前蛋白转换酶枯草溶菌素9抑制剂降低脂蛋白(a)作用的机制

脂蛋白(a)(lipoprotein(a),Lp(a))在结构上与低密度脂蛋白相似,是动脉粥样硬化性心血管疾病发病的独立危险因素和潜在的治疗靶点。前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)抑制剂可有效降低Lp(a)的循环水平并减少心血管事件风险。本文综合近年来的相关研究,阐述PCSK9抑制剂减少Lp(a)合成和促进其降解的相关机制,分析该领域所面临的挑战和未来的发展方向。

前蛋白转换酶Furin和PC7在小鼠母胎界面的动态表达及其在胚胎粘附和扩展中的作用

通过免疫组化、免疫荧光和小鼠胚胎-子宫内膜上皮细胞共培养体系,研究了前蛋白转换酶Proprotein Convertases(PCs)家族中的Furin和PC7在小鼠妊娠早期子宫和胚胎中的表达及对胚胎植入的影响。结果显示:Furin和PC7在妊娠D1-D4小鼠子宫的腺上皮和D5-D7小鼠子宫的蜕膜、腺上皮高表达;PC7在植入前胚胎的2-细胞和4-细胞期表达很低,8-细胞期表达开始增加,囊胚期滋养外胚层有显著的高表达。Furin的抑制剂Dec-RVKR-CMK可显著抑制共培养体系中胚胎的粘附和扩展。以上结果表明,Furin在植入期胚胎的粘附和扩展中发挥重要作用。此外,Furin和PC7可能参与子宫内膜蜕膜化和早期胚胎发育。

前蛋白转换酶枯草溶菌素9纳米疫苗的构建与细胞吞噬效率的体外实验研究

目的:制备前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)纳米疫苗,并初步探讨树突状细胞(dendritic cells,DC 2.4)对纳米疫苗的体外吞噬效率。方法:选取PCSK9207-223为抗原肽,牛血清白蛋白(bovine se-rum albumin,BSA)为载体蛋白,用"还原-热聚-氧化"法将BSA分子转变为BSA纳米颗粒(BSA nanoparticle,BN),PCSK9多肽链接在BN表面合成纳米疫苗(BSA-PCSK9 nanoparticle,BPN),PCSK9多肽与分子BSA直接链接合成分子疫苗(BSA-PCSK9,BP)。动态光散射测定BN、BPN粒径和电位大小,透射电子显微镜观察形貌;SDS-PAGE电泳分析抗原负载情况;检测BPN不同时间点的粒径变化反映其在生理环境下的稳定性;BPN与DC 2.4细胞共孵育24 h,增强型细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK8)检测DC2.4细胞活性,反映BPN生物相容性;流式细胞仪检测DC 2.4对纳米疫苗的吞噬情况。结果:合成的BPN粒径为(68.2±3.1)nm、电位为(?14.8±0.6)mV,透射电子显微镜观察显示BPN近球形;SDS-PAGE电泳结果显示BPN相对分子质量增加,证明短肽链接成功;模拟生理环境下,BPN粒径在144 h内保持稳定;增强型CCK8检测结果显示DC2.4细胞活性均大于100%;流式细胞仪检测结果显示,相比BP,DC 2.4对BPN的吞噬效率更高。结论:BPN体外稳定性及生物相容性好,易于被DC吞噬。

血浆PCSK9水平预测急性ST段抬高型心肌梗死近期MACEs的临床价值

目的 探讨前枯草溶菌素前蛋白转换酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)水平预测急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segmentelevation myocardial infarction,STEMI)患者近期主要不良心血管事件(major adverse cardiovascular events,MACEs)的临床价值。方法 连续招募STEMI患者90例,所有患者入院后均接受经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI),抽取静脉血采用酶联免疫吸附实验法检测外周血PCSK9水平,同时依据PCSK9中位数将患者分为高PCSK9组(n=45)及低PCSK9组(n=45),所有患者出院后均规律随访,记录患者MACEs,最长随访时间为30 d,通过ROC曲线评价PCSK9预测STEMI患者近期MCAEs的临床价值。结果 高PCSK9组年龄、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)水平、MACEs发生率高于低PCSK9组,无事件生存时间短于低PCSK9组(P<0.05)。PCSK9水平与LDL-C和cTnⅠ呈正相关,与无事件生存时间呈负相关(P<0.05)。PCSK9预测STEMI患者MACEs的曲线下面积为0.843,95%CI:0.722~0.964。高PCSK9水平是影响STEMI患者30 d内MACEs的独立危险因素(P<0.05)。结论 高PCSK9水平患者MACEs发生率高,无事件生存时间短,且PCSK9与机体炎症指标及血脂紊乱程度有关,其是预测STEMI患者介入术后30 d内MACEs的潜在标记物,也是影响MACEs发生的独立危险因素。

前体蛋白转换酶furin和它加工的前体蛋白

前体蛋白是蛋白质的前体分子,需要在细胞内经各种加工修饰,才能转变成有生物活性的蛋白质。前体蛋白转换酶是在蛋白质分泌通道中对前体蛋白在特定的位点上进行剪切加工的酶。Furin是前体蛋白转换酶大家族中重要的一员,参与前体蛋白加工修饰的过程。Furin的作用底物不仅包括神经肽和肽类激素,还包括许多生长因子、受体、血浆蛋白酶及细菌外毒素等,具有重要的生物学功能。文章对Furin表达加工的过程、结构及Furin相关抑制性药物等方面进行归纳和总结,并且针对Furin加工的前体蛋白和位点进行了汇总。

PCSK9 siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达的影响

目的:研究前蛋白转换酶枯草溶菌素9(PCSK9)siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达的影响。方法:以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,应用Lipofectamine 2000转染不同浓度PCSK9 siRNA进THP-1源性巨噬细胞中,RT-PCR及Western blot筛选出最有效的siRNA,再转染入THP-1源性巨噬细胞,24 h后加入ox-LDL处理24 h,采用油红O染色检测细胞内脂质蓄积情况,RT-PCR分析细胞CD36、SR-A1及SR-B1表达。结果:浓度为80 nmol/L的PCSK9 siRNA基因沉默效应最佳;油红O染色结果表明ox-LDL组细胞内脂质蓄积情况最为明显,PCSK9 siRNA转染组次之;PCSK9 siRNA转染组CD36 mRNA表达水平相对于ox-LDL组降低(P<0.05),而ox-LDL组和PCSK9 siRNA转染组SR-A1及SR-B1 mRNA表达无明显差异。结论:PCSK9可能通过影响摄取脂质的细胞膜表面受体CD36表达,参与动脉粥样硬化的发生发展。

PC5、PC7、VEGF-C、D及其受体VEGFR-3mRNA在非小细胞肺癌淋巴转移中的表达及意义

背景与目的:浸润与转移是恶性肿瘤的重要生物学特性,经血管和淋巴管播散是肿瘤转移的两条重要途径。淋巴管是实体肿瘤转移的最早通路之一,但与肿瘤血管相比,对肿瘤淋巴管的研究甚少。近年,随着血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C@、血管内皮生长因子-D(vascular endothelial growth factor-D,VEGF-D@以及多种淋巴管内皮特异性标志物,如淋巴管内皮透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1,LYVE-1@、血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3@、肾小球足突膜蛋白(glomerular podocyte membrance mucoprotein,podoplanin@和同源异型盒转录因子(the homeobox transcription factor,Prox-1@等先后被鉴定,淋巴管生成已成为肿瘤转移研究领域的热点之一。本文探讨前蛋白转换酶(proprotein convertase,PC@5、7,VEGF-C、-D及其受体VEGFR-3在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC@中的表达规律及其在NSCLC发生发展、淋巴转移及预后中的意义。方法:以20例经病理确诊的NSCLC组织、肿瘤周边组织为实验组,以9例肺良性病变组织为对照组,采用实时荧光定量RT-PCR方法对上述组织中PC5、PC7、VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3mRNA的表达进行定量分析。结果:①NSCLC组织中PC5、PC7、VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3mRNA的表达量均显著高于肿瘤周边组织及肺良性病变组织(P<0.05@。②PC5、PC7、VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3mRNA的表达量与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤的大小、组织学类型、分化程度无关,但与肿瘤的淋巴结转移(P=0.000,P=0.000,P=0.012,P=0.000,P=0.004@、PTNM分期(P=0.011,P=0.012,P=0.013,P=0.011,P=0.028@显著相关。③PC5与VEGF-C(r=0.461,P=0.041@、VEGF-D(r=0.793,P=0.000@及VEGFR-3(P=0.498,P=0.026@mRNA表达存在相关性;PC7与VEGF-C(r=0.450,P=0.047@、VEGF-D(r=0.699,P=0.001@及VEGFR-3(r=0.616,P=0.004@mRNA表达存在相关性。并且,VEGF-C与VEGF-D(r=0.532,P=0.016@、VEGF-C与VEGFR-3(r=0.607,P=0.001@及VEGF-D与VEGFR-3mRNA的表达(r=0.451,P=0.048@均存在相关性。结论:淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3及调节其成熟的转换酶PC5、PC7mRNA在NSCLC中表达显著增高,并且通过VEGF-C、VEGF-D/VEGFR-3信号通路诱导淋巴管内皮细胞新生和淋巴管生成,促进淋巴结转移和肿瘤生长;VEGF-C、VEGF-D及其受体VEGFR-3可能成为检测NSCLC淋巴转移和评估预后的重要分子指标;实时荧光定量RT-PCR技术是一种简单客观敏感的检测肿瘤微转移的方法,有助于早期肺癌淋巴微转移的检测。

PCSK9抑制剂在缺血性卒中应用的研究进展

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高是动脉粥样硬化的重要危险因素,降低LDL-C可有效减少心脑血管疾病的风险。前蛋白转换酶枯草溶菌素kexin 9型(PCSK9)抑制剂已被证实可以改善心血管疾病的预后。目前临床上已经广泛应用于冠状动脉硬化性心脏病急性期及二级预防的治疗,但其在缺血性脑卒中的应用及对卒中预后的影响报道较少。该文对PCSK9抑制剂在缺血性卒中应用的研究进展作一综述。

后他汀时代动脉粥样硬化性心血管疾病患者降脂治疗的研究进展

目前冠心病患者的发病率逐年增加,动脉粥样硬化是其主要危险因素,降低低密度脂蛋白胆固醇的水平成为防治动脉粥样硬化的关键方法之一。关于血脂管理,大致分为三个时代:他汀前时代、他汀时代和后他汀时代。随着血脂管理指南的更新,低密度脂蛋白胆固醇的靶目标值逐渐降低,越来越多的降脂药物可供选择,在他汀的基础上联合降脂治疗已成为动脉粥样硬化性心血管疾病患者未来的趋势。

治疗高胆固醇血症的小干扰RNA药物英克司兰

作为新型小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)降脂药物,英克司兰于2023年8月22日在我国获批,商品名为乐可为,该药物直接靶向递送至肝细胞,阻断前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase dubtilisin/kexin type 9,PCSK9)的合成,降低血液循环中低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL-C)的水平,从而达到降脂的疗效。该药物降脂作用高效、长效且具有良好的安全性、耐受性,唯一不良反应仅为注射部位的不良事件,轻、中度肝肾功能不全患者及老年人使用该药物时也无需调整剂量,与其他降脂疗法联合用药时效果更优。本文对其作用机制、药效学、药动学、安全性评价及临床研究等进行综述。

PCSK9抑制剂对CHIP患者治疗策略转变的意义与展望

高危复杂冠心病患者(CHIP)因冠脉病变解剖复杂或病情危重,传统药物治疗效果有限,往往需要高风险的复杂冠脉介入治疗。近年来,前蛋白转换酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂在冠心病的心血管不良事件获益上表现优异,对于CHIP这类特殊患者,PCSK9抑制剂的应用是否可减少支架植入,甚至对部分CHIP患者实现“药物血运重建”?乃至改变CHIP患者治疗策略选择,降低其需要高危介入治疗的风险,以及PCSK9抑制剂在CHIP患者的最佳应用时机,将是未来研究的热点。

PCSK9影响糖尿病大血管粥样硬化病变的研究进展

糖尿病与心、脑、肾等生命器官疾病有着极为密切的联系,与心血管疾病的关系尤为密切,可以有大血管并发症,也可以有微血管并发症等。前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9),位于染色体1p32,长22kb,12个外显子编码一个692-氨基酸蛋白,主要由肝脏分泌,但在其他器官中也有少量表达。