肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2表达水平与表皮生长因子受体基因突变的相关性分析

目的 分析肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)表达水平与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的相关性。方法 选取57例肺腺癌患者为研究对象,收集肺腺癌组织及其相应癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测癌组织及癌旁组织中PTGS2 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法分析PTGS2蛋白表达;采用RT-PCR法检测癌组织及癌旁组织EGFR基因突变情况。分析肺腺癌患者临床病理参数与PTGS2 mRNA水平、EGFR基因突变情况的关系。采用Spearman秩相关分析探讨肺腺癌患者EGFR基因突变情况与PTGS2 mRNA水平的相关性。结果 57例肺腺癌患者中,5例癌旁组织EGFR基因突变型患者,其对应癌组织也均发生突变,且为同一突变类型。26例(45.61%)癌组织EGFR基因突变型患者,未发现双重突变,其中19外显子突变17例(29.82%),均为缺失突变;21外显子突变9例(15.79%),均为L858R点突变。癌组织中PTGS2mRNA表达水平、PTGS2蛋白阳性率及EGFR基因突变型比例高于癌旁组织,EGFR基因野生型比例低于癌旁组织(P<0.01)。肺腺癌患者性别、TNM分期、吸烟与PTGS2 mRNA表达水平、EGFR基因突变情况有关(P<0.05或0.01)。EGFR基因突变型PTGS2 mRNA表达水平高于EGFR基因野生型(P<0.01)。肺腺癌患者EGFR基因突变与PTGS2 mRNA表达水平呈正相关(r=0.512,P<0.01)。结论 肺腺癌患者癌组织中PTGS2mRNA表达水平及PTGS2蛋白阳性率升高,且与EGFR基因突变关系密切,二者可能共同影响疾病进程。

过氧化物酶体增殖物激活受体对人绒毛膜前列腺素代谢酶的调节

目的 探索不同妊娠状态人绒毛膜上过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)各亚型的基因和蛋白表达差异及其与前列腺素代谢酶15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH)蛋白表达的相关性,进一步浅探PPARs对PGDH可能的调节机制和在分娩启动中可能发挥的作用。方法 收集2019年1月至12月正常足月妊娠未临产择期剖宫产分娩(TNL)、足月妊娠自然临产分娩(TL)的绒毛膜组织各40份,早产临产组(PL)22份,免疫组织化学实现PPARs和PGDH在绒毛膜滋养细胞内的定位,用RT-PCR和Western blot方法检测PPARs的mRNA及蛋白表达,检测同一份样本上PGDH的mRNA和蛋白表达,并统计PPAR各亚型蛋白表达与PGDH蛋白表达的相关性;收集足月妊娠顺产的绒毛膜组织,行绒毛膜滋养细胞培养,给予不同浓度PPARγ的特异性激动剂罗格列酮和拮抗剂GW9662处理细胞,检测PGDH的mRNA和蛋白表达。结果 PPARs和PGDH均在人绒毛膜组织上滋养细胞核表达。TL组PPARγmRNA和蛋白表达均低于TNL组(P<0.05),而两组PPARα、PPARβ的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。PL组PPARγmRNA和蛋白表达均低于TL组(P<0.01);人绒毛膜组织上PPARγ的蛋白表达与PGDH的蛋白表达呈正相关;在离体细胞培养上罗格列酮可剂量依赖性上调PGDH蛋白和mRNA表达,GW9662则可抑制PGDH蛋白和mRNA表达,且表现为剂量依耐性。结论 绒毛膜上PPARγ的表达可能影响绒毛膜局部的前列腺素浓度,PPARγ临产前后的变化可能与分娩启动相关。

前列腺素内过氧化物合酶2基因的研究进展

前列腺素内过氧化物合酶2是前列腺素生物合成的限速酶。本文介绍了前列腺素内过氧化物合酶2基因的结构、表达、调控机理及其与繁殖性能的关系。

缺血性脑卒中神经功能缺损与血小板内皮聚集受体1和前列腺素内过氧化物合酶1基因多态性的关联分析

目的探讨阿司匹林抵抗相关基因血小板内皮聚集受体1(PEAR1)和前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)多态性与缺血性脑卒中神经功能缺损程度的相关性。方法收集2018年10月至2019年12月盐城市第一人民医院收治的缺血性脑卒中病人147例,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为轻症组和中重症组,应用聚合酶链反应(PCR)-荧光法进行PEAR1和PTGS1基因多态性检测,利用多因素回归分析阿司匹林相关基因多态性与缺血性脑卒中神经功能缺损的关系。结果两组病人年龄[(63.7±12.8)岁比(68.6±10.7)岁]、吸烟[18.46%(12/65)比35.37%(29/82)]、糖尿病患病率[24.62%(16/65)比42.68%(35/82)]、空腹血糖[(5.87±1.69)mmol/L比(7.38±3.11)mmol/L]、D-二聚体[0.31(0.19,0.61)mg/L比0.55(0.26,1.12)mg/L]差异有统计学意义(P<0.05);两组病人PEAR1基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),而PTGS1基因型分布差异无统计学意义(P>0.05);通过logistic回归分析发现,年龄(OR:1.047,95%CI:1.023-1.072;P<0.001)、吸烟(OR:2.876,95%CI:1.548-5.343;P=0.001)、空腹血糖(OR:1.390,95%CI:1.193-1.621;P<0.001)、PEAR1基因携带A等位基因(OR:1.786,95%CI:1.028-3.101;P=0.040)与缺血性脑卒中神经功能缺损严重程度相关(P<0.05)。结论缺血性脑卒中神经功能缺损严重程度与年龄、吸烟、空腹血糖、PEAR1基因携带A等位基因有一定的相关性。

15-脱氧前列腺素J_2对脂肪肝大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达的影响

目的观察15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法普通饲料喂养的雄性Wistar大鼠作为正常对照组8只;高脂饲料喂养雄性Wistar大鼠建造NAFLD模型16只,将建模成功的大鼠随机分为模型对照组8只和实验组8只。模型对照组大鼠腹腔注射生理盐水2ml·kg-1·d-1;实验组大鼠腹腔注射15d-PGJ210μg·kg-1·d-1。干预2周后处死各组大鼠,检测各组肝组织匀浆总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察各组大鼠肝组织的病理改变,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织PPAR-γ、TNF-α和IL-6的表达。结果模型对照组肝组织总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平明显高于正常对照组,TC(1.27±0.26)mmol/g vs(0.74±0.18)mmol/g、TG(1.56±0.27)mmol/g vs(1.13±0.39)mmol/g(P<0.01);实验组肝组织TC、TG水平明显低于模型对照组,TC(1.01±0.22)mmol/g vs(1.27±0.26)mmol/g、TG(1.15±0.20)mmol/g vs(1.56±0.27)mmol/g(P<0.05)。光镜下未见正常对照组肝组织病理形态学异常;模型对照组可见大量肝细胞脂肪变性及肝组织多处点状坏死;实验组大鼠肝细胞脂肪变性及点状坏死较模型对照组减轻;正常对照组肝组织PPAR-γ普遍表达而TNF-α和IL-6几乎不表达;实验组肝组织PPAR-γ表达强于模型对照组,而TNF-α和IL-6表达低于模型对照组。结论 15d-PGJ2可以缓解NAFLD大鼠肝细胞脂肪变性和坏死、降低肝组织TC和TG水平,这种效果可能是通过增加肝脏PPARγ和减少TNF-α、IL-6的表达来实现的。

大丽轮枝菌寡糖素诱导的棉花组培细胞的过氧化物酶表达分析

将已在察氏液体培养基中培养 3 d的强毒性 (V44 )或弱毒性 (V 6 4)大丽轮枝菌接种到新鲜的相同培养基中 ,加入棉花黄萎病感病品种 (S)或抗病品种 (R)的悬浮培养细胞 (或其细胞匀浆 )。培养 4d后收获真菌孢子 ,用于致萎力测定 ,收获菌丝体细胞壁用于制备真菌寡糖素 (H,来自 V44或 L,来自 V6 4) ,然后用该寡糖素诱导悬浮培养的棉花细胞 (S或 R)。棉花细胞的过氧化物酶 (POD)同工酶结果表明 :(1)所有寡糖素均诱导棉花细胞产生新的过氧化物酶 ;(2 )感病品种豫棉 6号的活组培细胞 S(或其细胞匀浆 )显著影响真菌 ,用生长过程中接触该活细胞 (或其细胞匀浆 )的真菌所制备的寡糖素再诱导该活细胞 (即 S→ L (H )→ S)时 ,棉花细胞在 36 h的 POD同工酶谱与其对照 ,即 L(H)→ S比较 ,酶带增减变化显著。致萎力测定结果表明感病品种的活细胞提高了病原毒性和致病力 ;(3)耐病 (豫棉 8号 )或抗病品种 (中棉 12号 )的活组培细胞 R(或其细胞匀浆 )对真菌的影响不同于感病品种。 R→ L(H )→ R在 36 h的 POD同工酶谱与 L (H)→ R比 ,酶带没有增减变化。但是在 H→ R或 H→ S中于 9h和 2 4h出现的酶带在 R→ H→ R或 R→ H→ S中分别提前到 6 h和 9h,致萎力测定结果表明抗病品种细胞对病原毒性影响很小。

北京社区人群脂联素和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系

目的:分析中国北京社区人群脂联素基因+45T/G和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因Pro12Ala多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系。方法:自2001年解放军总医院老年医学研究所“对万寿路等社区的流行病学调查”人群中选出无亲缘关系2型糖尿病患者(糖尿病组)195例,非糖尿病对照(非糖尿病组)139例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析两组受试者脂联素+45T/G与过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性各基因型分布频率,用Logistic回归分析了解基因间的交互作用。结果:334例全部进入结果分析。①脂联素+45T/G多态性各基因型分布频率为:糖尿病组,TT52.8%,TG35.4%,GG11.8%;非糖尿病组,TT56.1%,TG41.0%,GG2.9%,糖尿病组GG型明显多于非糖尿病组(P<0.01)。②过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性各基因型分布频率为:糖尿病组PP90.8%,PA9.2%;非糖尿病组PP89.9%,PA9.4%,AA0.7%,两组间各基因型频率分布差异无显著性(P>0.05)。③两位点交互作用组间比较,具有脂联素+45TG+GG型和过氧化物酶增殖物活化受体γ2PA+AA型者患2型糖尿病的风险较高(P<0.05)。结论:脂联素+45T/G多态性与2型糖尿病存在相关性,其纯和突变型GG型罹患率较高;未发现过氧化物酶增殖物活化受体γ2Pro12Ala多态性与2型糖尿病有关;上述两位点存在交互作用,携带脂联素+45G等位基因和过氧化物酶增殖物活化受体γ2Ala12等位基因者易患2型糖尿病。

白细胞介素-10抑制人肾系膜细胞环氧化酶-2表达及其催化的前列腺素E_2释放的实验研究

目的 :观察IL - 1 0对IL - 1 β诱导的人系膜细胞 (HMC)前列腺素E2 (PGE2 )释放及环氧化酶 - 2 (cy clooxygenase - 2 ,COX - 2 )基因和蛋白表达的影响。方法 :应用放射免疫测定法检测HMC培养上清中PGE2 ,应用RT-PCR和Westernblot分别检测COX - 2mRNA和蛋白水平。结果 :①IL - 1 β显著上调PGE2 释放及COX - 2基因和蛋白的表达 (P均 <0 0 1 ) ;②IL - 1 0对基础状态下PGE2 释放及COX - 2基因和蛋白表达无明显影响 (P >0 0 5) ;③IL -1 0可呈剂量依赖性地下调IL - 1 β诱导的PGE2 释放及COX - 2mRNA和蛋白表达 (P <0 0 1 )。结论 :IL - 1 0抑制IL -1 β诱导的HMCPGE2 释放及COX - 2表达 ,提示IL - 1

基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。

前列腺癌组织中E-钙粘蛋白和环氧化酶2表达的研究

目的探讨E-钙粘蛋白、环氧化酶2因子与前列腺癌病理分级及临床分期的关系。方法采用免疫组织化学SABC方法检测32例前列腺癌患者和24例良性前列腺增生标本中E-钙粘蛋白、环氧化酶2的表达。结果两组标本中E-钙粘蛋白在前列腺癌标本中的阳性表达率21.88%,在良性前列腺增生标本中的阳性表达率91.67%;而环氧化酶2在前列腺癌标本中的阳性表达率90.63%,在前列腺增生标本的阳性表达率37.50%。E-钙粘蛋白在高分化前列腺癌中的表达高于低分化前列腺癌;在A期和B期前列腺癌中的表达高于C期和D期的前列腺癌。环氧化酶2在低分化前列腺癌中的表达高于高分化前列腺癌;而在C期和D期的前列腺癌中的表达高于A期和B期前列腺癌。结论E-钙粘蛋白在前列腺癌标本中的表达明显低于前列腺增生标本,环氧化酶2的表达与此相反;两者在前列腺癌的表达与前列腺癌的病理分级及临床分期有关。

环氧合酶-2和前列腺素类物质在子宫内膜异位症的表达研究

目的:研究环氧合酶-2(Cox-2)、6-酮-前列腺素F1α(6-k-PGF1α)和血栓素B2(TXB2)与子宫内膜异位症(EMs)的发生及临床病理因素的关系。方法:采用免疫组织化学SABC法检测45例EMs和30例正常子宫内膜Cox-2蛋白的表达;采用放射免疫法检测组织液6-k-PGF1α和TXB2的含量。结果:Cox-2在腺上皮的胞浆中表达,EMs组Cox-2表达明显高于对照组(P<0.001);EMs的AFS分期、疼痛分级以及瘤体大小之间Cox-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。EMs组TXB2和6-k-PGF1α的含量明显高于对照组(P<0.001);有症状组6-k-PGF1α的含量高于无症状组,差异有统计学意义(P<0.05);TXB2含量两组无差别。Cox-2蛋白的表达与6-k-PGF1α和TXB2的含量相关。结论:Cox-2、6-k-PGF1α及TXB2的高表达可能与EMs的发生相关。6-k-PGF1α可能与痛经相关。

兔肾提取前列腺素E_1合成酶及某些性质的研究

本文报道了用兔肾代替羊精囊提取前列腺素E_1合成酶系进行生物转化前列腺素E_1的研究,并对合成产物红外光谱进行了结构分析,结果表明:兔肾与羊精囊提取的酶系,其转化产物是一致的。

过氧化物酶体增殖活化受体-γ(PPAR-γ)与气道炎症

过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)是一种调节脂类分化和代谢的核激素受体转录翻译因子.通过研究发现PPAR有三种亚型,α、β和γ.

还原型谷胱甘肽联合前列腺素E_1治疗慢性乙型肝炎疗效分析

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)联合前列腺素E1治疗慢性乙型肝炎(慢性乙肝)患者的疗效及对患者体内氧化损伤的影响。方法将我院2007年1月—2009年1月收治的62例慢性乙肝患者随机分为观察组(31例)和对照组(31例),在支持治疗的基础上,对照组给予GSH1200mg加入100ml0.9%氯化钠溶液中静脉滴注,1次/d;观察组在对照组治疗的基础上,给予前列腺素E120μg加入100ml0.9%氯化钠溶液中静脉滴注,1次/d。均治疗4周。比较两组患者治疗后的临床疗效及治疗前后血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平。结果治疗后治疗组显效22例,有效7例,无效2例;对照组显效17例,有效5例,无效9例,两组患者疗效间差异有统计学意义(u=1.99,P<0.05)。治疗前对照组患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平〔分别为(106±18)μU/L、(57.8±23.4)U/L和(9.4±1.3)μmol/L〕与观察组〔分别为(103±13)μU/L、(57.4±21.4)U/L和(9.4±1.3)μmol/L〕比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后对照组患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平〔分别为(173±13)μU/L、(89.4±15.8)U/L和(7.9±3.5)μmol/L〕与观察组〔分别为(199±11)μU/L、(103.2±14.3)U/L和(5.6±2.4)μmol/L〕比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GSH联合前列腺素E1治疗慢性乙肝患者的疗效优于单用GSH治疗者,联合治疗能改善慢性乙肝患者体内的氧化-抗氧化损伤平衡的紊乱。

化学发光免疫分析法检测血清中前列腺特异抗原复合物

采用杂交瘤技术构建抗前列腺特异抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶(Prostate specific antigen-α1-antichymotrypsin complex,PSA-ACT)单克隆抗体(单抗)细胞株,共获得8株稳定分泌PSA-ACT单抗的细胞株,纯化后进行免疫特性鉴定并做单抗配对。选择其中一对单抗,采用辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺(lumino)-H_2O_2化学发光体系,建立了测定人血清中PSA-ACT浓度的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)。对包被缓冲液、包被抗体浓度、酶标抗体稀释度、温育时间、发光反应时间和免疫反应步骤等实验参数进行了优化。在最佳实验条件下,PSA-ACT浓度在5~40 ng/m L范围内线性关系良好(R^2=0.9943),检出限为0.53 ng/m L,批内相对标准偏差(RSD)为4.6%~6.6%,批间RSD为5.7%~8.0%,回收率为95.4%~104.2%,与游离前列腺特异性抗原F-PSA的交叉反应率为0.6%。本方法简单、稳定、灵敏、快速,为开发检测PSA-ACT的CLEIA试剂盒奠定了基础。

前列腺素E_1对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨前列腺素E1 (PGE1 )在脑缺血再灌注损伤中对脑组织过氧化的影响、对脑细胞膜ATP酶的保护、对血浆炎性细胞因子及内皮素的干预作用。方法 采用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉 ,造成局灶性脑缺血再灌注模型 ,用药组于缺血前 5minivgttPGE1 (1 2 ,2 4 ,48μg·kg- 1 ) ,模型组及假手术组给予等容积NS。各组在大脑中动脉阻塞(MCAO) 60min ,再灌注 60min后 ,断头、取脑匀浆 ,测定其丙二醛 (MDA)含量 ,总超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活性及Na+ ,K+ ATP酶 ,Ca2 + ATP酶 ,Mg2 + ATP酶活性。心脏取血分离血浆测定其肿瘤坏死因子 (TNFα)的浓度及白介素 (IL 1 β、IL 6)和血浆内皮素 (ET 1 )的含量。结果 缺血再灌注模型组与假手术组相比 ,MDA含量升高 (P <0 0 5)、SOD及GSH Px活力降低 (P<0 0 5) ,Na+ ,K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶、Mg2 + ATP酶活性降低 (P <0 0 5) ,TNFα、IL 1 β、ET 1含量升高 (P <0 0 5)。PGE1 3剂量组与模型组相比 ,MDA含量降低 (P <0 0 5) ,SOD及GSH Px活力升高 (P <0 0 5) ,Na+ ,K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶、Mg2 + ATP酶活性升高 (P <0 0 5 ) ,Mg2 + ATP酶活性亦升高 ,TNFα、IL 1 β、ET 1含量降低 (P<0 0 5)。结论 PGE1 对缺血再灌注?

反复自然流产绒毛组织中前列腺素F_(2α)和白细胞介素-8的含量及其临床意义

目的 探讨反复自然流产患者绒毛前列腺素F2α(PGF2α)与血清和绒毛中白细胞介素 8(IL 8)的含量及其临床意义。 方法 分别应用放射免疫分析法和酶联免疫吸附法测定 3 0例反复自然流产患者 (病例组 )血清及绒毛组织PGF2α与IL 8的含量 ,以2 0例正常早期妊娠的人工流产孕妇作为对照。 结果 绒毛组织PGF2α含量病例组较对照组明显升高 (P <0 0 5) ;血清及绒毛组织IL 8含量病例组亦较对照组明显升高 (P <0 0 5) ;病例组血清及绒毛组织IL 8与绒毛组织PGF2α含量呈正相关。 结论 PGF2α与IL

前列腺素与结直肠肿瘤

前列腺素(PG)具有广泛的生物学效应,文献报道在某一些肿瘤组织,如乳腺癌、妇科癌瘤、结直肠癌,肺癌及其他癌瘤中PG含量均异常增高.近年来经流行病学,动物实验及体外抗癌作用等研究表明,PG合成抑制剂-阿斯匹林、消炎痛,苏林酸(Sunlindac)等一类非甾体抗炎药(NSA1D)对结直肠肿瘤(CRC)具有治疗和预防作用.本文就近年来PG及其相关代谢物;PG及其合成酶在CRC中的表达;在CRC的发生、发展及转移过程中所起的作用的研究现状;以及NSA1Ds在CRC中的应用前景作一综述.

15-脱氧-前列腺素J_2对单核巨噬细胞中巨噬细胞移动抑制因子表达的影响及作用机制

目的研究15-脱氧-前列腺素J2(15 d-PGJ2)对小鼠单核巨噬细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达的影响及作用机制。方法以小鼠单核巨噬细胞系J774A.1为研究对象,分别给予以下处理:(1)脂多糖(LPS)组:1μg/ml LPS孵育1 h;(2)正常对照组:PBS孵育1 h;(3)阴性对照组:5μmol/L 15 d-PGJ2孵育1 h;(4)15 d-PGJ2组:5μmol/L 15 d-PGJ2预孵育1 h,1μg/ml LPS孵育1 h;(5)GW9662组:10μmol/L GW9662预孵育1 h,5μmol/L 15d-PGJ2孵育1 h,1μg/ml LPS孵育1 h;(6)Vehicle组:即GW9662对照组,使用GW9662的溶剂DMSO替代GW9662。采用免疫荧光和琼脂糖凝胶电泳技术检测小鼠单核巨噬细胞系J774A.1中MIF的表达,RT-q PCR和Western blot技术检测15 d-PGJ2对LPS诱导的J774A.1炎症反应模型中MIF mRNA和蛋白水平变化情况。观察GW9662对15 d-PGJ2调节MIF作用的影响,采用高内涵分析技术检测15 d-PGJ2是否调节巨噬细胞炎症反应时过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的核转位。结果 J774A.1在基因和蛋白水平均表达MIF。LPS组细胞中MIF mRNA表达上调到正常对照组的1.75倍(P=0.037),15 d-PGJ2组细胞中MIF mRNA表达上调被抑制,下调至LPS组的50%(P=0.026),MIF蛋白水平变化情况与mRNA水平相一致。GW9662逆转了15 d-PGJ2对MIF mRNA表达的下调(P=0.016)。高内涵自动成像系统分析结果显示,15 d-PGJ2处理组细胞中PPAR-γ的核质比上调至LPS组的1.39倍(P=0.003)。结论 15 d-PGJ2可抑制单核巨噬细胞中MIF的表达,该作用可能依赖于PPAR-γ。

糖皮质激素对大鼠哮喘模型肺组织环氧化酶基因表达的影响

目的:研究哮喘大鼠模型肺组织中COX-1和COX-2mRNA表达随致敏时间变化的关系以及糖皮质激素对COX-1和COX-2mRNA表达的影响。方法:将90只成年雌性SD大鼠分为卵清蛋白致敏组,激素预处理卵清蛋白致敏组和生理盐水对照组,最后一次卵清蛋白激发后分别于1、3、6、24、48h处死,测量各时段肺组织中COX-1和COX-2mRNA含量。结果:3组大鼠COX-1mRNA表达均不随时间变化,组与组之间表达差异无显著性;卵清蛋白致敏组COX-2mRNA于激发后1h较对照组升高[(56.23±6.78%)%vs(13.65±8.33)%,P<0.05)犦,3h达到高峰[(110.26±13.34)%,P<0.05)犦,以后迅速降到基础水平;激素预处理卵清蛋白激发组和生理盐水对照组COX-2mRNA表达不随时间变化,表达水平无明显差异。结论:在卵清蛋白致敏的哮喘大鼠模型肺组织中COX-2mRNA表达一过性上调,且这种上调可被糖皮质激素所抑制。COX-2可能在哮喘的发病机制中起到了关键作用。