桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑15-羟基前列腺素脱氢酶活性的影响

目的 :研究桂枝汤对发热和低体温大鼠下丘脑组织内 15 PGDH活性的影响 ,进一步阐明桂枝汤体温双向调节作用机制。方法 :采用核素示踪技术测定酵母性发热和安痛定性低体温大鼠及桂枝汤处理组下丘脑组织内 15 PGDH活性 ,并观察其与体温变化的关系。结果 :皮下注射酵母可降低下丘脑 15 PGDH活性 ,桂枝汤灌胃可剂量依赖性地抑制该变化并促进发热大鼠体温的恢复 ,两者呈正相关 ;而腹腔注射安痛定后 ,随着体温下降 ,15 PGDH活性有升高倾向 ,桂枝汤可抑制该酶活性并加速体温恢复正常 ,但两者呈弱相关。结论 :大鼠下丘脑内 15 PGDH可能参与机体体温调节并可能是桂枝汤解热作用靶点之一 ,但与其抗低体温作用关联不大。

发热大鼠脑组织15-羟基前列腺素脱氢酶活性的时相变化及桂枝汤的影响

目的 :研究发热大鼠下丘脑和其他脑组织 15 PGDH活性的时相变化及桂枝汤的影响。方法 :利用Radio TLC法测定发热大鼠及桂枝汤治疗组脑组织不同时间的 15 PGDH活性。结果 :皮下注射酵母后 ,伴随体温的升高 ,大鼠下丘脑PGDH活性先降低后逐渐恢复 ,桂枝汤可阻止该酶早期的活性降低并升高至正常值以上 ;其他脑组织PGDH活性也有类似变化 ,但桂枝汤可抑制后期的PGDH活性向正常恢复。结论 :下丘脑PGDH活性降低 ,参与了酵母性发热的早期机制 ,升高该部位PGDH活性可能是桂枝汤解热机理之一。

白细胞介素1β刺激脑微血管内皮细胞内15-羟基前列腺素脱氢酶的经时变化

目的:探讨白细胞介素1β(IL1β)刺激体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)15羟基前列腺素脱氢酶(15PGDH)活性的经时变化。方法:建立rCMEC培养方法,进行Ⅷ因子相关抗原鉴定。待细胞长至融合状态后,以30ng/ml浓度的IL1β分别刺激0.5、1、2、4、8、12、24h,以放射免疫法测定各刺激时间点15PGDH活性。结果:90%以上的培养细胞呈阳性,确定为rCMEC。加入IL1β刺激后2h,细胞内15PGDH活性与未刺激组比较有显著性差异(P<0.05);12h时达到最大值;24h时有所降低,但与未刺激组比较仍具显著性差异(P<0.01)。结论:rCMEC经IL1β刺激后,细胞内15PGDH活性经历一个逐渐升高,到达峰值后缓慢下降的过程,IL1β刺激12h内皮细胞15PGDH活性达峰值。

前列腺素脱氢酶在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定

15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH)属于抑癌基因,在多种肿瘤中表达缺失,在肿瘤的发生发展中起着重要作用。提取人正常大肠黏膜组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到PGDH基因的编码序列,克隆入原核表达载体pBV220,测序鉴定正确后转化E.coliDH5α,经温控诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot,证实为相对分子质量约为29000的PGDH-His6蛋白,表达产物以包涵体形式存在,3h诱导表达量最高,约占菌体总蛋白的30%。经Ni2+配体亲和层析纯化得到纯度大于95%的目的蛋白。重组PGDH简单复性后具有一定的生物活性,约为3.7×104U/mg,为下一步研究其在肿瘤中的作用奠定了基础。

15-羟基前列腺素脱氢酶在大肠腺瘤组织中的表达及其意义

目的:探讨15-羟基前列腺素脱氢酶在大肠腺瘤性息肉组织中的表达及其意义。方法:选取外科手术或内镜下取材的大肠管状腺瘤23例、绒毛状腺瘤15例、大肠腺癌10例及正常大肠黏膜组织10例,采用RT-PCR和Western-blot法分别检测各组织中15-PGDH mRNA和蛋白质的表达。结果:15-PGDH mRNA在正常大肠黏膜、管状腺瘤、绒毛状腺瘤及大肠腺癌组织中的相对表达量分别为998.187±86.430、115.403±13.656、9.855±2.297和0.771±0.276,大肠腺癌组与绒毛状腺瘤组之间比较(P=0.055)无统计学意义,余各组之间比较均有统计学意义(P<0.05);15-PGDH蛋白的相对表达量分别为0.798±0.048、0.612±0.040、0.423±0.086和0.191±0.060,正常黏膜组表达最高,分别是管状腺瘤组、绒毛状腺瘤组及腺癌组的1.3、1.9及4.2倍,各组之间比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:15-PGDH表达的降低或缺失与大肠腺瘤性息肉的发生、发展密切相关,可能进一步促使腺瘤向腺癌转化。

15-羟前列腺素脱氢酶在大肠腺瘤和腺癌组织中的表达

目的:探讨15-羟前列腺素脱氢酶(15-PGDH)在腺瘤和腺癌组织中的表达和意义。方法:选取肠镜检查和手术活检组织标本118例,其中正常大肠黏膜30例,大肠腺瘤43例,大肠腺癌组织45例。用Real Time PCR检测15-PGDH mRNA的表达,免疫组织化Elivision法检测组织中15-PGDH的蛋白表达。结果:15-PGDH在大肠腺癌组织中的mRNA的表达、阳性表达率及光密度值均低于大肠腺瘤及正常黏膜组(P<0.05);且大肠腺瘤组低于正常黏膜组(P<0.05)。结论:15-PGDH表达降低或缺失,可能是大肠腺癌发生过程中的重要环节。

15-羟基前列腺素脱氢酶与胃癌发生关系的研究

背景:NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素和相关廿烷类生物降解、灭活的关键酶,其表达缺失或减低可能与一些恶性肿瘤的发生、发展密切相关。目的:探讨15-PGDH在胃癌组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系,初步评价15-PGDH在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法:随机收集30例胃癌患者的癌组织、癌旁3cm和6cm的对照组织,以及10例胃息肉、萎缩性胃炎和健康志愿者正常胃黏膜组织标本,以免疫组化和Westernblot法检测15-PGDH蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其mRNA表达,并分析其临床病理特征。结果:癌组织中15-PGDH蛋白和mRNA表达显著低于癌旁3cm、癌旁6cm对照组织和正常胃黏膜(P均<0.01),约1/3癌组织中15-PGDH表达缺失,胃息肉和萎缩性胃炎组织显著低于正常胃黏膜(P均<0.01);癌组织中15-PGDH蛋白表达量较癌旁3cm和6cm对照组织分别平均降低5.7倍和8.3倍,胃息肉和萎缩性胃炎组织较正常胃组织分别平均降低2.0倍和2.1倍;黏液腺癌中15-PGDH蛋白量显著低于高分化腺癌(P<0.05),印戒细胞癌中15-PGDH蛋白和mRNA的表达均缺失;伴有远处转移组15-PGDH蛋白和mRNA表达显著低于无远处转移组(P<0.05和P<0.01);Ⅳ期胃癌组织15-PGDH蛋白表达量显著低于Ⅰ期(P<0.01),其mRNA表达在Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织中显著低于Ⅰ、Ⅱ期胃癌(P均<0.01)。结论:15-PGDH在胃癌组织中表达减少甚至缺失,在癌旁组织和胃癌前状态中表达减少;15-PGDH表达缺失或减少可能是胃癌发生、发展,以及胃癌浸润转移的重要机制之一。

15-羟基前列腺素脱氢酶基因转染对人胃癌细胞生长和迁移的影响

目的:探讨含有NAD+依赖性l5-羟基前列腺素脱氢酶(NAD+-dependent 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)的真核表达质粒(pcDNA3/15-PGDH)转染对人胃癌细胞生长和迁移的影响。方法:Real time PCR检测多种胃癌细胞株中15-PGDH的表达情况。双酶切方法鉴定15-PGDH真核表达质粒pcDNA3/15-PGDH后,应用Lipofectamine 2000将其转染入胃癌细胞SGC7901中。MTT法检测质粒转染对胃癌细胞增殖的影响,划痕实验观察质粒转染对胃癌细胞迁移的影响,软琼脂克隆形成实验观察质粒转染对胃癌细胞克隆形成的影响。结果:SGC7901细胞中15-PGDH表达显著偏低。pcDNA3/15-PGDH质粒转染入SGC7901细胞的效率较高,转染后24 h及48 h时pcDNA3/15-PGDH组的15-PGDH mRNA表达量分别是pcDNA3空质粒组的188倍和271倍。pcDNA3/15-PGDH质粒转染后SGC7901细胞增殖、迁移和克隆形成能力均显著低于空质粒组和未转染组(P<0.05)。结论:15-PGDH基因转染可显著抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖、迁移和克隆形成能力,推测15-PGDH可能是抑制胃癌发生、发展的重要因素之一。

15-羟基前列腺素脱氢酶与胃肠道恶性肿瘤的研究进展

NAD+依赖的15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素降解的关键酶,对环氧合酶-2(COX- 2)有天然的拮抗作用。近年来发现,15-PGDH表达减少、活性减低与胃肠道及其他系统肿瘤的发生发展有密切关系,15-PGDH可以作为肿瘤预防和治疗的新靶点。

15-羟基前列腺素脱氢酶在胃癌中的研究进展

15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是降解前列腺素(PG)的关键酶,与某些人类肿瘤发生、发展密切相关,其表达减少可促进肿瘤侵袭和转移。近来研究显示,胃癌患者存在15-PGDH基因或蛋白表达减少,上调15-PGDH的表达有望为治疗胃癌提供一种新方法。本文就15-PGDH在胃癌中的研究进展作一综述。

15-羟基前列腺素脱氢酶与大肠癌

15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是降解前列腺素的关键酶,与环氧合酶-2共同调节体内前列腺素的浓度。近年来研究发现,15-PGDH受到表皮生长因子的调控,并且15-PGDH表达减少或缺失与大肠肿瘤的发生发展密切相关。

苦参碱对膀胱癌模型大鼠前列腺素脱氢酶、血管内皮生长因子以及细胞膜磷脂酶A2的影响

目的研究苦参碱对膀胱癌模型大鼠前列腺素脱氢酶(prostaglandin dehydrogenase,PGDH)、血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)以及细胞膜磷脂酶A2(cytosolic phospholipasesA2,cPLA2)相对蛋白表达量的影响。方法选将60只大鼠采用随机数字表法分为模型组、实验组和空白组,每组各20只。模型组、实验组两组大鼠采取灌胃的形式服用致癌剂N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝基胺,剂量200 mg/mL每只,连续灌胃8周。实验组大鼠给予苦参碱灌胃治疗,空白组和实验组两组大鼠给予等体积的生理盐水,灌胃,1 d/次,连续治疗35周。对所有大鼠进行肿瘤细胞凋亡指数观察,并对各组大鼠VEGF、cPLA2、PGDH相对蛋白表达量进行检测。对p16INK4a与CyclinD1及CDK4表达水平关系进行研究。结果空白组和实验组PGDH表达水平显著高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组VEGF水平显著高于实验组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组cPLA2水平显著高于实验组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05);空白组大鼠肿瘤细胞凋亡指数明显低于实验组和模型组,差异有统计学意义(P<0.05),实验组大鼠肿瘤细胞凋亡指数高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肿瘤细胞增殖指数高于实验组和空白组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05);空白组大鼠p16INK4a蛋白表达水平明显高于实验组和模型组。3组实验数据比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参碱对大鼠膀胱癌有抑制生长的作用,可能作用机制是通过抑制前列腺素通路相关蛋白cPLA2、PGDH蛋白表达,有助于p16INK4a蛋白表达上调。

过氧化物酶体增殖物激活受体对人绒毛膜前列腺素代谢酶的调节

目的 探索不同妊娠状态人绒毛膜上过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)各亚型的基因和蛋白表达差异及其与前列腺素代谢酶15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH)蛋白表达的相关性,进一步浅探PPARs对PGDH可能的调节机制和在分娩启动中可能发挥的作用。方法 收集2019年1月至12月正常足月妊娠未临产择期剖宫产分娩(TNL)、足月妊娠自然临产分娩(TL)的绒毛膜组织各40份,早产临产组(PL)22份,免疫组织化学实现PPARs和PGDH在绒毛膜滋养细胞内的定位,用RT-PCR和Western blot方法检测PPARs的mRNA及蛋白表达,检测同一份样本上PGDH的mRNA和蛋白表达,并统计PPAR各亚型蛋白表达与PGDH蛋白表达的相关性;收集足月妊娠顺产的绒毛膜组织,行绒毛膜滋养细胞培养,给予不同浓度PPARγ的特异性激动剂罗格列酮和拮抗剂GW9662处理细胞,检测PGDH的mRNA和蛋白表达。结果 PPARs和PGDH均在人绒毛膜组织上滋养细胞核表达。TL组PPARγmRNA和蛋白表达均低于TNL组(P<0.05),而两组PPARα、PPARβ的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。PL组PPARγmRNA和蛋白表达均低于TL组(P<0.01);人绒毛膜组织上PPARγ的蛋白表达与PGDH的蛋白表达呈正相关;在离体细胞培养上罗格列酮可剂量依赖性上调PGDH蛋白和mRNA表达,GW9662则可抑制PGDH蛋白和mRNA表达,且表现为剂量依耐性。结论 绒毛膜上PPARγ的表达可能影响绒毛膜局部的前列腺素浓度,PPARγ临产前后的变化可能与分娩启动相关。

幽门螺杆菌对胃癌环氧合酶-2和15-羟基前列腺素脱氢酶表达的影响

15-羟基前列腺素脱氢酶（15-hydroxyprostaglandin，15-PGDH）在健康人和哺乳动物的胃肠道组织中高水平表达，其对多种恶性肿瘤的发生、浸润和转移具抑制作用。环氧合酶-2是天然的15-PGDH拮抗剂，与胃癌等多种恶性肿瘤的发生相关。H．pylori感染与胃癌的发生密切相关。本研究通过测定胃癌患者环氧合酶-2和15-PGDH的表达情况，拟探讨H．pylori感染在胃癌发生、发展中的作用。

环氧合酶2及前列腺素15-羟基脱氢酶在早产患者胎盘及胎膜组织中的表达

目的探讨环氧合酶2(COX-2)、前列腺素15-羟基脱氢酶(15-PGDH)在胎盘和胎膜组织中的表达变化及其与早产发生的关系。方法采用免疫组化二步法,测定14例早产产妇(早产组)、18例足月临产产妇(足月临产组)、17例足月未临产产妇(对照组)的胎盘和胎膜组织中COX-2与15-PGDH的定位与表达水平(以阳性百分数计分和细胞染色计分相加表示)。结果(1)COX-2在3组产妇的羊膜上皮细胞、绒毛膜细胞和蜕膜细胞的胞质中均有表达。COX-2在早产组胎膜和胎盘组织羊膜上皮细胞中的表达水平分别为(4·6±1·2)、(4·7±0·9)分,在足月临产组分别为(3·2±1·0)、(3·6±1·0)分,在对照组分别为(2·2±0·6)、(2·5±0·9)分。早产组及足月临产组明显高于对照组,两两比较,差异均有统计学意义(P<0·01);早产组与足月临产组比较,差异也有统计学意义(P<0·01)。3组间胎膜羊膜上皮细胞与胎盘羊膜上皮细胞中的COX-2表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P>0·05)。(2)COX-2在早产组胎盘绒毛膜细胞中的表达水平为(4·9±1·0)分,在足月临产组为(3·9±1·2)分,在对照组为(2·3±0·7)分,早产组及足月临产组明显高于对照组,两两比较,差异均有统计学意义(P<0·01);早产组与足月临产组比较,差异也有统计学意义(P<0·01)。而3组胎膜绒毛膜组织中COX-2表达水平比较,差异无统计学意义(P>0·05);在3组胎盘蜕膜细胞中的表达水平比较,差异也无统计学意义(P>0·05)。(3)15-PGDH在3组产妇羊膜上皮细胞、绒毛膜细胞和蜕膜细胞的胞质中均有表达,3组胎膜及胎盘组织的羊膜上皮细胞中15-PGDH表达水平比较,差异无统计学意义(P>0·05);而在胎膜及胎盘组织的绒毛膜细胞中表达水平,早产组分别为(1·5±0·6)、(2·3±0·8)分,足月临产组分别为(2·6±0·8)、(3·0±0·7)分,对照组分别为(4·4±1·1)、(4·1±1·2)分,早产组及足月临产组明显低于对照组,两者比较,差异有统计学意义(P<0·01);早产组与足月临产组比较,差异也有统计学意义(P<0·05)。在胎盘组织蜕膜细胞中的表达水平,早产组为(2·1±0·7)分,足月临产组为(2·8±0·8)分,对照组为(4·5±1·0)分,早产组及足月临产组明显低于对照组,两者比较,差异有统计学意义(P<0·01);早产组与足月临产组比较,差异也有统计学意义(P<0·05)。结论COX-2在羊膜上皮细胞中的高表达和15-PGDH在绒毛膜、蜕膜细胞中的低表达,与早产的分娩发动有关。二者在早产的发生中起一定作用。

慢性鼻窦炎伴鼻息肉中15-羟基前列腺素脱氢酶的表达及其调控机制研究

目的:研究伴鼻息肉的慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis with nasalpolyps,CRSwNP)患者鼻息肉中15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,HPGD)的表达水平及其调控机制。方法:应用免疫荧光观察鼻息肉组织中HPGD表达的细胞类型,应用Western-Blot对鼻息肉组织中HPGD表达进行半定量分析。观察人源重组高迁移率家族蛋白1(highmobility group box-1,HMGB1)对人原代鼻黏膜上皮细胞中HPGD表达的作用,并利用晚期糖基化终末产物受体(receptor for advancedglycation end products,RAGE)中和抗体观察能否阻断HMGB1对HPGD的诱导作用。结果:各型CRSwNP患者中的HPGD表达水平增高,且定位于CD68阳性细胞及上皮细胞。人源重组HMGB1可刺激人原代鼻黏膜上皮细胞中HPGD表达增高,且呈时间依赖性,同时在12h可观察到MEK的磷酸化水平增高及RAGE表达增高,但在24hMEK磷酸化水平及RAGE表达趋于正常。利用RAGE中和抗体可部分阻断人源重组HMGB1对人原代鼻黏膜上皮细胞中HPGD的诱导作用。结论:CRSwNP中HPGD表达增高,且主要定位于巨噬细胞及上皮细胞。HMGB1通过RAGE-MEK信号通路调控HPGD表达,这可能为今后调控CRSwNP中PGE2水平提供了一个新的靶点。

15-羟基前列腺素脱氢酶抗肿瘤作用的分子机制研究

15-羟基前列腺素脱氢酶是前列腺素生物降解的重要限速酶,多项研究显示其与体内多种肿瘤发生发展关系非常密切,其表达量减低促进肿瘤的发生发展、浸润、转移及肿瘤血管形成。文章就15-羟基前列腺素脱氢酶抗肿瘤的分子机制作一综述。

NAD＋依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶的表达及对毛囊内前列腺素活性的影响

促进毛发生长的前列腺素（PGs）已成为雄激素脱发领域中的关注焦点。已有报道，人和鼠皮肤内两种最典型的前列腺素PGF2a和PGE2对小鼠模型毛发的生长和毛囊黑素生成起着促进作用，同时，鼠毛发生长与人毛发生长之间有显著关联。最近有报道指出，人毛囊内存在复杂的前列腺素网络，包括PGE2和PGF缸合成路径及受体的表达。PGE2和PGF缸属是花生四烯酸衍生的脂质信号中介，属于视紫质7次跨膜领域超家族，是经特异膜G蛋白结合受体（GPCR）的自分泌和旁分泌激素。

近年来日本对中药与人体生化酶类作用的研究进展（2）

现概述对消化酶和前列腺素脱氢酶的作用。