激肽释放酶激活纤溶酶原机理的研究

作者研究了血浆和组织激肽释放酶激活纤溶酶原的机制。经SDS-PAGE和HPLC分析,提示血浆激肽释放酶裂解纤溶酶原的位点与t-PA、UK的相同,只是前者的酶反应速度明显低于后二者。组织激肽释放酶裂解纤溶酶原的位点除了与血浆激肽释放酶相同的部份外,尚有其它作用位点。因此认为这两种激肽释放酶激活纤溶酶原的机制不完全相同。

重组人组织激肽释放酶原对糖尿病大鼠肾组织的影响

为探讨基因重组人组织激肽释放酶原对糖尿病大鼠肾脏组织及细胞受损程度的影响,采用尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病肾病大鼠模型,用ELISA方法测定人组织激肽释放酶含量,以间接紫外分光光度计法测定肾组织激肽释放酶活性的,以放射免疫法测定血内皮素-1、肾cAMP。结果表明,糖尿病治疗组(DK)肾小球基质面积、肾小球截面积、肾小球系膜、肾小球基底膜、TGF-β1等肾组织形态变化指标明显优于糖尿病对照组(DC);注射重组人组织激肽释放酶原后,模型大鼠体内NO、cAMP增加,ET-1含量降低;16周时DK组和DC组肾组织中组织激肽释放酶的活性低于正常对照组(NC),但DK组高于DC组,差异有显著意义(P<0.05)。结论:重组人组织激肽释放酶原能延缓糖尿病肾病的进程。

用昆虫细胞表达系统表达人组织激肽释放酶原

目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达proHUK,系统优化表达条件。方法:用改进的方法对昆虫细胞进行了无血清悬浮适应培养,用ELISA、SDS-PAGE方法对各种条件下proHUK的表达量进行检测。结果:Sf-9、Hi-5细胞在血清减量速度为5%、1%,接种密度分别为2×106cells/mL1、×106cells/mL时能很快适应无血清悬浮培养。在病毒感染复度MOI为10,细胞接种密度为1×106cells/mL条件下培养96h后,proHUK的表达量最高可达30mg/L。结论:改进的方法使昆虫细胞能更快适应无血清悬浮生长条件,获得了高表达proHUK的方法,为其大规模制备奠定了基础。

急性心肌梗塞患者血浆前激肽释放酶和激肽酶动态变化

本文通过测定合成缓激肽的前激肽释放酶活力和使缓激肽灭活的激肽酶活力,探讨缓激肽与急性心肌梗塞时胸痛和低血压发生的关系。结果提示:激肽释放酶被活化,缓激肽产生增多。激肽酶活力下降,缓激肽灭活减少,导致血浆中缓激肽含量增加,可能与急性心肌梗塞时胸痛和低血压的发生关系密切。

51例急性心肌梗塞患者血浆前激肽释放酶活性变化的分析

为了解急性心肌梗塞(AMI)血浆激肽系统的变化,我们动态观察51例AMI后血浆前激肽释放酶(PK)的活性变化,与40例正常人血浆PK进行比较。结果表明,AMI一周内血浆PK最低,以后逐步恢复正常;有并发症组低于无并发症组,死亡组明显低于存活组。这提示,AMI时测定血浆PK浓度可反映病情的严重程度,对了解预后亦有一定价值。

心房利钠因子和前激肽释放酶在原发性高血压发病中意义的探讨

本文总结了心房利钠因子、前激肽释放酶在高血压病患者血浆中含量的改变。结果:①高血压病组血浆心房利钠因子含量明显高于对照组。②高血压病组血浆前激肽释放酶含量明显高于对照组。提示高血压病患者血浆的缓激肽含量可能减少。

前激肽释放酶（PK）含量测定临床应用的初步探讨

前激肽释放酶（ＰＫ）含量测定临床应用的初步探讨福建省立医院林惠，黄秀琼福建医学院附属协和医院陈卫闽，罗心绮血浆前激肽释放酶ＰＫ是血浆激肽释放酶Ｋ的前体，由肝脏合成和分泌的，是凝血系统与凝血因子密切相关的蛋白质，在凝血的接触系统中占重要地位，故检测血浆...

血液稀释治疗对急性脑梗塞血浆激肽释放酶原、蛋白C和蛋白S含量的影响

对16例接受等容血液稀释治疗及15例接受常规治疗的急性脑梗塞患者分别在治疗前、治疗后第5d和第30d检测血浆激肽释放酶原(PK)、蛋白C(PC)和蛋白S(PS)含量,并以20名健康者作正常对照。结果显示,治疗前两组患者各项指标均在正常范围,治疗后第5d稀释治疗组血浆PK含量显著下降(P<0.05),治疗后第30d稀释治疗组PC含量显著下降(P<0.05),未经稀释治疗的病例其相应指标无显著性变化。提示血液稀释疗法可能有提高脑梗塞患者抗凝系统的活性及调节凝血系统和抗凝系统平衡的作用。

速率法检测血浆前激肽释放酶初探

本试验设计引入正交试验,优选前激肽酶测定的最适条件,根据极差 R 值的大小.发现底物浓度是诸因素中的重要因素,并对其详加考查.在此基础上,建立了简单,快速,可靠的速率法.并进行了必要的方法学评价,同时,对一些实验现象作了研讨.

速率法检测血浆前激肽释放酶初探

目的 :为提高血浆前激肽释放酶 (PK)的检测水平 ,更好地应用于临床。方法 :采用正交试验 ,根据极差R值的大小 ,优选PK测定的最适条件。结果 :发现底物浓度是诸因素中的重要因素 ,并对其详加考查。并确立PKA80 μl,S2 30 2 80 μl ,酶 30 μl,pH7.8为最佳组合。在此基础上 ,建立了简单、快速、可靠的速率法 ,并进行了必要的方法学评价。结论

低剂量坎地沙坦对小鼠脑梗死使用重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓的出血并发症的影响及机制

目的探讨低剂量坎地沙坦(Cand)对小鼠脑梗死用重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓出血并发症的影响及机制。方法160只小鼠随机分为对照组(56只)、rt-PA组(52只)、rt-PA+Cand组(52只)。用线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,rt-PA组和rt-PA+Cand组在MCAO开始后2 h股静脉注射rt-PA(10 mg/kg),rt-PA+Cand组MCAO术前口服Cand 2周[0.5 mg/(kg·d)]。术后24 h评价各组神经功能、脑出血转化情况、出血转化体积及伊文思蓝渗出浓度,定量反转录聚合酶连锁反应法检测脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Claudin-5基因表达变化,免疫荧光法检测MMP-9、Claudin-5蛋白表达变化,Western blotting法检测脑组织血浆激肽释放酶(Pkal)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体(AT1R)及缓激肽受体(B2R)蛋白表达变化。结果对照组及rt-PA+Cand组一般功能损伤评分、局灶功能损伤评分、出血转化评分、血红蛋白水平及伊文思蓝渗出浓度显著低于rt-PA组(均P<0.01)。与rt-PA组比较,对照组及rt-PA+Cand组MMP-9 mRNA相对表达量及阳性细胞率显著降低,Claudin-5 mRNA相对表达量及阳性细胞率显著升高(P<0.05~0.01)。对照组及rt-PA+Cand组Pkal、AT1R、B2R表达显著低于rt-PA组(P<0.05~0.01)。结论低剂量Cand可以一定程度上预防并减轻小鼠脑缺血再灌注后使用rt-PA的出血并发症,这可能是通过减少AngⅡ-AT1R/Pkal表达实现的。

白血病患者血浆抗凝纤溶及激肽释放酶原检测的意义

对白血病37例(急淋16例,急非淋14例,慢粒7例)进行抗凝,纤溶及激肽释放酶原的测定。结果抗凝血酶-Ⅲ抗原(AT-Ⅲ:Ag)、抗凝血酶-Ⅲ活性(AT-Ⅲ:C)及α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)水平均降低,与对照组比较,均有显著差异(P<0.01)补体C_1-抑制物(C_1-INH)无差异(P>0.05)纤溶酶原抗原(PLG:Ag)三组水平降低,以急淋及慢粒组下降明显,差异非常显著(P<0.01),激肽释放酶原活性(PK:C):急淋水平增高,差异非常显著(P<0.01),急非淋及慢粒无差异(P>0.05)抗凝指标下降,示高凝状态;纤溶指标下降,示纤溶亢进,可视为白血病出血的原因。

激肽释放酶原缺乏症孕妇1例

患者,女,28岁,2013年9月25日产科门诊就诊,停经56 d,要求终止妊娠,孕4产2,自述第一胎曾因经济原因,在私人门诊未做任何检测行无痛人工流产手术,第二胎和第三胎在他院顺产,当时检测凝血功能提示活化部分凝血活酶时间（APTT）94.3 s,而患者生产婴儿时亦无任何出血不止和血栓形成现象,临床医师未重视,也未采取任何措施。患者B超提示单活胎、早孕,遂来本院行无痛人工流产术,术前筛查发现其凝血功能APTT 146.4 s,而凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）均正常,血小板数目和形态未见明显异常。

恶性肿瘤血浆激肽释放酶原、纤溶酶原、纤维蛋白原的观察

应用较为先进的检测手段,对84例恶性肿瘤患者血浆激肽释放酶原(PK)、纤溶酶原(PLG)、纤维蛋白原(FIG)进行测定,共100例次。结果表明:PK、PLG明显降低,其中肺癌、消化道癌及白血病降低明显。病情越重,降低越著。本文检测结果提示恶性肿瘤病人纤溶活性增强,存在高凝状态及继发性纤溶,本文还分析了上述指标变化的原因。

近亲婚配分别导致遗传性激肽释放酶原和高分子量激肽原缺陷症2个家系的遗传学分析

目的探讨2个近亲婚配分别导致遗传性激肽释放酶原(PK)和高分子量激肽原(HMWK)缺陷症家系的分子致病机制。方法选取分别于2021年12月3日和2022年6月16日就诊于温州医科大学附属第一医院的1个PK缺陷症家系(共4代10人)和1个HMWK缺陷症家系(共3代6人)作为研究对象。收集相关临床资料,检测先证者及其家系成员的相关凝血指标。提取受试者外周血基因组DNA后,对KLKB1和KNG1基因进行测序,并对候选变异进行生物信息学分析。本研究通过温州医科大学附属第一医院医学伦理委员会的审查(伦理号:KY2022-R193)。结果先证者A为29岁女性,与其弟弟血浆PK活性均极度降低(<1.0%)。先证者B为66岁男性,血浆HMWK活性极度降低(<1.0%)。测序结果发现,先证者A及其弟弟KLKB1基因第5外显子均存在c.417_418insCATTCTTA(p.Arg140Hisfs*3)纯合插入变异,其祖母、外祖母、父亲、母亲、妹妹和儿子均携带杂合插入变异,其外祖父和丈夫均为野生型;先证者B的KNG1基因第4外显子存在c.460C>A(p.Pro154Thr)纯合错义变异,其儿子携带杂合错义变异,家系其他成员均为野生型。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南,上述2个变异分别被评定为致病性(PVS1+PM2_Supporting+PM4)与可能致病性(PS4+PM2_Supporting+PP3+PP4)。结论KLKB1基因c.417_418insCATTCTTA(p.Arg140Hisfs*3)与KNG1基因c.460C>A(p.Pro154Thr)变异可能分别为2个家系PK活性与HMWK活性降低的遗传学病因。

血管内介入联合rt—PA静脉溶栓及尤瑞克林治疗超急性期前循环脑梗死的研究

【目的】探讨血管内介入治疗联合重组人组织型纤溶酶原激活剂（rt—PA）静脉溶栓及尤瑞克林治疗超急性期前循环脑梗死的疗效。【方法】选择本院2015年1月至2016年6月收治的超急性期前循环脑梗死患者87例，采用分层抽样法将其分为观察组（n=45）与对照组（n=42），观察组采取血管内介入治疗联合rt—PA（阿替普酶）静脉溶栓及尤瑞克林治疗，对照组行单纯标准静脉溶栓治疗，比较两纽疗效及安全性。【结果】观察组治疗总有效率88．89％，90d预后良好率71．11％，显著高于对照组的69．05％、40．48％，差异具有统计学意义（P〈0．05）；两组治疗后美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）较治疗前均显著下降，日常生活能力（ADL）评分、脑血管平均血流速度、平均血流量均显著上升（P〈0．05），且观察组治疗后上述指标均明显优于对照组（P〈0．05）；两组30d不良事件发生率比较无显著差异（P〉0．05）。【结论】血管内介入治疗联合rt-PA静脉溶栓及尤瑞克林治疗超急性期前循环脑梗死安全有效，能明显改善患者脑血流动力学及预后。