PGDS基因编码区序列的一致性为 99.5 % ,与人脑 L -PGDS c DNA的一致性为 96 .0 % ,相应氨基酸的一致性分别为 10 0 %和 94.2 %。 结论 人睾丸 L - PGDS c DNA序列及推导的氨基酸序列的阐明 ,对进一步探讨 L - PGDS蛋白的特性及其在男性生殖中的作用是十分有意义的。 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 睾丸 精子发生 CDNA 克隆 序列分析
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人睾丸前列腺素D合成酶重组表达质粒的构建与鉴定 被引量:5
10
作者 陆金春 黄宇烽 张锡然 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期230-233,共4页
目的 :构建高效表达人睾丸前列腺素D合成酶 (htL PGDS)的重组表达质粒。 方法 :以经测序证实为人L PGDS的人睾丸L PGDScDNA为模板进行PCR扩增 ,得到编码L PGDS的基因片段 ,用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行酶切后 ,连接到经相同内切... 目的 :构建高效表达人睾丸前列腺素D合成酶 (htL PGDS)的重组表达质粒。 方法 :以经测序证实为人L PGDS的人睾丸L PGDScDNA为模板进行PCR扩增 ,得到编码L PGDS的基因片段 ,用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行酶切后 ,连接到经相同内切酶处理的原核表达载体pGEX 2T中。重组质粒pGEX 2T/htL PGDS被进一步转化感受态大肠杆菌JM10 3 ,转化物接种到含氨苄青霉素的LB平板 ,37℃培养 12~ 16h后 ,挑取氨苄青霉素抗性菌落 ,并接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中 ,37℃、16 0r/min培养 12~ 16h后 ,提取质粒DNA供PCR和双酶切鉴定。 结果 :共筛选出氨苄青霉素抗性菌落 10 9个 ,经PCR和双酶切鉴定出 10个重组质粒pGEX 2T/htL PGDS。结论 :重组表达质粒pGEX 2T/htL PGDS的构建及正确鉴定 ,为以后的重组抗原的表达、纯化及单克隆抗体的制备奠定了基础。 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 质粒 睾丸 基因重组
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人睾丸前列腺素D合成酶的原核表达 被引量:5
11
作者 陆金春 张锡然 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2001年第5期397-400,共4页
目的:将获得纯化的重组人睾丸前列腺素D合成酶(L-PGDS)用于基础和临床研究. 方法:在原核表达系统中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS的表达,用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和并纯化重组融合蛋白GST/htL-PGDS,再... 目的:将获得纯化的重组人睾丸前列腺素D合成酶(L-PGDS)用于基础和临床研究. 方法:在原核表达系统中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS的表达,用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和并纯化重组融合蛋白GST/htL-PGDS,再用凝血酶裂解融合蛋白,从而获得纯化的重组L-PGDS.对表达纯化重组蛋白的质粒进行DNA测序,并对重组蛋白进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,鉴定其是否为所需目的蛋白. 结果:用IPTG诱导重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS表达的最佳浓度为1 mmol/L,最佳时间为4 h.在此基础上获得的融合蛋白用凝血酶裂解后获得单一纯化的重组蛋白L-PGDS,最佳裂解时间为2 h.SDS-PAGE和DNA测序证实,所获的重组蛋白确系所需目的蛋白. 结论:用上述方法可获得纯化的人睾丸L-PGDS. 展开更多
关键词 pGEX-2T 原核表达 睾丸 前列腺D合成酶 纯化重组
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泰拉霉素和红霉素对一氧化氮和前列腺素E2合成抑制作用的比较 被引量:3
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作者 周磊 颜其贵 吴聪明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1939-1947,共9页
目的以红霉素为对照,探讨泰拉霉素是否具有抗炎作用。方法利用细菌脂多糖(LPS)诱导猪外周血单核细胞(PBMC)过度表达致炎因子而构建的体外炎症模型,采用SYBR Green法实时荧光定量PCR技术,在分子水平研究了不同浓度泰拉霉素和红霉素对一... 目的以红霉素为对照,探讨泰拉霉素是否具有抗炎作用。方法利用细菌脂多糖(LPS)诱导猪外周血单核细胞(PBMC)过度表达致炎因子而构建的体外炎症模型,采用SYBR Green法实时荧光定量PCR技术,在分子水平研究了不同浓度泰拉霉素和红霉素对一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)合成的影响。结果20μg·mL-1和10μg·mL-1浓度的泰拉霉素与20、10和5μg·mL-1浓度的红霉素均能显著抑制猪PBMC细胞合成NO和PGE2,并抑制诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)基因的转录;而5μg·mL-1的泰拉霉素无明显的这种调节作用。结论泰拉霉素和红霉素能在转录和翻译水平通过调节致炎因子的合成而发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 泰拉霉 红霉 氧化 前列腺E2 诱导型一氧化合成酶 环氧合酶-2
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Lipocalin型前列腺素D合成酶在大鼠睾丸和附睾中的分布与定位 被引量:2
13
作者 陈德宇 黄宇烽 +1 位作者 陆惠敏 周开亚 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期443-445,共3页
目的 分析大鼠睾丸和附睾中Lipocalin型前列腺素D合成酶 (LPGDS)的分布与定位 ,探讨LPGDS在男性生殖中的作用。 方法 选用 2月龄SD大鼠睾丸与附睾 ,运用Westernblot方法分析LPGDS在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差... 目的 分析大鼠睾丸和附睾中Lipocalin型前列腺素D合成酶 (LPGDS)的分布与定位 ,探讨LPGDS在男性生殖中的作用。 方法 选用 2月龄SD大鼠睾丸与附睾 ,运用Westernblot方法分析LPGDS在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差异 ;运用免疫组织化学方法分析LPGDS在睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的分布。 结果 Westernblot研究发现 ,LPGDS在大鼠睾丸中没有表达 ,在附睾中有较强表达 ,附睾头表达量最高 ,附睾体次之 ,附睾尾最低。免疫组织化学结果显示 ,免疫阳性产物定位于附睾上皮细胞的胞质和纤毛上。 结论LPGDS在大鼠睾丸中没有表达 ,在附睾中有较强表达 ,表达量存在差异。提示 ,LPGDS在精子成熟过程中起着一定的作用。 展开更多
关键词 Lipocalin型前列腺D合成酶 睾丸 附睾 大鼠
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原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E_2合成酶-1表达的影响 被引量:3
14
作者 王旭光 陈根殷 杨展 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期429-432,共4页
目的探讨原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)表达的影响。方法酶免疫测定法(EIA)检测原花青素对PGE2生成的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mPGES-1mRNA的表达,Western blotting检测mPGES-1蛋白的表达。结果... 目的探讨原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)表达的影响。方法酶免疫测定法(EIA)检测原花青素对PGE2生成的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mPGES-1mRNA的表达,Western blotting检测mPGES-1蛋白的表达。结果脂多糖(LPS)可以促进RAW264.7细胞PGE2的生成同时上调mPGES-1mRNA和蛋白的表达,而原花青素(4、20 mg.L-1)下调LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1mRNA和蛋白的表达,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成。结论原花青素在mRNA和蛋白水平抑制LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1表达从而减少PGE2的合成,这可能是原花青素抗炎的机制之一。 展开更多
关键词 原花青 膜相关前列腺E2合成酶 前列腺E2
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人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体的构建及酵母表达菌株的建立 被引量:2
15
作者 高云 黄宇烽 +1 位作者 夏欣一 马百坤 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期111-114,共4页
目的 :在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS) ,以利于生物学功能及临床应用研究。 方法 :用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS基因编码序列 ,构建该基因的酵母表达质粒 ;将表达质粒电转化毕... 目的 :在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS) ,以利于生物学功能及临床应用研究。 方法 :用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS基因编码序列 ,构建该基因的酵母表达质粒 ;将表达质粒电转化毕赤酵母 ,甲醇诱导L PGDS的表达。 结果 :PCR扩增的L PGDS成熟肽基因编码序列克隆T载体后 ,经测序证明与所报道的人睾丸L PGDScDNA完全一致。对培养上清进行SDS PAGE分析显示 ,在相对分子质量为 2 70 0 0处有重组蛋白的表达 ,与理论值完全一致。 结论 :人Lipocalin型前列腺素D合成酶在毕赤酵母中获得了高效。 展开更多
关键词 人Lipocalin型前列腺D合成酶 真核载体 临床应用 毕赤酵母
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肥大细胞中前列腺素合成酶的组织化学观察 被引量:3
16
作者 孙广芳 王一飞 +1 位作者 冯惠忠 黄祝玲 《解剖学报》 CAS 1987年第1期91-95,130,共6页
用正常成年豚鼠20只、大鼠10只,颈椎脱臼或重击头部处死后,立即取胸腺、淋巴结和小肠,部分材料投入-70℃液氮速冻,部分材料入10%甲醛和纯甲醇固定,石蜡切片,HE和肥大细胞特殊染色;肠系膜铺片经氮气吹干后,与液氮速冻的组织块一并置-70... 用正常成年豚鼠20只、大鼠10只,颈椎脱臼或重击头部处死后,立即取胸腺、淋巴结和小肠,部分材料投入-70℃液氮速冻,部分材料入10%甲醛和纯甲醇固定,石蜡切片,HE和肥大细胞特殊染色;肠系膜铺片经氮气吹干后,与液氮速冻的组织块一并置-70℃低温冰箱保存。可随时取出做恒冷箱切片,部分冰冻切片及肠系膜铺片用Janszen和Nugteren前列腺素合成酶组织化学法显示,以此法同步显示家兔肾脏。每种切片均用酶的特异抑制剂消炎痛作对照。部分连续冰冻切片,做HE和肥大细胞特殊染色。结果表明,前列腺素合成酶活性存在于肥大细胞的胞质内,颗粒和胞核为阴性。家兔肾脏集合管恒为阳性。消炎痛抑制反应极弱。确证前列腺素合成酶的组织化学方法可靠并且具特异性。前列腺素合成酶阳性反应的细胞,见于大鼠和豚鼠的小肠粘膜及粘膜下层、胸腺被膜和胸腺隔的结缔组织以及胸腺髓质、淋巴结被膜和小梁结缔组织及深皮质区;散布于肠系膜铺片上的细胞多呈椭圆形。以上所示酶活性细胞的分布,与肥大细胞的其他特殊染色结果相符。证明酶反应确是在肥大细胞内。本文用组织化学技术,证实肥大细胞内存在前列腺素合成酶,此酶是衡量前列腺素合成的敏感指标,可考虑用此方法研究肥大细胞的生理和病理。 展开更多
关键词 肥大细胞 前列腺合成酶 组织化学
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膜结合型前列腺素E合成酶1及其表达与肿瘤相关性的研究进展 被引量:2
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作者 欧阳林旗 刘世坤 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1180-1183,共4页
膜结合型前列腺素E合成酶1(membrane-associated prostaglandin E synthase-1,mPGES-1)是前列腺素(prostaglandin,PG)E2生物合成过程中重要的终端限速酶,与环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)功能性偶联参与机体多种生理及病理过程。近... 膜结合型前列腺素E合成酶1(membrane-associated prostaglandin E synthase-1,mPGES-1)是前列腺素(prostaglandin,PG)E2生物合成过程中重要的终端限速酶,与环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)功能性偶联参与机体多种生理及病理过程。近年来研究发现,mPGES-1在多种肿瘤组织中过度表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。抑制mPGES-1的活性能有效降低PGE2的产生,同时能避免非甾体类抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAID)及COX-2特异性抑制剂引起的心血管方面的不良反应,是一个比COX-2更理想、更安全的防治肿瘤的药物开发新靶点。本文就mPGES-1的分子生物学特征、与肿瘤发生和发展的相关性及其抑制剂的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤 前列腺E类 基因表达 膜结合型前列腺E合成酶1 膜结合型前列腺E合成酶1抑制剂
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重组人睾丸前列腺素D合成酶DNA免疫鸡的初步研究 被引量:2
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作者 陆金春 黄宇烽 张锡然 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期22-24,共3页
目的 :证实用重组人睾丸前列腺素D合成酶 (rhtL PGDS)DNA免疫鸡可获得相应的抗体。 方法 :用重组质粒 pGEX 2T/htL PGDSDNA(10 0 μg)免疫鸡 ,隔 2周加强 1次 ,共 2次。抽取鸡血分离血清 ,以原核表达的rhtL PGDS作为抗原 ,琼脂糖双向... 目的 :证实用重组人睾丸前列腺素D合成酶 (rhtL PGDS)DNA免疫鸡可获得相应的抗体。 方法 :用重组质粒 pGEX 2T/htL PGDSDNA(10 0 μg)免疫鸡 ,隔 2周加强 1次 ,共 2次。抽取鸡血分离血清 ,以原核表达的rhtL PGDS作为抗原 ,琼脂糖双向免疫扩散法和ELISA法检测鸡血清中有无抗L PGDS抗体及其效价。 结果 :琼脂糖双向免疫扩散法证实鸡血清中存在抗L PGDS抗体 ,ELISA法检出其效价为 1∶2 0 4 8。 结论 :用重组质粒pGEX 2T/htL PGDSDNA免疫鸡制备抗L 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 DNA免疫 睾丸 琼脂糖双向免疫扩散法 ELISA法
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小鼠早孕期子宫中脂质运载蛋白前列腺素D合成酶和前列腺素D受体的表达 被引量:1
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作者 倪华 温海霞 +1 位作者 杨明丽 倪江 《生殖医学杂志》 CAS 2006年第1期34-37,共4页
目的检测脑型脂质运载蛋白前列腺素D合成酶(LPGDS)和前列腺素D受体(DP)在早孕期小鼠子宫中的表达变化,评价LPGDS和DP在胚胎着床和妊娠维持中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测LPGDS和DP在孕1~8d小鼠子... 目的检测脑型脂质运载蛋白前列腺素D合成酶(LPGDS)和前列腺素D受体(DP)在早孕期小鼠子宫中的表达变化,评价LPGDS和DP在胚胎着床和妊娠维持中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测LPGDS和DP在孕1~8d小鼠子宫中的表达水平,以及在胚胎着床和非着床位点(妊娠第5天)的表达。结果小鼠孕2~4d,LPGDS mRNA的水平明显高于孕1、5~8d;孕5~8d,DP mRNA的水平显著高于孕1~4d。孕第5天,胚胎着床和非着床位点LPGDS的表达没有差异,DP在胚胎非着床位点的表达显著高于着床位点。结论LPGDS在小鼠胚胎着床前子宫中高表达,DP在胚胎着床后高表达;说明LPGDS可能与子宫发育成为可接受态有关,而DP作用在于维持妊娠。 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 前列腺D受体 胚胎着床
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抗前列腺素D合成酶自身抗体酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在不育症诊断中的初步应用 被引量:1
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作者 陆金春 黄宇烽 +1 位作者 张锡然 胡毓安 《生殖医学杂志》 CAS 2002年第3期149-152,共4页
目的 :证实抗 lipocalin型前列腺素 D合成酶 ( L -PGDS)自身抗体的存在 ,建立检测该抗体的酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)方法 ,并探讨其在不育症诊断中的初步应用。方法 :用纯化的重组 L-PGDS作为抗原 ,建立检测抗 L-PGDS自身抗体的 EL IS... 目的 :证实抗 lipocalin型前列腺素 D合成酶 ( L -PGDS)自身抗体的存在 ,建立检测该抗体的酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)方法 ,并探讨其在不育症诊断中的初步应用。方法 :用纯化的重组 L-PGDS作为抗原 ,建立检测抗 L-PGDS自身抗体的 EL ISA法 ,并用特异性 L -PGDS吸附试验检测 EL ISA法的特异性 ,同时检测 EL ISA法的重复性 ,并对2 0 4例不育症病人的精浆和血清中抗 L-PGDS自身抗体进行检测。结果 :特异性吸附试验和重复性试验证实 ,EL ISA法稳定可靠 ,1 1 4例不育男性中精浆抗 L-PGDS自身抗体阳性者 49例 ( 3 4.0 % ) ;无精子症、少精子症病人的阳性率 ( 48.5%和 43 .2 % )明显高于正常精子数的不育男性 ( 2 3 .0 % ) ( P<0 .0 1和 P<0 .0 5)。 60例不育病人血清抗 L-PGDS自身抗体阳性 1 8例 ( 3 0 .0 % )。结论 :不育症病人精浆和血清中存在抗 L-PGDS自身抗体 ,建立的 EL ISA法稳定可靠 。 展开更多
关键词 前列腺D合成酶 自身抗体 不育症 精浆 诊断 酶联免疫吸附法
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