从护理角度提高检验质量的分析前变异控制

检验结果的质量保证可分为分析前、分析中、分析后三个阶段.随着检验自动分析仪器的应用,分析中、分析后的质量控制不断提高,分析变异相对减小,从而使患者准备和标本收集所引起的分析前变异显得尤为常见和突出,而且由此引起的误差常常难以发现和更正[1].本文就从护理角度度对常见的分析前变异的原因分析如下,以便于临床借鉴并引为重视.

探讨标记物分析前变异在产前筛查质量控制中的影响

目的探讨分析前变异在产前筛查中对测定结果的影响,建立标准的分析前质量管理程序。方法检测不同采血管的类型、处理温度和时间条件下血清甲胎蛋白(AFP)和游离β-人绒毛膜促性腺激素(freeβ-HCG)值,利用方差分析和t检验计算分析前变异。结果与真空促凝管相比,2～8℃条件下放置7 d的分离胶管样本,AFP的测定值差异有统计学意义(P<0.05),不同温度和延长水浴时间分离血清检测freeβ-HCG值差异有统计学意义(P<0.05)。结论分析前变异会影响AFP和freeβ-HCG的测定结果,采用分离胶管执行样本条码化测定可降低分析前处理的不合格率和差错率。

血小板颗粒释放机制及其对标本检验前变异影响研究进展

血小板释放是指活化的血小板以分泌的形式释放其颗粒(α颗粒、致密颗粒和溶酶体颗粒)及内容物进入血浆的过程。近20年来,抗血小板药物的开发推动了血小板释放机制及其对临床标本检验前变异影响的研究。在体外,血小板释放与标本检验前变异紧密相关,因储血容器的材质及内部添加剂、剪切力、保存温度等因素可导致血小板形态改变、活化、功能障碍,从而影响其释放颗粒及内容物并导致标本检验前变异,最终影响检验结果。因此,有必要了解血小板释放对标本检验前变异的影响,提高检验结果的准确性。

临床生化检验9项的分析前变异和个体内生物学变异

目的分析临床生化检验9项的分析前变异和个体内生物学变异。方法选取2018年1月-2019年2月山西卫生健康职业学院搜集的15名健康体检人群的一般资料,并抽取血样;再抽取每1名志愿者的另外2份血样(按照规定处理样品用于生物学变异试验)。采用常规方法检测健康人群者的9项临床生化检验项目,建立4种酶参考区间。结果不同性别人群的4种酶参考区间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论9项临床生化检验项目的分析前变异和个体内生物学变异存在差异,在检验结果临床应用过程中可发挥检验质量控制作用。

分析前变异对化学发光分析法检测心肌肌钙蛋白I结果的影响

目的评估化学发光分析法检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)的分析前变异。方法收集124例确诊为AMI急诊入院患者和500例健康者的血清和血浆样本,评估迈瑞CL-2000i化学发光免疫分析系统检测cTnI项目的分析前变异,包括样本血清、血浆类型的影响,内源性干扰因素如溶血、脂血、黄疸的影响以及样本孵育时间的影响。结果在分析前变异分析中,血清与血浆的对比检测显示,0时和24时患者的cTnI值,肝素抗凝血浆和EDTA抗凝血浆均较血清检测的浓度减低,但是24时患者的cTnI值减低得更多。在溶血干扰检测中,Hb浓度>6g/L时,对低值cTnI的干扰偏差在>10%,Hb浓度10g/L时,对高值cTnI的干扰偏差>10%,溶血对低值cTnI样本的检测影响都高于对高值cTnI样本检测的影响,且溶血随着Hb浓度增加,对cTnI浓度测定的影响偏差就越大。在脂血干扰检测中,当血液中三酯甘油>1 200mg/dL时,对低值cTnI样本的干扰偏差>10%;当三酯甘油≥1 600mg/dL时,对高值cTnI样本的干扰偏差>10%。在胆红素干扰检测中,当血液中胆红素浓度<16mg/dL时,干扰偏差对低、高cTnI浓度样本无明显干扰;当胆红素>24 mg/dL时,对低、高值cTnI的干扰偏差均>10%。在样本孵育时间影响检测中,AMI患者和健康者多孵育20min的样本相较于孵育时间少的样本假阳性率低。结论样本血清,血浆类型,内源性干扰因素如溶血、脂血、黄疸以及样本孵育时间对cTnI的检测均有影响,在临床实验室中应认知并尽量减少。

19项临床生化检验项目的分析前变异和个体内生物学变异

目的 调查19项临床生化项目的分析前变异和个体内生物学变异.方法 募集21名健康成年志愿者,自每名志愿者连续抽取10份血样,用于分析前变异试验,抽血和样品处理考虑左右臂、止血带使用、采血管品牌和类型、离心前后贮存等因素;再自每名志愿者抽取另外3份血样,每份间隔1周,按规定进行样品处理,用于生物学变异试验;用常规方法检测各样品的19项生化项目,利用方差分析原理计算分析前变异和个体内生物学变异.结果 由各种分析前处理造成的系统变异总体小于样品随机变异,样品随机变异是分析前变异的主要分量;Cl、Na、Ca分析前变异较小（GV值＜1%）,其他检验项目CV值为1%～7%不等;不同检验项目生物学变异不同,平均生物学变异Cl、Na、Ca较小（CV值＜2%）,TB、TG、ALT、CK较大（CV值＞20%）,其余检验项目介于两者之间,与国外数据库数据接近;个体内生物学变异存在较大个体差异.结论 本研究得出19项常见生化检验项目在我国实验室情况下的分析前变异和基于国人的个体内生物学变异,研究结果可望在检验结果临床应用和临床检验质量控制中发挥作用.

e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究

目的 研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法 采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８ 例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果 急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别 为６６．７％（４／６）、０（０／６）；亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）；慢性重肝 ２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）；慢性肝炎 ４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１），Ａ１８９６变异率无显 著差异（Ｐ>０．０５）。结论 提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有 关还不能确定。

慢性乙型重型肝炎患者前C区变异株检测及对预后的影响

目的探讨慢性乙型重型肝炎患者HBV前C区变异与机体CD4/CD8比值及预后的影响。方法采用msPCR法检测53例HBV DNA阳性的慢性重型肝炎患者血清HBV前C1896变异,流式细胞仪检测T细胞亚群改变。结果53例重型肝炎患者HBV前C区变异的检出率为71.7%,以HBeAg(-)/HBeAb(+)组为最高,与其他两组之间差异有显著性(P<0.01)。变异株组CD4水平高于野生株组及正常对照组(P<0.01),而CD8低于野生株组及正常对照组(P<0.01),患者病死率高。结论变异株的检出主要集中在HBeAg(-)/HBeAb(+)患者中,随病情加重检出率也增高。HBV变异株组比野生株组有更高的病死率。

基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株

目的建立一种HBV复杂前C区变异株精确定量的检测系统。方法分两步实时PCR完成检测。首先应用野生株阻断探针(WT-blocker probe)进行选择性抑制野生株病毒的扩增,而含量偏低的变异株病毒得以扩增约10000倍,使其在后续反应中易于检出;第二步应用单标记探针(Simple Probe)结合熔解曲线分析系统精确定量检测前C区G1896A、G1899A、G1896A/G1899A变异株。通过PBPPO(primer-blocker-probe partial-overlap)设计减少基因多态性对检测的影响,来提高检测精确度。检验结果经直接测序及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法予以证实。结果 4种标准质粒(G1896/G1899、G1896A、G1899A、G1896A/G1899A)能够很好地被检出并予以区分,突变检测灵敏度达到0.01%;10例HBeAg阳性(直接测序法鉴定前C区变异阴性)患者血清标本中,每例至少1种前C区变异株被检出。结论单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析能够早期灵敏检测前C区变异株,前C区变异株进化过程及机制还需进一步大样本、纵向队列研究予以阐明。

干扰素与胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效观察

目的 了解干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效。方法 6 3例患者随机分为A、B两组。A组用干扰素α 2b 3 0× 10 6U ,肌注 ,每日 1次 ,14d后改隔日 1次至 6个月 ,胸腺肽 40～ 5 0mg ,静滴 ,每日 1次 ,1～ 2月后改肌注或口服至 3个月。B组单用干扰素α 2b ,方法同A组。比较两组血清HBVDNA、HBsAg阴转率和ALT复常率。结果 A、B两组治疗结束时HBVDNA阴转率分别为 45 16 %和 43 75 % (P >0 0 5 ) ,9个月后分别为77 42 %和 5 3 13 % (P <0 0 5 ) ,远期疗效联合治疗组优于单用干扰素组。两组治疗结束时均无HBsAg阴转者。ALT复常率A组为 48 39% ,B组为 5 0 % ,两组差异无显著性。结论 干扰素α 2b联合胸腺肽治疗乙型肝炎病毒前C区变异株感染远期疗效优于单用干扰素组 ,但疗效仍不够理想。

乙型肝炎病毒前C区基因变异与肝纤维化的关系

为探讨乙型肝炎病毒前c区基因变异与肝纤维化程度的关系,利用错配聚合酶链反应——限制性片段长度多态性分析检测乙型肝炎病毒前C区1896位点突变,同时联合检测乙型肝炎患者血清透明质酸、层粘连素、Ⅳ型胶原水平,结果183例乙型肝炎患者检出前C区变异85例,急性乙型肝炎无变异,各类慢性乙型肝炎变异率(分别为51.5％、52.8％、57.1％、59.3％、54.8％)尤显著性差异(P>0.05)。而完全变异和变异株优势 变异者慢性乙型肝炎重度和慢性重型肝炎患者明显高于慢性乙型肝炎轻度患者(均P<0.05)。完全变异和变异株优势变异者肝纤维化3项血清学指标明显高于野生株者(均P<0.01)。提示慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前C区基因变异普遍存在,且变异程度与病情和肝纤维化程度有关。

探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒相关的进展性肝病的关系

目的探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒(HBV)相关的进展性肝病的关系。方法选择172例HBV感染者,采用PCR-RFLP进行A1896变异的检测,并对其临床意义进行分析。结果172例患者A1896变异的总体检出率为45.9%。在A1896变异株和野生株中,慢性无症状携带者(ASC)、慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、慢性重型肝炎(CSH)、肝细胞癌(HCC)的构成比差异有统计学意义(P<0.05)。CHB、LC、CSH、HCC的A1896变异率分别为39.7%、52.0%、50.0%、74.1%,显著高于ASC的12.5%(P<0.05)。进展性肝病(包括CSH、LC、HCC)的A1896变异率为59.0%,显著高于CHB的39.7%(P<0.05)。慢性乙型肝病不同临床类型的A1896的野生株、变异株构成比差异无统计学意义(P>0.05)。HBeAb阳性组的A1896变异率为73.2%,显著高于HBeAg阳性组的28.1%(P<0.05)。A1896野生株HBeAg阳性率显著高于变异株(45.2%vs 19.0%,P<0.05)。变异株HBV-DNA复制的均数水平显著高于野生株[(9.55±4.65)lg copies.L-1vs(10.35±4.49)lg copies.L-1,P<0.01]。结论A1896变异与HBV相关的进展性肝病有关,但与CHB的炎症活动程度无关。A1896变异株的HBeAg阴性率和HBV-DNA病毒载量较野生株高,前者使HBV易逃避免疫清除,后者引起疾病逐步进展。

乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前C区变异及干扰素抗体对干扰素治疗的影响

目的 探讨干扰素治疗与乙型肝炎病毒 (HBV )前C区变异 (1896位点G→A点变异 )及干扰素抗体的关系。方法 分别以PCR及ELISA方法检测 86例慢性HBV感染患者血清中HBV前C区变异株及干扰素抗体。结果 ALT >10 0IU/L组变异株检出率 (40 .4% )显著高于ALT≤ 10 0IU /L组 (8.8% ) ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;CHB重度组检出率明显高于慢性携带者及CHB轻度组 (P <0 .0 0 5 ) ;3 8例CHB接受干扰素治疗 ,变异株组和野生株组对干扰素近期应答率相似 ,但变异株组复发率 (70 .0 % )显著高于野生株组 (2 3 .1% ) ;干扰素抗体阳性组的近期应答率 (3 8.5 % )显著低于阴性组 (72 .0 % )。结论 变异株感染与肝病严重程度有关 ,HBV前C区变异和干扰素抗体可影响干扰素的抗病毒疗效。

乙型肝炎病毒前C基因变异及其临床意义

HBeAg阴性、抗-HBe阳性可由前C变异造成,也可由其他原因造成。HBeAg阳性患者也有前C变异。干扰素和拉米夫定治疗前C变异株感染是有效的,但缺乏持久疗效。前C变异与暴发型肝炎有关,能增加患肝硬化和肝癌的危险性。

乙肝病毒前C区变异与血T细胞亚群及TNF-a相关性

目的:探讨慢性乙型病毒性肝炎(以下简称慢性乙肝)前C区变异与宿主免疫之间关系。方法:采用msPCR法检测102例慢性乙肝患者血清乙肝病毒前C区(HBVpreC)变异,并用APAAP法检测T细胞亚群改变,用双抗体夹心ELISa法检测血清TNF-a水平。结果:在102例HBV-DNA阳性慢性乙肝(CHB)患者中HBVpreC1896变异检出率达64%(65/102)。变异株组及野生株组外周血CD4、CD4/CD8比值明显下降,而CD8明显增高,与正常对照组比较差异均有显著性意义(P<0.01)。变异株组CD4、CD4/CD8比值显著低于野生株组(P<0.05),而CD8显著高于野生株组(P<0.01)。变异株组TNFa水平均显著高于野生株组(P<0.01),两组水平均显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:变异株组较野生株组存在更为严重的免疫紊乱,并通过多种途经激活宿主免疫,导致严重肝损伤。