岗松中抗前列腺素E2受体4拮抗剂筛选及其体内抗类风湿性关节炎作用

筛选岗松中抗前列腺素E2受体4(EP4)的拮抗剂和探讨抗类风湿关节炎的作用。体外建立HEK293T-EP4细胞拮抗剂筛选模型,采用均相时间分辨荧光(HTRF)技术筛选岗松活性成分。SPF级别ICR小鼠,雄性,随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组、岗松提取物BF-2(100、50和25 mg/kg)组,体内建立胶原诱导型类风湿性关节炎(CIA)小鼠模型,测量小鼠足趾肿胀体积,苏木精和伊红染色进行病理学检测。小鼠随机分为对照组、岗松提取物BF-2(100、50和25 mg/kg)组和阿司匹林组,采用醋酸诱导扭体试验观察扭体次数。本研究成功建立了EP4体外拮抗剂筛选模型,初筛结果发现岗松提取物BF-2,BF-20,BF-11和BF-12具有较强的EP4拮抗活性[(102.11±3.45)%,(90.31±3.59)%,(75.72±1.79)%和(76.84±1.64)%],其中,BF-2拮抗活性最强(IC50=0.99±0.08μg/mL)。BF-2可以明显抑制CIA小鼠的足趾肿胀,并缓解关节软骨基质降解和炎性细胞浸润。同时,与对照组比较,BF-2各剂量组小鼠的扭体次数均显著减少。筛选得到了一种EP4拮抗剂BF-2,并且具有潜在抗类风湿性关节炎活性。

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

【目的】探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况。【方法】多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-q PCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(m PGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的m RNA表达水平;Westernblot法检测相应蛋白表达水平。【结果】随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P<0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P<0.05)、而m PGES-1、EP1、EP2、EP3 m RNA表达无显著变化(P>0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P<0.05)。【结论】1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展。

视网膜母细胞瘤组织中PTGER4的表达及临床意义

目的探讨前列腺素E2受体4(PTGER4)在视网膜母细胞瘤(Rb)组织中的表达及临床意义。方法收集本院2012年1月至2016年12月病理确诊且临床资料完整的Rb组织67例及同期正常视网膜组织21例,采用实时定量PCR和免疫组化检测PTGER4在上述组织中的表达水平,分析PTGER4表达与Rb临床病理特征(年龄、性别、侧别、IIRC分期、病理分化和视神经浸润)的关系。结果67例Rb组织中的PTGER4 mRNA水平和阳性表达率分别为2.653±1.056和56.7%(38/67),均高于正常视网膜组织的1.027±0.346和28.6%(6/21),差异有统计学意义(P<0.05)。Rb组织中PTGER4表达与年龄、性别和侧别无关,而与IIRC分期、病理分化和视神经浸润有关,其中临床分期较晚、低未分化及视神经浸润对应组织中PTGER4 mRNA水平和阳性表达率均较高(P<0.05)。结论PTGER4在Rb组织中表达升高,且与Rb的临床分期、病理分化及视神经浸润有关,PTGER4可作为判断RB浸润及病情评估的潜在指标。