HBeAg阴性乙型肝炎患者前C区G1896A变异及其与前S1抗原的关系

HBV感染初期表现为血清HBV DNA水平升高，随之出现HBeAg；当患者体内出现抗-HBe时，血清HBeAg转阴，HBV DNA水平则会降低。然而，有部分HBeAg转阴的患者仍表现为慢性乙型肝炎（乙肝）。有研究表明，前C区或核心启动子变异是导致HBeAg阴性慢性乙肝的原因之一，

HBeAg阴性的慢性HBV感染者乙肝病毒前C区G1896A变异分析

目的:了解HBeAg阴性的慢性HBV感染者乙肝病毒前C区G1896A变异情况,为临床乙肝诊治提供科学依据。方法:北京市海淀医院HBeAg阴性的慢性HBV感染者496例,其中HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者380例,非活动期HBV感染者196例,取血液及肝组织样本进行HBV血清学标志检测(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc)、丙氨酸谷丙转移酶(ALT)、HBV DNA定量检测;HBV前C区G1896A变异检测;肝组织学检查;采用SPSS13.0软件进行数据分析。结果:两组患者血清中均检测到HBV DNA,其中HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者组检出率100%(296/296),平均值为4.90±1.49log10拷贝数/毫升,非活动期HBV感染者组检出率42.0%(84/200)平均值为3.22±0.59 log10拷贝数/毫升,两组比较HBV DNA载量差异有显著性;在HBV DNA载量>1000拷贝/ml的病例中HBeAg阴性慢性乙型肝炎组的乙肝病毒存在前C区G1896A变异,发生率为83.8%(248/296),非活动期HBV感染组乙肝病毒前C区G1896A也存在变异,发生率为33.3%(28/84),两组变异发生率比较差异有显著性;非活动期HBV感染者组中存在HBV前C区G1896A变异患者6个月后有2例ALT和HBV DNA载量较前升高。结论:e-抗原阴性慢性HBV感染者存在变异,前C区G1896A变异所导致HBeAg表达水平低下或不表达,但仍有HBV DNA活动性复制,临床诊疗中要予以充分重视。

慢性乙型肝炎患者HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与乙型肝炎自然史、血清HBsAg定量及疾病程度的相关性

目的研究HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与HBV自然史、血清HBsAg水平间的相关性及对疾病严重程度的影响。方法分别各选取40例HBV野生株、前C区G1896A或核心启动子1762/1764变异以及两者联合变异的慢性乙型肝炎感染者为研究对象。采用PCR反向点杂交技术检测HBV前C区G1896A位点、核心启动子1762/1764变异及HBV基因分型。同时检测HBsAg定量、HBeAg、HBV DNA定量、肝脏生化指标等。结果(1)HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异患者的年龄、ALT高于野生株感染者(P<0.001),Alb低于野生株感染者(P<0.001)。(2)HBV自然史免疫耐受期以野生株感染为主(P<0.001),免疫清除期、低(非)复制期野生株及PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株差异无统计学意义(P>0.05),再活动期以PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株为主(P<0.001)。(3)PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株的HBsAg水平(lgIu/mL)、HBeAg阳性率较野生株组降低(P<0.001),基因C型、HBV DNA水平(≥6 lg拷贝/mL)较野生株组差异无统计学意义(P>0.05)。(4)HBV PC G1896A或/和BCP1762/1764变异中肝硬化患者多于野生株(P<0.05)。结论慢性HBV感染者前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与乙型肝炎自然史、HBsAg水平、HBeAg的状态及疾病严重程度相关。

乙肝病毒前C区1896G→A变异孕妇的胎盘细胞免疫研究

目的探讨发生前C区1896G→A变异的HBV经胎盘途径传播机制。方法将61名携带乙肝病毒孕妇分为2组，32名HBV前C区1896G→A变异的孕妇为研究组（又称为变异组），29名HBV前C区1896G→A非变异的孕妇为对照组（又称为非变异组）。结果HBV前C区1896G→A变异的胎盘中CD3阳性的T淋巴细胞和CD68阳性的巨噬细胞数（Hofbauer细胞）显著增加。两组CD68阳性的巨噬细胞相应的平均计数：研究组（22．7±4．5227），对照组（9．5±2．173），方差分析结果显示两项指标研究组与对照组比较均有显著差异（P〈0．01）。变异组IL2的表达增强，两组比较有统计学意义（X^2=25．2454：P〈0．01）。结论乙肝病毒发生前c区1896G→A变异后，胎盘感染HBV机率增加，且T淋巴细胞和Hofbauer细胞介导的细胞免疫可能有所增强。

慢性乙型肝炎前C区G1896A基因变异对HBV复制及疾病严重程度的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异对乙型肝炎病毒复制及疾病严重程度的影响。方法选取43例慢性乙型肝炎及49例乙型肝炎肝硬化患者为研究对象。采用PCR技术检测HBV前C区G1896A位点变异及乙型肝炎基因分型。同时检测HBeAg、HBV DNA定量、肝功能血清生化指标。结果(1)发生HBV前C区G1896A变异患者的年龄大于野生株感染者(P<0.01),发生肝硬化的可能性更大(P<0.01)。(2)随着变异株感染率的增加,HBeAg阴性率较野生株组增加(P<0.01),基因C型较野生株组增加(P<0.05),HBV DNA水平降低差异意义(P>0.05)。结论 HBV前C区G1896A变异与HBeAg的状态,HBV DNA的复制及疾病严重程度相关。

乙型肝炎病毒前C区1896、基本C区启动子区1762/1764变异对拉米夫定抗病毒疗效的影响及其临床意义

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异和基本C区启动子(BCP)区A1762T/G1764A双变异对拉米夫定(LAM)抗病毒疗效的影响及其临床意义。方法收集上海及其周边地区34例慢性乙型肝炎患者,单用LAM或LAM+聚乙二醇干扰素α-2a进行抗病毒治疗共48周,应用Trugene HBV genotyping试剂盒测定分析治疗前(0周)、治疗过程中(24周)、治疗结束时(48周)及随访结束时(72周)RT区YMDD变异;采用HBV基因多态性检测芯片试剂盒测定前C区1896、BCP区1762/1764位点的变异情况。结果在治疗前有9例患者检测出前C区G1896A变异,均为HBVe抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎患者;9例前C区G1896A变异患者中7例治疗应答(77.8%,7/9),BCP区A1762T/G1764A变异在治疗应答者与无应答者中差异无统计学意义;3例患者分别在治疗24和48周时检测到YMDD变异,对治疗均无应答。结论慢性乙型肝炎患者治疗前血清HBV DNA变异状态可能影响LAM抗病毒治疗应答及YMDD耐药变异株的复制能力。

HBV前C/C基因启动子区变异与HBeAg阴性CHB患者肝组织病理变化的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C/C基因启动子区变异与HBe Ag阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织病理变化的关系。方法：将2012年4月至2013年12月在广州市第八人民医院住院诊治所有伴肝活检的HBeAg阴性CHB患者71例纳入本项研究,提取血清DNA后通过巢式PCR扩增HBV的S基因区与前C/C基因启动子区并测序分析,Logistic回归分析与显著性肝脏组织学异常相关的病毒性因素指标。结果：基因型B患者组与基因型C患者组比较,显著性肝脏炎症发生率（15.8%vs.27.3%,χ^2=1.398,P=0.237）及显著性肝纤维化发生率（71.1%vs.84.4%,χ^2=1.926,P=0.165）均无显著差异。纳入年龄、性别、HBV基因型以及变异位点（T1753V、A1762T/G1764A、A1846T和G1896A）进行Logistic回归分析,HBV基因的A1762T/G1764A变异与显著性肝脏炎症相关（OR=4.296,P=0.037）,而年龄、性别、基因型和其他位点变异与显著性肝组织病理学改变无显著相关性（均P〉0.05）。结论：HBV前C/C基因区变异可能可作为评估肝组织病理变化的生化指标。

乙肝病毒前C基因区1896位点变异的实验研究

目的探讨慢性乙肝病人血清HBV DNA前C基因区nt1896的变异情况及其与HBV DNA水平及转氨酶(ALT)关系。方法将172例慢性乙肝患者分为两组:大三阳组(106例)和小三组(66例)。检测ALT、HBV DNA及前C区nt1896的变异情况。结果大三阳组与小三阳组HBV DNA阳性率有显著差异(P<0.05),nt1896变异率无显著差异(P>0.05)。小三阳患者中ALT升高组(>40 U/L)HBV DNA(+)患者nt1896变异率100%,而ALT正常组HBV DNA(+)患者nt1896变异率30%(3/10)(P<0.05)。结论大三阳和小三阳慢性乙型肝炎病人都存在较高的前C区nt1896变异率(P>0.05)。前C区nt1896变异可能是影响HBV DNA复制的一个因素。

乙肝病毒前C区A1896变异与机体细胞免疫功能的关系

目的 :探讨慢性乙型肝炎患者乙肝病毒 (HBV)前C区A1896变异与机体细胞免疫水平的关系。方法 :对91例慢性乙肝患者通过流式细胞分析技术 (FCM )检测外周血T淋巴细胞亚群 ,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清细胞因子 (IFN -γ、TNF -α和IL -2)水平 ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增HBVDNAC基因区片段 ,并对PCR产物直接测序。结果 :发生A1896变异者49例 ,变异率为53 85 % ,随病情加重A1896变异率逐渐增加 ,以重型肝炎组最高 ;变异株组IFN -γ、TNF -α水平明显增高 ,CD8+细胞相对数逐渐下降 ,CD4+/CD8+比值逐渐升高 ,差别有统计学意义 ,而CD4+相对数及IL -2水平比较差别无统计学意义。结论 :A1896变异普遍存在于慢性乙型肝炎患者中 ,且随病情加重变异株感染率逐渐增加 ,单纯变异株的比例也随之增高 ;A1896变异株可能通过改变HBcAg 的表达及分布 ,激活大量的细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)释放细胞因子 。

探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒相关的进展性肝病的关系

目的探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒(HBV)相关的进展性肝病的关系。方法选择172例HBV感染者,采用PCR-RFLP进行A1896变异的检测,并对其临床意义进行分析。结果172例患者A1896变异的总体检出率为45.9%。在A1896变异株和野生株中,慢性无症状携带者(ASC)、慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、慢性重型肝炎(CSH)、肝细胞癌(HCC)的构成比差异有统计学意义(P<0.05)。CHB、LC、CSH、HCC的A1896变异率分别为39.7%、52.0%、50.0%、74.1%,显著高于ASC的12.5%(P<0.05)。进展性肝病(包括CSH、LC、HCC)的A1896变异率为59.0%,显著高于CHB的39.7%(P<0.05)。慢性乙型肝病不同临床类型的A1896的野生株、变异株构成比差异无统计学意义(P>0.05)。HBeAb阳性组的A1896变异率为73.2%,显著高于HBeAg阳性组的28.1%(P<0.05)。A1896野生株HBeAg阳性率显著高于变异株(45.2%vs 19.0%,P<0.05)。变异株HBV-DNA复制的均数水平显著高于野生株[(9.55±4.65)lg copies.L-1vs(10.35±4.49)lg copies.L-1,P<0.01]。结论A1896变异与HBV相关的进展性肝病有关,但与CHB的炎症活动程度无关。A1896变异株的HBeAg阴性率和HBV-DNA病毒载量较野生株高,前者使HBV易逃避免疫清除,后者引起疾病逐步进展。

乙型肝炎病毒DNA的前C区1896位点变异与DNA水平变化的研究

目的 探讨HBVDNA前C区 1896位点变异与HBVDNA水平的变化。方法 采用等位基因特异引物PCR方法和荧光定量PCR方法对 95例乙型肝炎病毒感染者血清的HBVDNA1896位点变异 (野生型 /突变型 )和HBVDNA水平定量进行检测。结果 1896位点变异不同 ,HBVDNA水平不同 ,野生型HBVDNA水平 (6 .0 1± 1.4 3)高于变异型 (4.85± 1.17)和混合感染型 (4.75± 1.11) (P <0 .0 1) ,后二组差异不明显 (P >0 .0 5 ) ,不同血清HBe系统乙肝患者和不同类型乙肝患者均可出现 1896位点变异 ,抗HBe阳性组的变异率显著高于HBeAg阳性组和HBe系统阴性组 (P <0 .0 5 ) ;而其HBVDNA水平 (4.5 0± 0 .72 )显著低于HBeAg阳性组 (6 .18± 1.30 ) ,不同临床类型的乙肝病毒感染者的野生型、变异型和混合感染型的1896位点变异检出率之间的比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,它们的HBVDNA水平之间比较也无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 HBVDNA前C区 1896位点变异不同 ,HBVDNA水平不同 ,变异病毒株复制减弱 ,DNA水平较野生型低 ,前C区变异相当常见 ,其与临床病变的关系有待进一步研究。

拉米夫定治疗中HBeAg阳性慢性乙型肝炎病人发生前C区变异

目的:分析在服用拉米夫定过程中,HBeAg阳性的慢性乙型肝炎病人出现前C区变异的临床特点。方法:回顾性分析在服用拉米夫定过程中发生前C区变异的13例慢性乙型肝炎病人,口服拉米夫定100 mg·d-1,44～160 wk先后出现ALT复常后反跳,HBV DNA再次升高。结果:前C区变异可导致病人肝功能明显损害,ALT平均(544±s 324)U·L-1,180～1 249 U·L-1。HBV DNA随即复升(108～1010)拷贝·L-1,其中9例为109拷贝·L-1,2例为1010拷贝·L-1。结论:在拉米夫定治疗中,HBV DNA正常后再次上升,肝功能复常后又明显异常且HBeAg阴性者,首先要考虑前C区变异的可能,应引起高度重视。

HBV-前C区基因变异与乙肝病毒复制的相关性

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异与乙肝病毒复制的相关性。方法选取38例慢性轻度,57例慢性中度,29例慢性重度的乙型肝炎患者为研究对象。采用突变特异PCR技术检测HBV前C基因nt1896位点突变情况,并对血清中HBVDNA进行测序。同时检测乙型肝炎病毒HBeAg/抗-HBe、HBVDNA定量、肝纤维化指标。结果(1)抗HBe阳性者在单纯变异株感染的慢性乙型肝炎患者中所占的比例(84.61%)高于单纯野生株感染者(24.32%)。(2)随着变异株感染率的增加,HB-VDNA的含量增高。(3)随着变异株感染率增加,肝脏纤维化分期的逐渐加重。结论前C区G1896A变异与乙肝病毒的复制程度相关。

南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点

目的探讨南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点.方法随机选择2004年3月～2005年3月南京地区HBV-DNA阳性(荧光PCR)的HBV感染者220例.采用多对型特异性引物PCR法检测HBV基因型,采用特异性引物PCR法检测HBV前C区1896变异株和野生株.结果 HBV感染者中基因型B 71例,基因型C 146例,基因型D 1例,B/C混合型1例,A/B混合型1例,未发现基因型A、E、F存在.有163例HBV感染者发生了前C区1896变异,变异株检出率(单纯变异株/混合变异株)为74.1%.基因型B 78.9%发生了前C区1896变异,基因型C有66.4%发生了C区1896变异,两组比较,差别有显著性意义 (χ2=4.56,P＜0.05).结论南京地区存在HBV基因B、C、D及B+C和 A+B混合型,以B、C型为优势基因型,未发现A、F、E基因型;HBV基因型B前C区1896的变异率较HBV基因型C高.

乙型肝炎患者血清HBV前C区A1896变异的检测分析

目的了解HBsAg(+)/HBcAb(+)/HBeAb(+)的慢性乙肝病人血清乙肝病毒(HBV)DNA前C区A1896的变异情况及其与临床关系。方法对所有试验对象检测肝功能指标,根据检测结果分为丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高组和ALT正常组。用聚合酶链反应杂交(PCR-ELISA)定量检测HBV-DNA并进一步检测HBV前C区A1896位点的变异情况。结果 38例患者中有18例HBV-DNA阳性,其中15例发生A1896位点变异,变异率为83.3%(15/18)。ALT升高组的18例中,血清HBV-DNA阳性13例,阳性率72.2%,平均浓度为9.62×106(1.10×103～1.09×108)拷贝/ml,A1896变异13例,变异率为100%(13/13)。ALT正常组的20例中,HBV-DNA阳性5例,阳性率25.00%,平均浓度2.55×104(3.28×103～4.61×104)拷贝/ml。A1896变异2例,变异率为40%(2/5)。两组比较无论在HBV-DNA阳性率,还是A1896位变异率都具有统计学差异(P<0.05)。结论 HBsAg(+)/HBcAb(+)/HBeAb(+)的慢性乙肝患者存在较高的A1896变异率,ALT升高组HBV-DNA阳性率和变异率均高于ALT正常组(P<0.05),提示HBV A1896位点变异与肝脏病变活动加重和ALT升高有关。

5例HBV前C区1896位点和/或BCP1762、1764位点变异对聚乙二醇干扰素α2a早期应答的影响

目的探讨HBV前C区1896位点和/或BCP1762、1764位点变异对聚乙二醇干扰素α2a早期应答的影响。方法选择5例HBV PC1896和/或BCP1762、1764位点发生变异的慢性乙型肝炎患者,使用聚乙二醇干扰素α2a和/或核苷酸类似物抗病毒治疗,观察患者治疗12周、24周、48周时HBs Ag、HBe Ag、HBV DNA、ALT的变化。结果 5例患者使用聚乙二醇干扰素α2a和/或核苷酸类似物抗病毒治疗后12周、24周均发生了应答。结论 HBV PC1896和/或BCP1762、1764位点发生变异作为亚洲人群聚乙二醇干扰素α2a治疗取得早期应答的预测因素。

乙型肝炎病毒X区T^1762－A^1764和前C区A^1896变异对干扰素治疗的影响

目的：研究乙型肝炎病毒(HBV)基因组X区和前C区热点变异对干扰素(IFN)治疗的影响。方法：采用半套式聚合酶链反应(HN-PCR．)结合限制性片段长度多形态(RFLP)技术检测20例慢性乙型肝炎患者IFN治疗前病毒核苷酸序列的突变。结果：A^1896变异株不影响治疗结束时应答率，6／8例T^1762-A^1764变异株感染者为应答者。停药后12mo时，l例T^1762-A^1764变异株感染者由无应答者变为应答者：在复发者中，既有T^1762-A^1764变异株感染者，又有A^1896变异株感染者，或两者同时存在。结论：T^1762-A^1764变异者近期疗效好，而A^1896变异者不影响近期疗效；T^1762-A^1764变异者远期疗效还有待进一步观察。

慢性乙型肝炎C基因启动子1762/1764双位点和前C区1896位点变异的检测

目的了解慢性乙型肝炎病毒C基因启动子1762/1764双位点变异和前C区1896位点变异的情况以及对血清学的影响,并观察出现1762/1764双位点变异后拉米夫定治疗疗效。方法采用微板核酸杂交-ELISA方法和PCR法检测162例慢性乙型肝炎C区基因启动子1762/1764双位点变异和前C区1896位点变异,35例慢性乙型肝炎患者服用拉米夫定抗病毒治疗,观察肝功能、HBV复制指标、病毒变异等变化。结果慢性轻型乙肝,慢性中、重型乙肝和肝硬化3组1762/1764双位点变异率分别为14.9%,40.7%和39.0%,1896位点变异率分别为11.9%,40.7%和65.9%;HBeAg+和HBeAg-2组1762/1764变异率分别为31.1%和28.4%,1896变异率分别为5.4%和60.2%;10例出现1762/1764双位点变异的患者接受拉米夫定治疗12月末,2例复发,并检测出变异株和YMDD变异,其中1例发展为重型肝炎并死亡;24月末,4例复发,并检测出变异株。结论HBV CP 1762/1764变异与病情轻重有一定关系,不能完全中止HBeAg的复制,不同于前C区1896位点对血清学的影响;拉米夫定治疗可以抑制变异株,但随着疗程的延长,变异株又会重新出现。

HBV前C区基因变异与血清肝纤维化标志物的相关性研究

探讨HBV前c区基因变异与肝纤维化的相关性。应用聚合酶链反应-单链构象多肽性分析(PCR-SS-CP)银染技术检测FIBV前C区基因变异和放射免疫法检测血清肝纤维化标志物(血清透明质酸,HA和血清Ⅲ型前胶原肽,PCⅢ)检测103例HBeAg阴性而HBV-DNA阳性的慢性乙肝患者的血清,进行前C区基因变异与血清肝纤维化标志物水平的相关性分析。结果发现,70.87％发生了HBV前C区变异,其中包括变异株与野生株混合感染的病例,而这些病例中的血清肝纤维化标志物(HA、PCⅢ)水平显著高于单纯野生株感染者(P<0.01),HBV前C区基因变异检出率与血清肝纤维化标志物水平呈正相关,提示HBV前C区基因变异与肝纤维化密切相关。