睾丸Clock基因下调后小鼠精子前向运动百分率降低的机制

目的通过对睾丸精子超微结构的观察和实验室前期数据的生物信息学再分析,探讨睾丸Clock基因下调使小鼠精子前向运动百分率降低的机制。方法选取SPF级ICR雄性小鼠(8周龄)14只,随机分为实验组和对照组,每组6只,另2只小鼠作为免疫共沉淀实验样本。获取小鼠Clock基因下调的睾丸组织,透射电镜观察其中精子的超微结构。结合对实验室前期数据再分析的结果,ELISA检测睾丸组织中α-KGDH的活性,并以RT-qPCR检测睾丸中二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)的转录组水平。最后在野生型小鼠睾丸组织中验证CLOCK蛋白与DLD蛋白的相互作用关系。结果与对照组相比,实验组Clock基因的表达显著降低(P<0.001);实验组睾丸中精子细胞线粒体形态和排列出现异常;差异蛋白的GO和KEGG富集分析提示,实验组精子线粒体中三羧酸循环限速酶α-KGDH的亚基构成蛋白之一的DLD明显下调(P<0.05);与对照组相比,实验组睾丸α-酮戊二酸脱氢酶复合体(α-KGDH)酶活性明显降低(P<0.05);与对照组相比,实验组睾丸Dld基因mRNA水平也明显下调(P<0.05);而野生型小鼠睾丸中CLOCK蛋白与DLD蛋白能够相互作用。结论睾丸Clock基因的下调可导致小鼠精子线粒体结构和功能蛋白发生改变,从而限制了线粒体能量的产出,最终导致精子前向运动百分率降低。

精浆肉碱测定在男性生育力评估和弱精子症疗效监测中的应用

目的比较正常男性与弱精子症男性精浆中肉碱含量,评估精浆肉碱水平与前向运动精子百分率(PR)之间的一致性,并外源性补充肉碱对弱精子症患者的影响。方法收集511例正常可育男性及弱精子症患者精液样本,采用精浆肉碱检测试剂盒(固定时间法)测定精浆肉碱,比较两组水平差异及与PR的一致性。另选77例弱精子症患者给予左卡尼汀(1 g/次,3次/日,30日/疗程)治疗,监测服药前后精浆肉碱及PR变化。结果弱精子症患者组精浆肉碱含量[(194.34±65.41)μmol/L]显著低于正常可育男性组[(405.43±72.12)μmol/L](P<0.01);以精浆肉碱≥325μmol/L为阈值,Kappa值为0.81,诊断符合率达93.74%;给予左卡尼汀治疗后,弱精子症组精浆肉碱浓度[(356.03±84.87)μmol/L]较之前[(183.61±79.54)μmol/L]明显上升,PR[(32.69±8.35)%]较之前[(16.56±7.74)%]显著升高(P均<0.01)。结论精浆肉碱检测试剂盒能准确高效检测大量临床样本,可用于弱精子症诊断及疗效评估。外源性补充肉碱可提高弱精子症患者精浆肉碱水平和精子活力,有助于改善其生育能力。

复合左旋肉碱对少弱精子症的改善作用及其对IVF/ICSI-ET结局的影响

近年来,人类辅助生殖技术（assisted reproductive technology,ATR）的发展取得了较大的进步,体外受精-胚胎移植（invitro fertilization and embryo transfer,IVE-ET）和卵细胞胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）技术能有效解决男女多种原因所造成的不育[1]。

益肾通络督脉灸对特发性弱精子不育症患者精子质量的影响

目的:观察益肾通络督脉灸对特发性弱精子不育症患者精子质量及功能的影响。方法:将120例特发性弱精子不育症患者,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组60例。研究期间,对照组病例脱落、失访4例,完成56例;治疗组病例失访、脱落2例,完成58例。对照组给予右归胶囊口服治疗,治疗组在对照组治疗的基础上给予益肾通络督脉灸治疗。记录治疗前后前向运动精子百分率(percentage of forward motile sperm,PR)、精子总活力[PR+非前向运动精子百分率]、精子直线运动速度、精子DNA碎片指数(sperm DNA fragmentation index,DFI)。结果:治疗组有效率为89.66%,对照组有效率为71.43%,治疗组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后PR、精子总活力、精子直线运动速度、DFI均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾通络督脉灸治疗特发性弱精子不育症,可明显改善前向运动精子百分率、精子总活力、精子直线运动速度、精子DNA碎片指数。

两种冷冻保护剂对人精子冷冻复苏后活动能力的影响

目的探讨两种不同的精子冷冻保护剂TYB和HSPM对人精子复苏后前向运动百分率(a+b)%的影响。方法 25例禁欲2～7 d的健康男性精液同时采用两种冷冻保护剂进行冷冻,比较复苏后精子的前向运动百分率。结果冷冻前精子的前向运动百分率平均为(58.4±6.2)%,TYB和HSPM冷冻保护后复苏精子的前向运动百分率平均分别为(45.2±5.2)%和(42.5±4.6)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TYB和HSPM对冷冻后复苏精子的前向运动无影响。

冷冻保护剂与精液比例对冷冻复苏后精子活动力的影响

目的:比较冷冻保护剂与精浆的不同比例对人类精子冷冻复苏后活动力的影响。方法:将57例志愿者的精液标本分别采用冷冻保护剂∶精液=1∶1和冷冻保护剂∶精液=1∶3的体积比进行冷冻,比较精子复苏后的前向活动率和总活动率。结果:冷冻前的前向运动精子百分率和总活动率分别为(58.60±5.57)%和(66.17±5.24)%。采用冷冻保护剂∶精液=1∶1比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(40.53±8.97)%和(51.23±9.30)%;采用冷冻保护剂∶精液=1∶3比例进行冷冻复苏后的前向运动精子百分率和总活动率分别为(44.70±8.67)%和(51.50±7.40)%。冷冻前后精子的前向运动百分率和总活动率差异有显著性(P<0.05)。两种不同比例的保护剂相比冷冻后前向运动精子百分率差异有显著性(P<0.05),而总活动率差异没有统计学意义。结论:冷冻对精子活动力损伤明显,冷冻保护剂∶精液=1∶3比例较冷冻保护剂∶精液=1∶1比例可提高冷冻后前向运动精子百分率。

精子-宫颈黏液穿透功能与精液常规分析参数和精子DNA碎片指数的相关性分析

目的探讨精子-宫颈黏液穿透功能与精液常规分析参数、精子形态、精子DNA碎片指数的相关性。方法回顾性分析2020年2月至2021年3月在广东省生殖科学研究所门诊进行生育力评估的130名男性,依据精子-宫颈黏液穿透实验结果差、中、好不同等级分别分为A、B、C组,对每组研究对象的精液pH值、精液量、精子浓度、前向运动精子百分率、总精子数、正常形态精子百分率和精子DNA碎片指数等结果进行统计分析。结果单因素方差分析提示A、B、C组之间精子浓度(F=10.04,P<0.05)、前向运动精子百分率(F=58.12,P<0.05)、总精子数(F=9.99,P<0.05)、正常形态精子百分率(F=9.18,P<0.05)和精子DNA碎片指数(F=14.21,P<0.05)差异有统计学意义。结论精子-宫颈黏液穿透功能受精子浓度、精子活力、总精子数、正常形态精子百分率和精子DNA碎片指数等参数影响明显。精子浓度、精子活力、总精子数、正常形态精子百分率越高,精子-宫颈黏液穿透功能越好,精子DNA碎片指数越高,精子-宫颈黏液穿透功能越差。

生理盐水稀释液对高浓度精液标本计算机辅助精子分析结果的影响

目的探讨以生理盐水作为稀释液对计算机辅助精子分析(CASA)系统检测高浓度精液标本的精子浓度及前向运动精子百分率结果的影响。方法选择初步观察精子浓度高于100×10^(6)/mL的精液标本118例,采用生理盐水分别以1∶1、1∶3、1∶7比例稀释。另选取精液量充足的100例以自身精浆为对照稀释液,以1∶3比例稀释,用CASA检测精子浓度及前向运动精子百分率。结果用CASA进行精液分析时,采用生理盐水作为稀释液,随稀释比例增高,精子浓度增大,前向运动精子百分率减小,1∶1稀释与原液、1∶3稀释与1∶1稀释比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);1∶7稀释与1∶3稀释比较,差异无统计学意义(P>0.05)。同样以1∶3比例稀释时,生理盐水组精子浓度较高,精浆组前向运动精子百分率较高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论用CASA进行精液分析时,若精液体积充足推荐使用精浆作为稀释液,更能反映就诊患者的真实情况;若精液体积不足,建议采用生理盐水以1∶3比例稀释。

精子CMA3阳性率与IVF受精率的相关性研究

目的探讨精子色素酶A3(CMA3)阳性率与IVF受精率之间的相关性。方法收集2015年4月至2016年7月因单纯输卵管性不孕在我院生殖医学科行常规IVF助孕的156个周期,以受精率<25%为低受精,根据受精率不同分为正常受精组(134个周期)和低受精组(22个周期)。取卵日,将授精后剩余的洗涤精液行精子浓度和活动率分析,并将精子进行CMA3染色。比较两组优选后的精子参数,分析IVF受精率与精子参数及CMA3阳性率的关系。结果与正常受精组比较,低受精组精子CMA3阳性率显著升高[(20.0±4.2)%vs.(30.7±2.3)%],优选后前向运动精子的百分率显著降低[(90.4±4.8)%vs.(74.3±3.4)%](P<0.05);两组精子浓度比较无显著性差异(P>0.05)。IVF受精率与优选后的前向运动精子百分率呈正相关(r=0.76,P<0.01)。精子CMA3阳性率与优选后前向运动精子百分率(r=-0.82,P<0.01)及IVF受精率(r=-0.83,P<0.01)呈显著负相关,与精子浓度则无显著相关性(P>0.05)。结论精子CMA3阳性率与IVF受精率负相关,但其具体机制尚需进一步研究探讨。

益气祛湿补肾法对肾虚湿阻型弱精症患者的精子质量调控

目的探讨益气祛湿补肾法对肾虚湿阻型弱精症患者的精子活力调控。方法选取弱精症患者74例,随机分为研究组和对照组,每组37例。所有患者均口服左卡尼汀和维生素E软胶囊。研究组在此基础上再加服益气祛湿补肾方。两组治疗时间均为3个月。比较两组中医证候积分、临床疗效。比较两组治疗前后精子浓度和前向运动精子百分率。结果对照组治疗总有效率为75.68%,研究组治疗总有效率为91.89%,两组总有效率无明显差异(P>0.05)。研究组治疗后中医证候积分明显低于治疗前、对照组治疗后(P<0.05)。研究组治疗后精子浓度和前向运动精子百分率均显著高于治疗前、对照组同期(P<0.05)。结论益气祛湿补肾法对肾虚湿阻型弱精症的治疗效果显著,能够提升精子质量。

精液冷冻复苏后精子活动力结果分析

目的比较不同民族之间精液冷冻复苏后精子活动力有无差异。方法将171名正常供精者(汉族74名、哈萨克族51名、维吾尔族46名)标本进行精液常规分析,按精液和冷冻保护剂等比例混匀,用程序降温仪通过三步降温法冻存于-196℃液氮中编号冻储。取出样本管放置于37℃水浴复苏,再次进行精液常规分析。结果冷冻复苏后,汉族供精者精子前向运动百分率和总活动率分别为(27.50±4.51)%和(38.53±7.39)%;哈萨克族供精者精子前向运动百分率和总活动率分别为(17.20±3.67)%和(23.82±5.12)%;维吾尔族供精者精子前向运动百分率和总活动率分别为(15.79±6.63)%和(24.60±5.31)%。经χ2检验,汉族和哈萨克族、维吾尔族供精者精子前向运动百分率和总活动率差异有统计学意义(P<0.05)。结论汉族与哈萨克族和维吾尔族精液冷冻复苏后精子活动力结果有差异,其原因有待进一步研究。

男性不育患者血清维生素D的变化及意义

目前,全球有10%-15%的夫妇受到不孕不育的影响,男性因素导致不育的约占50%[1]。临床上,通常依据精液分析来评价男性生育能力。尽管精液分析很有价值,但也存在局限性。一些研究团队试图寻找更加有价值的观测指标来反映男性的生育能力[2-3]。维生素D（vitamin D,Vit D）作为一种固醇类衍生物,已经越来越引起人们的重视。

解脲脲原体感染男性不育症患者精液质量分析

目的探讨解脲脲原体(Uu)感染对男性不育症患者精液质量的影响。方法对139例不育症患者精液进行Uu培养,并检测精子体积、精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率(PR)、非前向运动精子百分率(NP)、精浆果糖、酸性磷酸酶、中性α-葡萄糖苷酶;并对Uu阳性者进行抗生素治疗,分析治疗前、后不育症患者精液参数及精浆生化指标的变化。结果 139例男性不育症患者中精液Uu阳性46例,阳性率33.09%(46/139)。Uu阳性组与阴性组精子浓度、精子存活率、PR差异有统计学意义(t分别为-4.674、-2.656、-2.125,P均<0.05),NP、中性α-葡萄糖苷酶差异有统计学意义(Z分别为-1.983、-2.028,P均<0.05)。Uu阳性患者治疗前、后PR、中性α-葡萄糖糖苷酶差异有统计学意义(Z分别为-5.206、-2.212,P均<0.05)。精子浓度、精子存活率差异有统计学意义(t分别为-7.586、-7.732,P均<0.01)。结论男性不育症患者Uu感染可导致精子质量和中性α-葡萄糖苷酶下降,Uu感染合理治疗后精子质量和中性α-葡萄糖苷酶有明显改善。

163例不同禁欲时间的精液分析

目的通过对163例不同禁欲时间的精液分析,了解禁欲时间对精液质量的影响。方法应用伟力彩色精子质量检测仪(WLJY-9000)型对在本站男科体检的163例精液常规检查,分析不同禁欲时间的精液量、精子密度、精子活率、前向性精子运动百分率、pH值、异常精子变化。结果按禁欲时间分为小于2d、3～5d、6～7d、大于7d等4组,各组之间精液量、精子密度及前向运动精子百分率差异有统计学意义(P<0.01),精液量、精子密度随禁欲时间的延长而增加,前向运动精子百分率随禁欲时间的延长而下降,各组之间的精液pH值差异无统计学意义(P>0.05);前3组之间精子正常率、异常率差异无统计学意义(P>0.05),第4组与前3组之间精子正常率、异常率发生明显变化。结论禁欲3～7d,精液量、精子密度随禁欲时间的延长而增加,精子活率、前向运动精子百分率随禁欲时间的延长而下降;禁欲时间超过7d对精子质量有影响,精液检查最佳时间是禁欲3～7d。

腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张的临床观察

目的探讨腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张的临床效果。方法回顾性分析我院2015年3月~2017年9月收治的精索静脉曲张患者68例的临床资料,根据手术方式不同分为对照组32例和观察组36例。对照组行开放精索静脉曲张高位结扎术,观察组行腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术,比较两组手术效果及手术相关指标。结果观察组手术时间、术中出血量、肠道功能恢复时间、住院时间均明显少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组术后精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率均明显高于术前,差异有统计学意义(P<0.05),术后两组间精子质量比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后血清睾酮(T)水平明显高于对照组,黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组术后并发症发生率为2.78%,明显低于对照组的18.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张效果良好,并发症少,要后恢复快,值得临床推广。

补肾健脾方联合常规降糖治疗男性脾肾两虚2型糖尿病不育多中心随机平行对照研究

[目的]观察补肾健脾方联合常规降糖治疗男性脾肾两虚2型糖尿病不育疗效。[方法]使用多中心随机平行对照方法,将73例门诊患者按就诊顺序编号抽签简单随机分为两组。对照组36例常规降糖治疗。治疗组37例补肾健脾方(淫羊藿12g,鹿角胶15g,黄精12g,沙苑子、制首乌各15g,黄芪、山药、葛根、丹参各30g、制大黄10g),1剂/d,水煎至200m L,温服,1次/d;常规降糖治疗同对照组。连续治疗90d为1疗程。观测临床症状、随机血糖、空腹血糖、糖耐量试验(OGTT)、糖化血红蛋白、前向运动精子百分率、正常精子形态率、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组痊愈18例,显效9例,有效4例,无效6例,总有效率83.8%;对照组痊愈6例,显效3例,有效1例,无效26例,总有效率28.0%;临床疗效治疗组优于对照组(P<0.01)。糖化血红蛋白两组均有改善(P<0.01),组间无明显差异(P>0.05);前向运动精子百分率两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.01);正常精子形态率两组均有改善(P<0.01,P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05)。[结论]补肾健脾方联合常规降糖治疗男性脾肾两虚2型糖尿病不育,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

沧州地区6852例不育男性精液检测结果分析

目的对沧州地区男性不育患者的精液进行常规检测,了解本地区男性不育患者精液质量现状。方法按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)的标准,采用美国Hamilton(vios2)精子自动分析仪对2019年的6852例不育男性患者的精液进行常规检测。分析指标包括精液体积、精液pH值、精子浓度、精子总数、前向运动精子百分率(PR)等参数,并根据年龄分为≤25岁、>25~30岁、>30~35岁、>35~40岁、>40岁5组,分析比较各组精液参数。结果6852例不育男性精液中正常者2785例(40.6%),异常者4067例(59.4%),其中精液体积异常512例(12.59%),精液pH值异常389例(9.56%),精子浓度异常1543例(37.94%),精子总数异常1758例(43.22%),PR异常2206例(54.24%),无精子症72例(1.77%)。各年龄组中>35~40岁、>40岁两组精液体积、PR明显低于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05),其他各组间差异无统计学意义(P>0.05)。>40岁组与其他4组比较,精子浓度增加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沧州地区不育男性精液检查中,精液质量异常占比突出,异常参数以精子浓度、精子总数、PR为主;随着年龄的增长,精液质量有下降趋势,尤其35岁后更明显,主要以精液体积减少、精子活力下降为主,由此提示沧州地区男性最佳生育年龄在35岁之前;精子浓度随年龄增长有增高趋势,且40岁后增高明显。

不同环境下取精对精液参数的影响

目前男性因素导致的不育患病率日渐升高,临床上主要以常规精液分析对男性生育能力进行筛查及评估,对男性不育症的评估需要有效、完整的精液样本[1]。根据WHO的标准[2],取精地点应为医院,以保证精液的液化评价和温度波动对精液质量的影响不大。但医院单一、嘈杂的环境不利于取精,近年多种资料均显示不同的取精环境可能对精子质量造成不同的影响[3]。