未行调脂治疗的冠心病患者血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9水平与促甲状腺激素的相关性分析

目的探讨未行调脂治疗的冠心病患者血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与血脂各指标,甲状腺功能等影响因素的相关性。方法选择2013年7月~2014年3月在首都医科大学附属北京安贞医院就诊的未行调脂治疗的胸痛患者160例,入院后根据冠状动脉造影结果分为冠心病组102例和对照组58例。收集临床资料,采集空腹静脉血,检测血常规、血生化、甲状腺功能等各项指标。结果冠心病组糖尿病、吸烟、空腹血糖、糖化血红蛋白、LDL-C明显高于对照组,HDL-C明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。冠心病组促甲状腺激素(TSH)及PCSK9明显高于对照组[(2.26±1.49)mU/L vs(1.88±0.98)mU/L,P=0.038;(0.29±0.28)mg/L vs(0.15±0.22)mg/L,P=0.027]。logistic回归分析显示,年龄、吸烟、糖尿病、TSH、LDL-C、HDL-C、脂蛋白(a)、PCSK9是冠心病患者的危险因素(P<0.05)。冠心病患者血浆PCSK9与LDL-C、载脂蛋白B、TSH呈正相关(r=0.524,P=0.004;r=0.412,P=0.021;r=0.571,P=0.021)。结论 TSH和PCSK9共同参与了动脉粥样硬化的形成和发展。PCSK9与TSH存在相关性,两者共同影响了冠心病的发生、发展。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9小分子干扰RNA对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因沉默后对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,初步探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)蛋白表达在其中的作用。方法建立PCSK9小分子干扰RNA(siRNA)模型,培养VSMC,分为空白对照组、阴性转染组和阳性转染组,选取转染效率最高的PCSK9siRNA对VSMC进行干预,分别于12、24、36、48、60h用MTT法测定吸光度(A)值,绘制增殖曲线,观察其对VSMC增殖的影响,转染48h后用Western blot印迹法检测细胞内LRP-1蛋白表达情况。结果与阴性转染组比较,阳性转染组24、36、48和60h的A值明显下降(P<0.05),PCSK9siRNA抑制VSMC的增殖(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染组比较,阳性转染组LRP-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论 PCSK9siRNA能有效抑制VSMC的增殖作用,且这种作用可能与LRP-1蛋白表达上调有一定的关系。

β_3肾上腺素受体对前蛋白转化酶枯草溶菌素9和低密度脂蛋白受体表达的影响

目的观察激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)老年高脂小鼠血脂、肝脏前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)和LDL受体(LDLR)表达水平的影响。方法选择10周龄雄性C57BL/6小鼠10只(A组)。apoE-/-小鼠40只给予高脂饲料饲养至36周龄,随机分为4组,分别为高脂模型组(B组)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组)、β3-AR激动剂小剂量组(D组)、β3-AR激动剂大剂量组(E组),每组10只,共干预12周。采用Beckman CX7全自动生化分析仪,检测血清TC、TG、VLDL/LDL-C、HDL-C水平,采用Western blot测定肝脏PCSK9和LDLR表达水平。结果与B组比较,C组、D组和E组TC、VLDL/LDL-C明显下降,C组、B组、D组LDLR水平明显上调,C组PCSK9水平明显上调(P<0.05,P<0.01);与C组比较,D组和E组TG、PCSK9水平明显下降,D组LDLR水平明显下降,HDL-C水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论β3-AR调脂、升高LDLR、降低PCSK9表达水平是其抗动脉粥样硬化的多重作用机制之一。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9及其影响因素的研究进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是一种新发现不久的蛋白,它可以与低密度脂蛋白受体(LDLRs)结合,使肝细胞表面LDLRs减少,从而降低肝细胞对低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)颗粒的清除能力,进而上调血浆LDL-C水平,促进心血管事件的发生。由此可见,调节PCSK9水平对心血管事件发生风险方面具有潜在作用。本文主要对影响PCSK9相关联的因素进行综述。

原发性高血压患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9与颈动脉粥样硬化的相关性研究

【目的】探讨原发性高血压患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK～9）水平与颈动脉粥样硬化的关系。【方法】根据颈动脉内膜中层厚度（CIMT）将320例原发性高血压患者分为无颈动脉粥样硬化（NCAS）组和颈动脉粥样硬化（CAS）组，检测各组患者的体质量指数（BMI）、血压、血糖、血脂、血清PCSK-9水平，logistic多元回归性分析患者血清PCSK-9水平与CIMT的相关性。【结果】CAS组血清PCSK-9水平为（366．9±72．3）mg／L显著高于NCAS组的（280．2±61．4）mg／L，差异有统计学意义（P〈0．05）。logistic多元回归分析发现，PCSK-9是原发性高血压患者颈动脉粥样硬化的独立危险因素。【结论】原发性高血压患者血清PCSK-9水平与CIMT呈正相关，可能是动脉粥样硬化疾病的独立危险因素。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9相关影响因素及其抑制剂的研究进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9（prorotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9）是一种分泌型丝氨酸蛋白酶,与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,使肝细胞表面LDLR减少,进而使肝细胞对LDL-C颗粒清除能力下降,血浆LDL-C水平升高,导致动脉粥样硬化的发生和发展,促进心脑血管事件的发生。

血浆前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型水平与冠状动脉钙化的关系

目的:探讨血浆前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型(PCSK9)水平与冠状动脉钙化(CAC)的关系。方法:连续入选未接受降脂治疗的因胸痛就诊的患者380例,均接受计算机断层摄影术扫描,并测量CAC积分。CAC积分>0分患者为CAC组(n=156),CAC积分=0分患者为非CAC组(n=224)。再将CAC组根据CAC积分进一步分为三个亚组,CAC积分=1~100分亚组(n=53),CAC积分=101~400分亚组(n=64),CAC积分>400分亚组(n=39)。收集临床资料,测定血浆PCSK9水平。对血浆PCSK9水平与CAC积分之间的关系进行统计学分析。结果:CAC组患者血浆PCSK9水平显著高于非CAC组[(260.23±69.34)ng/ml vs(205.46±53.21)ng/ml,P<0.001]。三个CAC积分亚组的PCSK9水平分别为CAC积分=1~100分亚组:(247.38±72.68)ng/ml;CAC积分=101~400分亚组:(264.87±57.63)ng/ml;CAC积分>400分亚组:(295.33±69.06)ng/ml。随着CAC积分增加,各亚组血浆PCSK9水平逐步升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。经多因素回归分析,调整传统心血管危险因素后证实,PCSK9水平与CAC呈正相关(β=0.584,P=0.002)。此外,血浆PCSK9预测CAC最佳临界值为228.58 ng/ml,敏感性67%,特异性71%。结论:血浆PCSK9水平与CAC之间呈正相关。

氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9与炎症因子的关系

目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与炎症因子表达的关系。方法用ox-LDL处理HUVECs 0小时、12小时、24小时、36小时、48小时,分别检测PCSK9、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、C反应蛋白(CRP)mRNA和蛋白的表达以及核因子-κB(NF-κB)核位移。Lipofectamine 2000转染PCSK9小分子干扰RNA(PCSK9siRNA)进入HUVECs 6小时后,加入ox-LDL处理24小时,分别检测PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的表达以及NF-κB核位移。结果随着ox-LDL处理时间的增加,PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA的表达上调、NF-κB的核位移明显增加,以24小时表达(核位移)最明显,随后表达(核位移)逐渐减少(P<0.05);细胞培养上清液中IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP蛋白的浓度随着时间的推移逐渐增加,48小时达到峰值,与0小时比较,48小时增加最明显(P<0.01)。siRNA组PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA和蛋白的表达以及NF-κB核位移较阴性转染组明显降低(P<0.01)。结论 PCSK9siRNA能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs炎症因子的表达,PCSK9可能参与了炎症反应的调节。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9在动脉粥样硬化中的作用

人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来新发现的一种与常染色体显性高胆固醇血症密切相关的基因,编码前蛋白转化酶NARC-1。PCSK9除了通过调节细胞表面低密度脂蛋白受体(LDLR)水平参与脂质代谢外,亦直接对血管壁细胞发挥毒性作用,从而在动脉粥样硬化的发生、发展中起重要作用。因此,阐明PCSK9在动脉粥样硬化发生中的作用及机制,对高胆固醇血症和动脉粥样硬化的临床药物应用具有重要意义。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9参与动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性脂蛋白代谢障碍性血管的炎性疾病,会引起缺血性心脑血管事件发生[1]。AS的病理过程包括血管内皮细胞膜的损伤及渗透能力的改变,血管平滑肌细胞内膜迁移和增殖,巨噬细胞为主的炎性反应和泡沫细胞的积聚等[2]。遗传和环境因素相互作用是导致AS发生和发展的关键。

调脂新药前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的研究进展

2003年Abifadel等首次在2个常染色体显性遗传高TC血症家系中,发现前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9）基因功能增强型变异,变异患者LDL-C明显增高,多项研究得到了相似的结果[1]。之后人们又研究发现,PCSK9基因功能失活型变异,变异患者其LDL-C水平明显降低,冠心病发病率也明显降低。动物实验亦证实,PCSK9在转录后水平调节LDLC受体活性。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂研究的进展

降胆固醇治疗是预防心血管疾病的重要方法之一。尽管他汀类药物的使用降低了心血管事件的发生率及死亡率,但仍有部分患者对他汀类药物不耐受或经强化他汀治疗后血脂仍不达标。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂是一种新型降脂药物,因其疗效显著,受到医学界的广泛关注。本文就PCSK9抑制剂在心血管疾病中的作用及研究进展做一综述。

干预前蛋白转换酶枯草溶菌素9靶点的新进展

在前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)之前的时代,学者们认为胆固醇稳态完全依赖于严格的细胞内调节系统。他汀类药物通过拮抗胆固醇合成过程中的关键限速酶,降低肝脏胆固醇合成,成为目前调脂治疗的基石。

前蛋白转换酶枯草溶菌素9单抗在亚洲人群治疗中的心血管获益

在防治动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease,ASCVD)的过程中,除了传统的他汀类药物外,以人前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)作为代表的新型调脂靶点也受到临床越来越多的关注。FOURIER和ODYSSEY OUTCOME研究在大样本高危ASCVD人群中应用PCSK9单克隆抗体(PCSK9单抗)均取得了显著的心血管获益。

新疆维吾尔自治区维吾尔族和汉族缺血性卒中与前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因多态性的关系

目的 探讨新疆维吾尔自治区（简称新疆）维吾尔族（简称维族）、汉族前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）基因9号外显子I474V （rs652556）位点I/V多态性与缺血性卒中（IS）的关系.方法 收集2012年8月至2013年12月于新疆医科大学第一附属医院神经内科就诊的IS患者407例（汉族219例,维族188例）及同期就诊的健康体检者425名（汉族255名,维族170名）,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法测定I474V基因的多态性,并抽样测序验证.结果 （1）IS组和对照组Ⅱ及Ⅳ基因型之间甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平的差异无统计学意义;总胆固醇水平差异有统计学意义;低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平的差异有统计学意义;IS组和对照组Ⅱ基因型的总胆固醇、LDL-C、HDL-C水平差异均有统计学意义;IS组Ⅳ基因型总胆固醇、LDL-C的水平明显高于对照组,差异有统计学意义.（2）IS组和对照组在I474V位点的基因型频率分布[9.5％ （77/814）与4.5％ （38/850）]差异有统计学意义（x2 =16.09,P=0.000）.IS组和对照组在1474V位点的等位基因频率分布[18.9％（77/407）与8.9％（38/425）]差异有统计学意义（x2=17.38,P=0.000）.（3）新疆维族、汉族I474V位点Ⅳ基因型频率[27.7％（52/188）与11.4％（25/219）,x2=17.40,P=0.000;12.9％ （22/170）与6.3％（16/255）,x2=5.57,P=0.018]的分布差异有统计学意义;新疆维、汉两民族I474V位点的Ⅴ等位基因频率分布[13.8％ （52/376）与5.7％（25/438）,x2=15.58,P=0.000;6.5％ （22/340）与3.1％ （16/510）,x2=10.44,P=0.001]差异有统计学意义.（4）新疆维族IS患者与对照组间I474V位点的Ⅳ基因型和Ⅴ等位基因频率[27.7％（52/188）与12.9％ （22/170）,x2=11.79,P=0.001; 13.8％ （52/376）与6.5％（22/340）,x2=10.44,P=0.00l]差异有统计学意义;但汉族中I474V位点的基因型和等位基因频率的分布差异无统计学意义.结论 PCSK9基因I474V多态性位点主要以Ⅱ和Ⅳ基因型存在,IS患者PCSK9基因I474V多态性与总胆固醇、LDL-C水平升高相关联,新疆维、汉两民族I474V多态性存在差异,维族PCSK9基因9号外显子I474V多态性与IS的发生有相关性,Ⅳ可能是缺血性卒中的易患基因型,Ⅴ等位基因可能是新疆维族的遗传易患标志.

9型前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin抑制药在调脂治疗中的应用进展

9型前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin(PCSK9)抑制药通过抑制低密度脂蛋白受体的降解,发挥重要的调脂作用。在PCSK9抑制药中,PCSK9单克隆抗体是研究最多、疗效最稳定的药物。alirocumab、evolocumab和bococizumab是研究和应用最多的PCSK9单克隆抗体。上述药物在单独使用、和他汀类药物合用以及用于他汀类药物不耐受者、家族性高胆固醇血症等的调脂治疗中发挥重要作用。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂:调节血脂的新策略

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)主要促进肝脏中低密度脂蛋白受体(LDLR)降解来调节胆固醇代谢。PCSK9功能获得型基因突变是导致常染色体显性遗传性高胆固醇血症的原因之一,而PCSK9功能缺失型基因突变则与低水平的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和冠心病发生的减少有关。目前,PCSK9已经成为新的调节血脂药物作用靶点,两种单克隆抗体类PCSK9抑制剂已完成Ⅱ、Ⅲ期临床试验。本文就单克隆抗体类PCSK9抑制剂的最新研究进展作一综述。

肿瘤坏死因子-α抑制乙型肝炎病毒复制的作用与其上调原蛋白转化酶的关系

目的探讨TNF-α对原蛋白转化酶（PC）表达的影响，以及与其抑制HBV复制作用的关系。方法常规培养的HepG2．2．15细胞加20μg／L重组TNF-α或（和）20μmol／LPC抑制剂（DEC），作用18h，收集细胞，提取细胞总RNA和衣壳相关HBVDNA，采用荧光定量PCR技术检测PCmRNA和HBVDNA。计量资料比较采用t检验。结果以空白对照组的表达水平为基数（1），20μg／L重组TNF-α作用18h后，HepG2．2．15细胞内7种PCmRNA均显著上调（PCI／3、PC2、furin、PC4、PC5／6、PACE4和PC7／8mRNA的表达水平分别为3．3±0．7、79．3±3．3、77．5±1．3、19．2士3．1、1．3±0．1、1．4±0．2、274．8±7．1，均P〈0．05）。与空白对照组相比，20μg／L重组TNF-α作用18h后，衣壳相关HBVDNA水平明显降低（0．21：1，t=8．79，P=0．002），20μmol／LDEC显著升高衣壳相关HBVDNA水平（3．84：1，t=7．67，P=0．004），而DEC和TNF-α联合处理组的衣壳相关HBVDNA水平显著高于TNF-α处理组（0．31：021，t=10．49，P=0．007）。结论TNF-α上调PCmRNA表达是其抑制HBV复制的重要中间环节。

老年急性心肌梗死合并2型糖尿病患者PCSK9水平与冠脉病变的相关性分析

目的探讨老年急性心肌梗死合并2型糖尿病患者血清枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)水平及其与冠脉病变的相关性。方法选取老年急性心肌梗死合并2型糖尿病患者46例为观察组,同期住院的老年非糖尿病急性心肌梗死患者34例为阳性对照组,慢性稳定性冠心病患者33例为阴性对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PCSK9水平,分析其与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、糖化血红蛋白(HbA1c)、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)和Gensini积分的相关性。结果 PCSK9、HbA1c、Hs-CRP和Gensini积分在阴性对照组、阳性对照组、观察组均依次升高,组间多重比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血清PCSK9水平与Hs-CRP、Gensini积分呈正相关(P<0.05),与HbA1c、TG、TC、LDL-C、HDL-C无相关性(P>0.05)。结论 PCSK9与冠脉病变程度呈正相关,可用于临床辅助判断老年急性心肌梗死合并2型糖尿病患者冠脉病变严重程度。

PCSK1和PCSK2单核苷酸多态性与新诊断2型糖尿病的相关性分析

目的探讨重庆地区汉族人前蛋白转化酶枯草溶菌素1（PCSK1）的rs3811951和PCSK2的rs2021785位点单核苷酸多态性（SNPs）与新诊断2型糖尿病（T2DM）之间的相关性。方法采用病例-对照法,收集新诊T2DM组（n=227例）与对照组（n=152例）的临床资料及血标本,测定血糖、血脂等生化指标,采用质谱技术对rs3811951和rs2021785位点进行SNPs分型。结果 PCSK2的rs2021785位点次要等位基因频率在T2DM组显著低于对照组（20.04%vs 26.64%,P=0.0335）,次要等位基因A的携带者患T2DM的风险显著降低（OR=0.69,95%CI 0.49~0.97,P=0.0335）。PCSK2基因的rs2021785位点AA基因型频率在T2DM组显著低于对照组（6.6%vs 10.5%,P〈0.05）,rs2021785位点基因型分布与T2DM显著相关（共显性模型中OR=0.627,95%CI 0.41~0.96,P=0.0308）。PCSK1基因rs3811951位点等位基因频率及基因型分布在T2DM组和对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论重庆地区汉族人群中PCSK2基因rs2021785位点的多态性与T2DM显著相关,而PCSK1基因rs3811951位点多态性与T2DM无显著相关性。