血清前脂肪细胞因子-1对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的预测价值

目的 探讨血清前脂肪细胞因子-1(Pref-1)对2型糖尿病(T2DM)患者早期糖尿病肾病(EDKD)的预测价值。方法 对河南省安阳市人民医院2019年6月至2021年6月期间收治的84例T2DM患者进行临床研究,根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为T2DM组(51例)与EDKD组(33例),同时期健康体检者50例选为对照组。采用Elisa法检测纳入对象血清Pref-1水平。应用ROC曲线评估Pref-1预测T2DM患者EDKD的价值,多因素Logistics回归分析探讨2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的相关因素。结果 T2DM组患者血清Pref-1水平高于对照组,EDKD组患者血清Pref-1水平高于T2DM组和对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析,T2DM患者血清Pref-1水平与BUN、Scr、UAER、UACR呈正相关,与eGFR呈负相关(P<0.05)。血清Pref-1预测T2DM患者EDKD的ROC曲线下面积为0.786,诊断界值为1.70 mmol/L,敏感度和特异度分别为78.00%、74.60%。多因素Logistic回归分析显示:TG(OR=1.752,95%CI:1.047~2.934)、HDL-C(OR=4.150,95%CI:1.437~11.981)、BMI(OR=3.146,95%CI:1.824~5.424)、BUN (OR=3.967,95%CI:1.374~11.454)、Pref-1 (OR=1.259,95%CI:1.117~1.418)是T2DM患者患EDKD的相关因素(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的血清Pref-1水平明显升高,血清Pref-1对T2DM患者早期糖尿病肾病具有一定的预测价值,有望作为T2DM早期肾病的预测指标。

冠心病心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子、单核细胞趋化蛋白-1与心功能、心肌损伤指标相关性分析

目的:探讨冠心病(CHD)心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、不规则趋化因子(Fractalkine)与心功能、心肌损伤指标的相关性。方法:选取150例CHD心绞痛患者作为观察组(不稳定型心绞痛患者64例为A组、稳定型心绞痛患者86例为B组),同期收治的164例非CHD患者为C组。比较三组血清Fractalkine、Vaspin、MCP-1水平、心功能指标及心肌损伤指标,相关性采用Pearson相关性分析。结果:A组血清Vaspin水平低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组血清Fractalkine、MCP-1水平高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组各心肌损伤指标水平均高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。Pearson相关性分析:CHD心绞痛患者血清Vaspins水平与LVEF、FS成正比;血清Vaspins水平与LVEDD、LVESD、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEF、FS成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEDD、LVESD、CK、CK-MB、cTnI、H-FABP成正比(均P<0.05)。结论:随着CHD心绞痛患者病情加重,患者心功能及心肌损伤越严重,且患者血清Vaspins、Fractalkine、MCP-1与患者心功能及心肌损伤具有密切联系,临床可根据其水平变化评估病情进展情况。

高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响和机制研究

目的探讨高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响和机制。方法本研究选取2022年9月—2023年2月珠海市人民医院·暨南大学附属珠海医院3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,使用MTT法评估高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1细胞增殖的影响。通过油红O染色检测分析高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1细胞分化的影响。应用实时定量聚合酶链锁反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法检测高良姜二苯庚烷化合物对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator Activated Receptorγ,PPARγ)和CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/Enhancer Binding Proteinα,C/EBPα)基因mRNA表达的调控作用。通过Western blot分析检测高良姜二苯庚烷化合物对PPARγ和C/EBPα蛋白表达的影响。结果高良姜二苯庚化合物(0、0.05、0.2、0.4 g/L)在24、48 h对前脂肪细胞的生长表现为增殖趋势,呈现一定的量效关系,其中高良姜二苯庚烷化合物浓度为0.4 g/L时3T3-L1增殖[(7.02±0.35)、(17.23±0.95)g/L]高于与对照组,差异有统计学意义(t=13.794、10.843,P均<0.05)。高良姜二苯庚烷化合物呈剂量依赖性地抑制了3T3-L1细胞的增殖。油红O染色结果显示,高良姜二苯庚烷化合物处理显著抑制了3T3-L1细胞的脂肪细胞分化,并减少了脂滴的积累;100μmol/L处理组,PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平显著降低。高良姜二苯庚烷化合物通过抑制PPARγ和C/EBPα基因的表达,调控了3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,从而减少了脂肪滴的积累。结论高良姜二苯庚烷化合物抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,其机制与PPARr/EBPα的低表达有关。

脂联素、瘦素、Pref-1与胰岛素抵抗关系及联合检测预测糖尿病前期病情进展风险的效能

目的探讨脂联素、瘦素、前脂肪细胞因子-1(Pref-1)与胰岛素抵抗的关系及联合检测预测糖尿病前期病情进展风险的效能。方法选取2019年1月至2023年1月郑州大学第一附属医院收治的304例糖尿病前期患者进行前瞻性队列研究。根据1年内是否进展为糖尿病分为糖尿病组(62例)、糖尿病前期组(242例),另选同期正常糖耐量人群60例作为对照组。比较三组受检者的基线资料及血清脂联素、瘦素、Pref-1表达水平,采用Pearson法分析血清脂联素、瘦素、Pref-1水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性,采用Logistic回归分析血清脂联素、瘦素、Pref-1水平对糖尿病前期病情进展的影响,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清脂联素、瘦素、Pref-1单独及联合检测对糖尿病前期病情进展风险的预测效能。结果三组受检者的年龄、体质量指数(BMI)、甘油三酯、空腹血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)比较,糖尿病组高于糖尿病前期组,且糖尿病前期组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病组患者的脂联素、Pref-1分别为(2.82±0.93)mg/L、(0.30±0.10)μg/L,明显低于糖尿病前期组的(6.76±2.17)mg/L、(0.51±0.16)μg/L,且糖尿病前期组患者的脂联素、Pref-1明显低于对照组的(8.45±2.80)mg/L、(0.84±0.27)μg/L,而糖尿病组患者的瘦素为(12.00±2.98)μg/L,明显高于糖尿病前期组的(8.79±2.87)μg/L,且糖尿病前期组患者的瘦素明显高于对照组的(3.56±1.09)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);脂联素(r=-0.694)、Pref-1(r=-0.853)与HOMA-IR呈负相关(P<0.05),瘦素(r=0.660)与HOMA-IR呈正相关(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,年龄、BMI、甘油三酯、空腹血糖、脂联素、瘦素、Pref-1是糖尿病前期患者病情进展的独立影响因素,将年龄、BMI、甘油三酯、空腹血糖进行校正,以脂联素、瘦素、Pref-1作为自变量,脂联素、瘦素、Pref-1仍是糖尿病前期患者病情进展的独立影响因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,脂联素预测糖尿病前期病情进展风险的曲线下面积(AUC)为0.730,截断值≤3.51 mg/L,敏感度为79.03%,特异度为59.09%,瘦素预测的AUC为0.760,截断值>10.78μg/L,敏感度为67.74%,特异度为73.55%,Pref-1预测的AUC为0.795,截断值≤0.37μg/L,敏感度为80.65%,特异度为65.70%,且联合检测预测糖尿病前期病情进展的AUC为0.904,敏感度为87.10%,特异度为82.23%(P<0.05)。结论血清脂肪因子脂联素、Pref-1与不同糖耐量受损人群IR呈负相关,瘦素与之呈正相关,且联合检测对糖尿病前期病情进展风险具有一定预测价值,可作为临床早期预测病情进展风险的辅助指标。

单核细胞趋化蛋白1、颗粒蛋白前体、胶质细胞源性神经营养因子水平与阿尔茨海默病认知功能、日常生活能力相关性分析

目的 分析血清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、颗粒蛋白前体(PGRN)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)水平与阿尔茨海默病(AD)病人认知功能及日常生活能力的相关性,探讨其在AD中的诊断价值。方法 选取2019年7月至2021年6月入住苏州大学附属广济医院治疗的41例AD病人作为观察组,采用随机数字表法选取苏州大学附属广济医院同期经评估符合入组的41例健康志愿者作为对照组,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组研究对象血清MCP-1、PGRN、GDNF水平;采用简易智力状态检查表(MMSE)及日常生活量表(ADL)评估其认知功能及日常生活能力。分析观察组病人血清MCP-1、PGRN、GDNF水平与MMSE、ADL评分的相关性;并通过受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析MCP-1、PGRN、GDNF在AD中的诊断价值。结果 观察组MCP-1(321.7±51.1)ng/L、PGRN(42.6±8.5)μg/L水平较对照组MCP-1(242.6±35.2)ng/L、PGRN(26.5±6.1)μg/L显著增高,观察组GDNF(357.8±112.3)ng/L水平较对照组GDNF(468.0±106.6)ng/L显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示:观察组MMSE、ADL评分与血清MCP-1、PGRN水平均呈负相关(r=-0.46~-0.31,P<0.05),与PGRN水平呈正相关(r=0.47、0.46,P<0.05)。ROC曲线显示:MCP-1、PGRN、GDNF对AD的诊断价值较高,其ROC曲线下面积(AUC)分别为0.73、0.75、0.71,灵敏度分别为75.6%、75.6%、70.7%,特异度分别为61.0%、70.7%、63.4%,MCP-1、PGRN、GDNF三项标志物联合检测的AUC为0.83,灵敏度和特异度分别达到82.9%、75.6%。结论 AD病人血清MCP-1、PGRN水平表达明显增高,GDNF水平表达明显降低。这与AD病人认知功能和日常生活能力减退严重程度显著相关。三项指标联合检测在AD诊断中有着重要的参考价值.

基于成纤维细胞生长因子1的药物治疗肥胖相关并发症

目前,超重和肥胖的发生率已在全球范围内达到流行病的程度,这对慢性代谢性疾病预防和控制造成了巨大挑战。肥胖是包括2型糖尿病、非酒精性脂肪性肝病、心血管病、神经退行性疾病、睡眠呼吸暂停和某些类型的癌症等在内的一系列代谢疾病的主要危险因素。然而,治疗肥胖及其相关并发症的药物选择仍然有限,大多数抗肥胖药物因严重不良反应而退出市场,迫切需要开发有效的长期治疗方法来应对肥胖相关并发症。成纤维细胞生长因子1(fibroblast growth factor 1,FGF1)是全身能量稳态、糖脂代谢和胰岛素敏感性的重要调节因子。FGF1对于肥胖及2型糖尿病、非酒精性脂肪性肝病、癌症、心脏病等肥胖相关并发症具有一定的治疗益处,但长期使用导致的肿瘤发生风险增加限制了其应用。本综述总结了基于FGF1治疗肥胖相关并发症的生物药物开发的最新进展,强调了临床实施中的主要挑战,并讨论了克服这些障碍的可能策略。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂通过降低血管细胞黏附分子-1减缓载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展

目的探究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂减缓动脉粥样硬化(AS)的分子机制。方法选取45只载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组、AS模型组和PCSK9抑制剂干预组,每组15只。以普通喂养方式为对照组,通过高脂饮食诱导构建AS模型组,高脂喂养并给予PCSK9抑制剂作为PCSK9抑制剂干预组。实验结束后取小鼠血浆测定血脂浓度;取小鼠主动脉根部,制作切片并通过油红O染色及苏木精-伊红(HE)染色观察AS病理形态学改变;通过免疫组化染色测定主动脉组织血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达;取小鼠胸主动脉利用real-time PCR和Western Blot法测定主动脉血管中VCAM-1的mRNA含量及蛋白表达;ELISA测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)浓度。结果AS模型组小鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PCSK9抑制剂干预组血浆TC、TG、LDL-C、HDL-C水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),PCSK9抑制剂干预组血浆TC、TG、LDL-C水平低于AS模型组,HDL-C高于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组主动脉硬化斑块相对面积大于对照组,而PCSK9抑制剂干预组斑块相对面积小于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组和PCSK9抑制剂干预组小鼠主动脉VCAM-1蛋白表达及mRNA水平高于对照组,而PCSK9抑制剂干预组VCAM-1蛋白表达及mRNA水低于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组血浆TNF-α、PAI-1水平高于对照组,而PCSK9抑制剂干预组血浆TNF-α、PAI-1水平低于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05),但PCSK9抑制剂干预组血浆TNF-α、PAI-1含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PCSK9抑制剂可降低血液中炎症因子TNF-α和PAI-1浓度,从而减少主动脉VCAM-1的表达,进而减缓动脉粥样硬化进展。

CircECH1通过充当miR-365-5p海绵抑制猪前体脂肪细胞增殖

环状RNA(circRNA)是一种共价封闭RNA,在脂肪发育过程中具有重要作用。本研究旨在探讨猪环状RNA ECH1(circECH1)对前体脂肪细胞增殖的调控机制。本研究通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析、Sanger测序和RNase R酶消化法成功鉴定circECH1的稳定环状结构,其在马身猪各个组织中均有表达,并且其在脂肪组织中的表达量随日龄增加呈上升趋势。功能研究证明,干扰circECH1后,增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。为进一步探究其分子机制,使用miRDB、miRWalk和RNAhybrid预测circECH1的下游靶基因。通过双荧光素酶报告基因分析和RNA结合蛋白免疫沉淀技术,验证circECH1能靶向结合miR-365-5p。在猪前体脂肪细胞中过表达miR-365-5p会增殖相关基因PCNA和CDK1的表达量极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01);干扰miR-365-5p后增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量极显著降低(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。挽救实验结果显示,共转染si-circECH1和miR-365-5p inhibitor与单独转染miR-365-5p inhibitor相比,增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量显著升高(P<0.01),增殖细胞数量显著升高。本研究结果证明,circECH1存在于马身猪的脂肪组织中,并且通过海绵吸附miR-365-5p调控猪前体脂肪细胞增殖,为进一步了解调控猪前体脂肪细胞的分子机制提供理论依据。

小鼠前脂肪细胞分化过程中STAU1介导Foxp1 mRNA降解机制初探

目的 探究小鼠前脂肪细胞分化过程中STAU1对Foxp1 mRNA转录后的调控作用。方法 培养3T3-L1前脂肪细胞,采用鸡尾酒法诱导其分化为成熟脂肪细胞,分别收取第0天和第4天样本进行RNA测序筛选出差异倍数(FC)>2的转录因子;提取第0、1、2、3、4天细胞总RNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验验证。RBPDB数据库预测Foxp1的RNA结合蛋白。转染空载体质粒和STAU1过表达质粒后将细胞分为对照组和STAU1过表达组,提取第0、12、24、36、48小时细胞总RNA。利用RT-qPCR及Western-Blot实验检测两组3T3-L1细胞STAU1过表达效率、分化过程中Foxp1的mRNA和蛋白质表达水平。10只雄性2~3周龄C57BL/6小鼠的腹股沟白色脂肪组织(inguinal white adipose tissue, iWAT)分离培养的血管基质部分(Stromal vascular fraction, SVF)细胞,鸡尾酒法诱导分化,感染慢病毒,利用免疫荧光实验检测SVF细胞中Foxp1的蛋白质表达水平,用catRAPID软件进行预测。RNA免疫共沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation, RIP)实验检测STAU1与Foxp1 mRNA 3′非翻译区(3′un-translated region, 3′UTR)STAU1结合位点(Staufen binding site, SBS)的结合情况。转染质粒24 h后加入放线菌素D,提取第0、1、2、4、6、8小时细胞总RNA,利用RT-qPCR实验检测两组3T3-L1细胞STAU1对Foxp1 mRNA稳定性的影响。结果 经RNA-seq筛选出5个表达上调和5个表达下调的转录因子;RT-qPCR验证结果显示,在成脂过程中Foxp1 mRNA的表达逐渐下降,Pparγ mRNA的表达逐渐上调;RBPDB数据库结果显示,STAU1是Foxp1的RNA结合蛋白;与对照组比较,STAU1过表达组STAU1的mRNA和蛋白质表达水平显著升高(P<0.05),Foxp1的mRNA和蛋白质表达水平均显著降低(P<0.05);免疫荧光结果显示,与对照组比较,STAU1过表达组中Foxp1相对荧光强度降低(P<0.05);RNA免疫沉淀实验后的PCR验证结果显示,STAU1与Foxp1 mRNA 3′UTR的6 714~7 000 bp存在结合;与对照组比较,STAU1过表达组Foxp1的mRNA稳定性显著下降(P<0.05)。结论 STAU1通过结合在Foxp1 mRNA 3′UTR上,启动STAU1介导的mRNA降解途径(Staufen-mediated decay, SMD)降解其mRNA,下调Foxp1的mRNA表达水平。

PRNP基因在3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中的表达及肿瘤坏死因子-α对其调节作用

目的探讨3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中PRNP基因表达水平的变化及TNF-α对其调节作用。方法体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,胰岛素加地塞米松加1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（MDI）方案诱导3T3-L1细胞分化成熟,并收集分化前、分化0～10 d各时段细胞,采用RT-PCR技术检测诱导分化不同时段3T3-L1细胞PRNP基因表达水平;同时在成功诱导3T3-L1细胞分化成熟的基础上,应用不同水平TNF-α（0.1、1.0、10.0μg/L）干预分化后的成熟脂肪细胞（第10天）,收集TNF-α刺激前（0 h）及刺激后0.5、2.0、6.0、12.0、24.0 h的脂肪细胞,通过RT-PCR测定TNF-α干预前后不同时间点脂肪细胞中PRNP基因表达水平。采用Excel软件进行统计学分析。结果1.PRNP基因低表达于3T3-L1脂肪前体细胞中,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐上调,至分化第10天其表达水平最高。PRNP基因表达水平除在诱导分化前（第-1天）至第4天、第2～5天、第6～10天时段内无显著性差异外（Pa〉0.05）,其余各时段间表达水平均有显著性差异（Pa〈0.05）;2.在分化前的3T3-L1脂肪细胞和成熟脂肪细胞中,不同水平TNF-α（0.1、1.0、10.0μg/L）均能在短时间内明显抑制PRNP基因mRNA的表达,且呈时间依赖性。结论PRNP基因可能参与3T3-L1脂肪细胞分化及脂质积聚过程;不同水平重组TNF-α对成熟脂肪细胞的PRNP基因表达具有抑制作用,其抑制效应总体趋势上呈时间依赖性。

血清白细胞介素6和转化生长因子β_(1)及肠型脂肪酸结合蛋白水平对重症急性胰腺炎并发腹腔间隔室综合征的诊断价值

目的探讨血清白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))及肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)水平对重症急性胰腺炎(SAP)并发腹腔间隔室综合征(ACS)的诊断价值。方法选取2020年1月至2022年12月内蒙古自治区人民医院收治的89例SAP患者为SAP组,根据是否并发ACS分为ACS组(53例)和非ACS组(36例),另选取本院同期41例体检健康者为对照组。收集SAP患者临床资料,采用酶联免疫吸附试验法检测血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平。采用多因素Logistic回归方法分析SAP并发ACS的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平对SAP并发ACS的诊断价值。结果SAP组血清IL-6、I-FABP水平均高于对照组,TGF-β_(1)水平低于对照组[26(20,32)ng/L比7(5,9)ng/L、(162±26)μg/L比(100±19)μg/L、(36±8)μg/L比(53±6)μg/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。ACS组TGF-β_(1)水平低于非ACS组,IL-6、I-FABP水平均高于非ACS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,入住重症监护病房时间延长、急性生理学和慢性健康状况评分系统Ⅱ评分增加和IL-6、I-FABP升高为SAP并发ACS的独立危险因素,TGF-β_(1)升高为独立保护因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平联合检测诊断SAP并发ACS的曲线下面积为0.888(95%置信区间:0.804~0.945),大于IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP单独检测(P<0.05)。结论SAP患者血清IL-6、I-FABP水平升高和TGF-β_(1)水平降低与并发ACS有关,血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平联合检测诊断SAP并发ACS的价值较高。

前脂肪细胞因子-1对糖脂代谢的影响

前脂肪细胞因子-1(preadipocyte factor1,Pref-1)是脂肪细胞分化早期具有分化抑制作用的分子标志,而脂肪细胞的分化障碍不仅能够导致脂代谢障碍,还可以使糖尿病的易患性增加,导致肥胖、脂肪营养不良、糖尿病等代谢性疾病。本文就Pref-1的结构、表达、其在脂肪细胞分化中的作用及其对糖、脂代谢的影响进行综述。

类胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的作用

目的:证实类胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的作用,并摸索该细胞因子对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化作用的最佳质量浓度。方法:实验于2004-03/2004-07在辽宁医学院科学实验中心完成。实验材料:小鼠胚胎3T3-L1前脂肪细胞株由ATCC提供,购于上海中科院生命科学院;类胰岛素样生长因子1购于美国Biological公司。实验方法:对照组为标准的高糖DMEM培养基,实验组为含有1,5,10,20,50,100μg/L类胰岛素样生长因子1的高糖DMEM培养基。用含体积分数为0.1胎牛血清的高糖DMEM培养基在37℃、体积分数为0.05 CO2的孵箱内培养3T3-L1前脂肪细胞,每48h换液1次。实验评估:在倒置显微镜下观察类胰岛素样生长因子1作用前后3T3-L1前脂肪细胞的生长情况及形态学改变。待细胞铺满瓶底后,应用流式细胞仪检测细胞周期,应用噻唑蓝法测定3T3-L1前脂肪细胞增殖率:增殖率=实验组A值/对照组A值×100%,采用油红O染色提取法测定3T3-L1前脂肪细胞内脂肪含量增长率:增长率=实验组B值/对照组B值×100%。结果:①倒置显微镜下观察分化前3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞浆内无脂滴,分化后3T3-L1前脂细胞呈圆形,胞浆内含有大量的脂滴,脂滴聚集于核周,被油红O染成橙红色,形成“戒环”样的形态。②噻唑蓝法检测结果和油红O染色提取法检测结果均显示,不同质量浓度类胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的作用,与空白对照组相比差异显著[培养1d:(1.18±0.02)%,(1.29±0.01)%,(1.35±0.03)%,(1.47±0.04)%,(1.46±0.03)%,(1.47±0.05)%,(1.00±0.01)%;培养2d:(1.40±0.03)%,(1.56±0.04)%,(1.67±0.02)%,(1.82±0.05)%,(1.81±0.02)%,(1.82±0.09)%,(1.00±0.01)%,P<0.05],20μg/L类胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的作用最为明显(P=0.0382);流式细胞仪分析结果与噻唑蓝法及油红O染色提取法基本一致。结论:体外细胞培养实验表明,类胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化有明显促进作用,其促进作用与质量浓度并非正比,而是达到一定的质量浓度后,其促进作用不再增加,而这个质量浓度接近本实验的最佳质量浓度值,即20μg/L。

新型SIRT1激活剂XZG2151对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

目的探讨新型沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)激活剂化合物XZG2151对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞分成4组:3T3-L1细胞组(Pre组)、DMSO组(Ctrl组)、阳性对照组(SRT2104组)、实验组(XZG2151组)。采用CCK8法检测XZG2151对3T3-L1细胞增殖的影响。油红O染色法、甘油含量测定法观察XZG2151对3T3-L1细胞中脂肪形成的影响。实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹法检测XZG2151对3T3-L1细胞分化过程中相关基因和蛋白表达水平的影响。结果10μmol/L XZG2151对3T3-L1前脂肪细胞的增殖无显著影响(P>0.05)。与Ctrl组相比,SRT2104组和XZG2151组3T3-L1细胞脂肪含量显著降低(P<0.05)。与Ctrl组相比,XZG2151组SIRT1、激素敏感脂肪酶(HSL)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);脂肪合成转录因子PPARγ和C/EBPβ、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、乙酰辅酶A羟化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FASN)的mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。此外,与Ctrl组相比,XZG2151组SIRT1、p-ACC、CPT1A蛋白表达显著升高(P<0.05),FASN蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论XZG2151可调节3T3-L1前脂肪细胞的脂肪生成和脂质代谢,从而抑制前脂肪细胞分化。

前脂肪细胞因子-1研究进展

研究表明,前脂肪细胞因子-1（preadipocyte factor 1,Pref-1）是脂肪细胞发育分化的重要反馈调节因子。本文综述前脂肪细胞因子-1的结构、在动物体内的分布以及对脂肪细胞的发育和分化调控作用及其可能的信号通路。

老年女性骨质疏松性椎体骨折患者血清ODF、Pref-1与骨密度的关系

目的 探究老年女性骨质疏松性椎体骨折(OVCF)患者血清破骨细胞分化因子(ODF)、前脂肪细胞因子(Pref-1)与骨密度的关系。方法 选择86例OVCF患者为OVCF组,同期在医院行体检的47例健康成年女性为对照组,比较两组血清ODF、Pref-1水平与骨密度;按骨密度将OVCF患者分为低骨量组、骨质疏松组、严重骨质疏松组,比较3组血清ODF、Pref-1水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ODF、Pref-1水平预测OVCF患者降低程度的价值;通过Pearson相关性分析血清ODF、Pref-1水平与OVCF患者骨密度的相关性,通过Logistic模型分析OVCF患者骨密度的影响因素。结果 OVCF组血清ODF、Pref-1水平较对照组明显增加,腰椎正位及股骨骨密度较对照组明显减少(P<0.05)。骨质疏松组、严重骨质疏松组血清ODF、Pref-1水平较低骨量组明显增加(P<0.05);且严重骨质疏松组血清ODF、Pref-1水平较骨质疏松组明显增加(P<0.05)。血清ODF、Pref-1水平均与OVCF患者骨密度呈负相关(r=-0.347、-0.301,P=0.001、0.007)。血清ODF、Pref-1水平预测OVCF患者降低程度的曲线下面积(AUC)分别为0.754、0.729,敏感度分别为74.30%、75.70%,特异度分别为75.00%、68.70%。ODF、Pref-1均可作为影响OVCF患者骨密度的危险因素。结论 老年女性OVCF血清ODF、Pref-1水平均明显上调,其表达均与骨密度密切相关,在评估及预测OVCF患者骨量减少方面具有重要价值。

3T3-L1前脂肪细胞的体外培养及胰岛素样生长因子1对其增殖、分化的作用

背景:前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞,如果能够找到可以强力促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物,在脂肪组织移植的同时使用,则有希望提高脂肪组织的移植效果。目的:摸索体外培养经典的3T3-L1前脂肪细胞的最佳培养环境并积累培养经验,观察胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,并探求胰岛素样生长因子1的最佳作用剂量。设计、时间及地点:以细胞为对象的对照观察实验,于2007-10/2008-02在辽宁医学院科学实验中心完成。材料:3T3-L1前脂肪细胞株购于上海中科院生命科学院;胰岛素样生长因子1购于美国Biological公司。方法:根据3T3-L1前脂肪细胞的体外培养条件分为6组:空白对照组应用含体积分数为0.1的胎牛血清的标准高糖DMEM培养基培养;各实验组分别应用含有5,10,20,50,100μg/L胰岛素样生长因子1的含体积分数为0.1的胎牛血清的高糖DMEM培养基培养。主要观察指标:倒置显微镜下观察各组3T3-L1前脂肪细胞的生长、增殖及分化情况并拍照记录。待细胞铺满瓶底达到单层汇合时,应用流式细胞仪检测细胞周期,应用四甲基偶氮唑盐比色法测定3T3-L1前脂肪细胞的增殖率;应用油红O染色提取法测定3T3-L1前脂肪细胞内脂肪含量的增殖率。结果:①倒置显微镜下观察分化前3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞浆内无脂滴,分化后3T3-L1前脂细胞呈圆形,胞浆内含有大量的脂滴,脂滴聚集于核周,被油红O染成橙红色,形成"戒环"样形态。②四甲基偶氮唑盐比色法和油红O染色提取法检测结果均显示,不同剂量的胰岛素样生长因子1组中3T3-L1前脂肪细胞的增殖率及细胞内脂肪含量的增殖率均高于空白对照组(P<0.05),胰岛素样生长因子120μg/L组对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化作用最为明显(P<0.05);流式细胞仪的分析结果与四甲基偶氮唑盐比色法及油红O染色提取法的检测结果基本一致。结论:体外细胞培养实验表明,胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化有明显促进作用,其促进作用与浓度并非成正比,而是达到一定剂量后,其促进作用不再增加,而这个剂量接近本实验的最佳剂量值,即20μg/L。

学龄前龋病儿童龈沟液IL⁃6、TNF⁃α、MCP⁃1与CAT分度相关性及对慢性根尖周炎的预测价值研究

目的探讨学龄前龋病儿童龈沟液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与龋病活跃性试验(CAT)分度相关性及对慢性根尖周炎的预测价值。方法选取2020年1月—2021年6月480例3~6岁接受口腔检查儿童,根据龋齿发生情况分为发生组、未发生组,比较2组及不同龋病危险度患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1水平,比较发生慢性根尖周炎(有慢性根尖周炎亚组)、未发生慢性根尖周炎(无慢性根尖周炎亚组)患儿入院时龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1水平,应用Spearman相关性分析患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1与龋病危险度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度预测慢性根尖周炎的价值。结果发生组龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1高于未发生组(P<0.01);随着龋病危险度增加,患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1呈递增趋势(P<0.05);患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1与龋病危险度呈正相关(P<0.01);有慢性根尖周炎亚组龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1高于无慢性根尖周炎亚组(P<0.01);患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度预测慢性根尖周炎的ROC曲线显示,其曲线下面积(AUC)依次为0.732、0.774、0.743、0.745,其中TNF-α预测敏感度最高,CAT分度预测特异度最高;患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1联合CAT分度预测慢性根尖周炎的AUC为0.924,敏感度为0.919,特异度为0.806,高于各指标单独预测。结论学龄前龋病患儿龈沟液IL-6、TNF-α、MCP-1与儿童龋活性及慢性根尖周炎发生密切相关,三者联合CAT分度或可作为预测学龄前龋病患儿并发慢性根尖周炎的有效方案,可为临床防治龋病提供参考。

IGF-1、PGRN、miR-922在急性淋巴细胞白血病患儿血清中表达及相关性分析

目的:分析胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、颗粒蛋白前体(PGRN)、微小RNA-922(miR-922)在急性淋巴细胞白血病(Acutelymphoblasticleukemia,ALL)患儿血清中表达及相关性。方法:选取2020年4月-2023年1月救治中心和新乡医学院第三附属医院收治的110例初诊ALL患儿为观察组,根据ALL危险度分层将ALL患儿分为标危(29例)、中危(45例)、高危(36例),另选取同期110例健康体检儿童为对照组,比较两组、不同危险度分层ALL患儿血清IGF-1、PGRN、miR-922水平,分析三项血清指标与ALL患儿危险度及急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)的相关性及与ALL患儿病情中、高危的关系。结果:观察组血清IGF-1、PGRN、miR-922水平均高于对照组(P<0.05);ALL患儿不同危险度分层血清IGF-1、PGRN、miR-922水平比较:标危<中危<高危(P<0.05);血清IGF-1、PGRN、miR-922水平与ALL患儿危险度及APACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);危险度分析显示,血清IGF-1、PGRN、miR-922为高值时会增加患儿中、高危风险,RR值分别为4.337、3.139、4.475,95%CI分别为2.249~8.364、1.803~5.467、2.189~9.151(P<0.05)。结论:血清IGF-1、PGRN、miR-922水平与ALL发生发展密切相关,且在评估ALL危险度方面具有良好价值。

逍遥丸对代谢相关脂肪性肝炎CYP2E1及FasL/TNF-α信号通路的影响

目的研究逍遥丸治疗代谢相关脂肪性肝炎(MASH)大鼠的机制。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组(CON组,n=8)和模型组(n=16),模型组给予高脂饮食+四氯化碳背部皮下注射+饥饱失常+夹尾,联合刺激4周建立MASH模型,再随机分为MOD组和逍遥丸组(XYW组),每组各8只。XYW组大鼠给予逍遥丸灌胃,其他两组给予0.9%氯化钠溶液灌胃。给药4周后,对不同组别大鼠的血清生化及氧化应激指标进行检测。HE染色和油红O染色对大鼠肝组织进行病理切片观察。Western blot对大鼠肝脏中细胞色素P4502E1(CYP2E1)、凋亡相关因子配体(FasL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达进行检测。RT-qPCR检测肝组织CYP2E1、FasL、TNF-α、TGF-β1 mRNA相对含量。结果XYW组大鼠的一般情况较MOD组有显著改善,肝指数较MOD组下降(P<0.01),体质量指数较MOD组上升(P<0.01);XYW组血清中三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、天冬氨酸氨基转氨酶、丙氨酸氨基转移酶、丙二醛、单核细胞趋化蛋白-1、TNF-α、白细胞介素(IL)-18水平较MOD组降低(均P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶、IL-10水平较MOD组升高(均P<0.05);光镜下可观察到XYW组肝细胞内脂滴含量较MOD组明显减少;XYW组肝组织CYP2E1、FasL、TNF-α、TGF-β1的蛋白水平较MOD组降低(均P<0.05),CYP2E1、FasL、TNF-α、TGF-β1 mRNA相对含量较MOD组降低(均P<0.05)。结论逍遥丸通过调节CYP2E1、FasL、TNF-α、TGF-β1在MASH大鼠肝组织中的转录表达,减少肝脏脂肪酸蓄积,从而达到治疗MASH的目的。