乙型肝炎病毒前S抗原研究现状与展望

乙型肝炎病毒(HBV)前S抗原由于其特有性质,这些年来受到普遍关注。本文就近年来对HBV前S抗原和抗体检测的临床意义、HBV前S抗原的免疫原性、嗜肝细胞性、人工合成和基因工程表达等几方面的研究状况作一概述。

乙型肝炎血清标志物、前S抗原与病毒载量的关系及意义

目的研究乙肝检测的血清标志物、病毒前S1抗原和HBV-DNA检测的关系和运用价值。方法对1163例乙肝患者血清分别进行乙肝病毒标志物(HBVM)、前S1抗原和HBV-DNA水平的测定,并对结果进行比较。结果HBV-DNA总检出率为62.9%,显著高于前S1抗原总检出率(53.0%),显著高于HBeAg(35.3%)。患者血中HBeAg、HBV-DNA、前S1抗原在总检出率上有关联,但在载量水平上三者不一定平行。结论乙肝病毒标志物(HBVM)、前S1抗原、PCR荧光定量技术在判断乙肝的复制和传染性中各有优势,要综合多方面的结果,方可作出确切的判断和治疗。

乙型肝炎病毒前S抗原的检测及临床意义

目的 :检测不同HBVM模式的Pre S1Ag ,Pre S2 Ag并与HBV DNA相比较 ,探讨二者不同的临床价值。方法 :用ELISA检测标本HBVM ,用ELISA方法检测Pre S1Ag ,用EIA方法检测Pre S2 Ag,用PCR方法检测HBV DNA。结果 :Pre S1Ag阳性率低于Pre S2 Ag,与HBV DNA及HBeAg更接近。在HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性模式中阳性占 87.2 9% ,而Pre S2 Ag在恢复期的模式中阳性率较高。结论 :Pre S1Ag比Pre S2 Ag更适合作为HBV复制活跃的指标 ,Pre S2 Ag与HBV也可作为病毒复制指标 ,同时与病毒清除有关。

妊娠合并慢性乙型肝炎血清HBV pgRNA、PreS1抗原表达与肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的 探究妊娠合并慢性乙型肝炎病人血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV pgRNA)、前S1抗原(PreS1Ag)水平变化及与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发生的相关性。方法 选取2017年6月至2020年6月在雅安市人民医院进行孕期检查的慢性乙型肝炎孕妇279例作为研究对象,根据入组病人是否患有ICP分为合并ICP组43例、未合并ICP组236例。比较两组病人血清中HBV pgRNA、PreS1 Ag水平,并分析两组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag表达与HBV DNA表达水平相关性;比较两组病人妊娠结局,并分析合并ICP组病人血清HBV pgRNA表达水平及PreS1 Ag阳性表达率与妊娠结局的关系。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清HBV pgRNA、PreS1 Ag光密度[D(λ)]值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的效能。结果 合并ICP组慢性乙型肝炎病人血清HBV表面抗原(HbsAg)水平[(3.71±0.92)log IU/mL]、HBV e抗原(HbeAg)阳性率[65.12%(28/43)]、HBV DNA含量[(8.03±1.69)log copies/mL]、天冬氨酸转氨酶(AST)[(79.68±15.73)U/L]、丙氨酸转氨酶(ALT)[(72.08±16.95)U/L]、PreS1 Ag阳性表达率[88.37%(38/43)]、PreS1 Ag D(λ)值水平(1.24±0.25)及HBV pgRNA表达水平[(5.17±1.25)log copies/mL]明显高于未合并ICP组[(2.26±0.74)log IU/mL、24.15%(57/236)、(5.19±1.07)logcopies/mL、(23.01±12.47)U/L、(21.76±10.51)U/L、67.80%(160/236)、(0.92±0.23)、(3.02±0.98)logcopies/mL](P<0.05)。血清HBV pgRNA诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的曲线下面积(AUC)为0.89,灵敏度为81.40%,特异度为80.50%。PreS1 Ag D(λ)值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的AUC为0.83,灵敏度为76.70%,特异度为79.20%。二者联合诊断的AUC为0.91,灵敏度为93.00%,特异度为78.40%。合并ICP组、未合并ICP组血清PreS1 Ag阳性的慢性乙型肝炎病人血清HBV DNA、HBV pgRNA表达水平均明显高于PreS1 Ag阴性表达病人(P<0.05)。合并ICP组、未合并ICP组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag D(λ)值均与HBV DNA表达水平呈正相关(P<0.05)。合并ICP组产后出血、早产的发生率明显高于未合并ICP组(P<0.05)。发生不良妊娠结局的慢性乙型肝炎合并ICP病人血清PreS1 Ag阳性表达率、PreS1 Ag D(λ)值、HBV pgRNA表达水平均明显高于未发生不良妊娠结局病人(P<0.05)。结论 合并ICP的慢性乙型肝炎病人血清HBV pgRNA表达水平、PreS1 Ag阳性表达率及D(λ)值水平均明显升高,对ICP有一定诊断价值,且两者水平变化均与HBV DNA含量有关,并可能预示病人不良妊娠结局的发生。

乙肝五项、前S1抗原与HBV-DNA联合检测的临床应用

目的:探讨乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA在肝炎诊断的价值;方法:收集上海市松江区中心医院2022年7月1日-8月31日检测乙肝五项的标本3364例,分析其乙肝五项、前S1抗原的检出率、HBV-DNA的载量,另外收集上海市松江区中心医院2022年3月1日-2022年8月31日HBV-DNA高载量标本46例,中载量标本54例,低载量标本76例,对照组标本52例,统计并分析其ALT、AST、GGT含量;结果:3364例标本中HBSAg阳性率为9.3%,检出率较高的模式分别为全阴、25(+)、2(+)、245(+)、145(+)、5(+);在主要的乙肝五项型别中,只有145(+)和135(+)型别检测到HBV-DNA,135(+)检出率高于145(+);前S1抗原与HBeAg检出率不同;不同DNA载量的四个组别ALT、AST、GGT差别均有统计学意义,四个组别ALT、AST、GGT不完全相同;结论:乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA联合检测对乙肝的诊断有重要的意义。

白细胞介素2-乙型肝炎病毒前S抗原融合蛋白的免疫原性研究

为协同人白细胞介素与乙型肝炎病毒前Ｓ抗原的生物学功能，探索治疗慢性乙肝的特异性免疫药物。方法用聚合酶链反应和基因重组技术构建了ＨＢＶ完整前Ｓ抗原和ＩＬ－２的嵌合基因，并在大肠杆菌中高效表达了ＩＬ－２－前Ｓ抗原融合蛋白。结果该融合蛋白保留了ＩＬ－２和前Ｓ抗原天然分子的生物学活性，能维持白细胞介素２依赖株细胞增殖，其比活性１０＾７Ｕ／ｍｇ蛋白。

前S1抗原检测阴性的HBV感染孕妇血清学和前S1基因特征分析

目的 分析前S1抗原(Pre-S1Ag)检测阴性的HBV感染孕妇血清学特征和前S1基因测序结果,为正确解释HBV感染孕妇中Pre-S1Ag检测无反应性和预防HBV垂直传播提供依据。方法 以2021年7月—2022年12月山东省妇幼保健院健康检查的孕妇为研究对象,检测乙肝五项和Pre-S1Ag,选取乙肝表面抗原(HBsAg)阳性而Pre-S1Ag阴性的标本为实验组共14例,随机选取HBsAg和Pre-S1Ag均阳性的标本为对照组20例,进行HBVDNA定量检测,并扩增PreS/S基因和测序。结果 HBV感染孕妇中Pre-S1Ag阴性仅在HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三者均阳性的乙肝五项血清学模式中发现,占比4.17%,其他HBV感染血清学检测模式中未发现;实验组和对照组HBeAg、抗-HBe阳性率均存在显著差异(P <0.001);实验组与对照组比较,HBsAg检测结果分别为(29±91)IU/mL和(2070.6±714.8)IU/mL,HBV DNA定量结果分别为:(1.63±0.05)lgIU/mL和(5.79±1.53) lgIU/mL,差异均有统计学意义(P <0.001);测序结果显示:对照组中有3例B基因型,17例C基因型;实验组14例标本均为C基因型;两组前S1蛋白变异率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV感染孕妇中Pre-S1Ag无反应性与PreS基因变异并无相关性,而是与HBV DNA载量低导致Pre-S1Ag表达水平低于检测限有关。不能忽视Pre-S1Ag检测阴性的HBV感染孕妇发生垂直传播的可能性。

IL-2与HBV前S抗原融合蛋白的真核细胞分泌表达

为使完整的HBV前S抗原 (preSAg)能在真核细胞中分泌表达 ,构建了新型真核表达克隆 ,以人白细胞介素_2 (IL_2 )的前导序列为分泌信号肽 ,在IL_2C端与preS1AgN端之间以高亲水性氨基酸片段相连 .由此构建的质粒转染COS_7细胞能分泌表达IL_2preS融合蛋白 ,其表达效率与表达天然IL_2分子一致 .从而成功地克服了 preS1Ag分泌滞留效应 .这一结果为设计与构建抗HBV持续感染的特异性基因疫苗药物提供了理论与实验基础 ,也为蛋白质分泌表达的调控研究提供了实验依据 .

乙肝五项血清标志物联合乙型肝炎病毒前S1抗原在乙型肝炎病毒感染患者临床治疗中的意义

目的分析乙肝五项血清标志物联合乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre S1)在乙型肝炎病毒(HBV)感染患者临床治疗中的意义。方法选取2021年1—10月空军军医大学西京医院门诊及住院部收治的147例HBV感染患者作为研究对象,患者均采用核苷类似物治疗,观察患者治疗后乙肝五项血清标志物及Pre S1定量及定性变化,比较预后良好患者与合并症患者乙肝五项血清标志物联合Pre S1抗原检测含量、抗原阳性率。结果治疗后3、6个月,患者HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBe Ab、HBc Ab、Pre S1含量及阳性率均低于治疗前,且治疗后6个月低于治疗后3个月,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好患者HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBe Ab、HBc Ab、Pre S1含量及阳性率均低于合并症患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙肝五项血清标志物和Pre S1抗原是稳定、可靠的生物学标志物,联合定量检测可反映不同治疗时期乙型肝炎患者病毒的感染水平、复制程度、传染性,对于HBV感染患者病情发展判断及后续治疗具有良好的临床意义。

利用6× His/ Ni-NTA 表达纯化系统一步纯化乙型肝炎前S抗原

目的：利用 ６× Ｈｉｓ／ Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 表达纯化系统表达并纯化带有 ６ 个 Ｈｉｓ 纯化标签的乙型肝炎前 Ｓ抗原。方法：利用 Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗ 亲和层析，比较了 Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白分别在非变性和变性条件下的各种纯化条件和产率，并用三种方式对 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白进行了复性。结果： Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白均存在于 ２５０ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ 咪唑洗脱峰中。从 １ Ｌ 诱导菌体中可以分别纯化 Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白 １０～１５ ｍ ｇ，纯度达到电泳纯。三种复性方式中，在 Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 柱上复性 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白的复性率达 ６０．５％ 。结论：６× Ｈｉｓ／ Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 表达纯化系统不仅可以使外源蛋白在大肠杆菌中获得高效表达，而且可以通过简单的纯化步骤得到较高纯度的目的蛋白。该表达纯化系统为利用大肠杆菌制备重组蛋白提供了一种简便可行的方法。

乙型肝炎病毒前S1抗原检测方法及其临床意义探讨

用乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１蛋白合成肽（２１￣４７ａａ）免疫家兔制备多克隆兔抗前Ｓ１抗体，建立前Ｓ１抗原ＥＬＩＳＡ检测方法，对前Ｓ１蛋白合成肽的最低检出限为０．１μｇ／Ｌ，可测到２．５×１０＾５个／ＬＤａｎｅ颗粒。

乙型肝炎病毒前S1抗原与e抗原、乙型肝炎病毒DNA的相关性分析

目的:探讨乙肝病毒(HBV)前S1(Pre-S1)抗原与e抗原(HBeAg)、HBV DNA含量的相关性,以评价Pre-S1抗原检测HBV复制的临床应用价值。方法:临床采集乙肝表面抗原阳性标本363例,以ELISA法检测Pre-S1抗原,时间分辨免疫荧光法检测HBeAg,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测HBV DNA含量,并对Pre-S1抗原、HBeAg和HBV DNA检测结果进行相关性分析。结果:Pre-S1抗厚与HBeAg值之间存在关联性(X^2=94.4,P<0.01),关联系数为0.45;Pre-S1抗原与HBV DNA亦有关联(X^2=198.58,P<0.01),关联系数为0.59。Pre-S1抗原阳性率随HBV DNA含量的增加而增加。当HBV DNA拷贝数的对数值>3时,Pre-S1抗原的诊断敏感度84.5%,特异性91.2%,准确性87.0%,阳性预测值94.1%,阳性似然比9.6,优势比56.8;HBeAg诊断敏感度50.4%,特异性94.9%,准确性67.2%,阳性预测值94.2%,阳性似然比9.8.优势比18.9。结论:Pre-S1抗原与HBV DNA具有相关性,Pre-S1抗原较HBeAg能更敏感、更准确地反映HBV复制情况,三者联合检测互相补充,更有助于临床疾病的诊治。

乙型肝炎病毒前S_1抗原及抗体的检测及临床意义

用合成乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１肽及其免疫抗体制备的试剂，检测１９例急性、１０３例慢性乙型肝炎患者血清中的前Ｓ１抗原和抗体。结果：前Ｓ１抗原及抗体的阳性率在急性乙型肝炎患者分别为８４．２％和８９．５％，在慢性乙型肝炎患者分别为２５．０％和８４．２％。前Ｓ１抗原在血清学表达上与ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ的阳性符合率分别高达８９．３％和８７．５％。前Ｓ１抗体与抗ＨＢｓ在体内有明显相伴随关系。提示：前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ在体内复制的可靠标志，而前Ｓ１抗体反映疾病的恢复和病毒的清除。

前S1抗原与HBV血清标志物及HBV-DNA相关性的探讨

目的探讨前S1抗原(PreS1)与HBV血清标志物及HBV-DNA相关性。方法对102例慢性乙型肝炎患者和73例健康人采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标志物和PreS1及聚合酶链反应(PCR)方法检测HBV-DNA。结果102例慢性乙型肝炎患者中,PreS1和HBeAg与HBV-DNA的总符合率分别为70.6%和75.5%;PreS1的敏感性高于HBeAg,但特异性则相反;HBeAg阴性患者部分仍存在着病毒复制;随着HBV-DNA拷贝数的升高,PreS1和HBeAg的阳性率亦随之升高;在HBV-DNA低拷贝数时PreS1的阳性率明显高于HBeAg。结论PreS1的检测可以较好地反映HBV存在和复制的情况,PreS1作为辅助或补充指标联合HBV血清标志物与HBV-DNA同步动态监测,具有重要的临床应用价值。

前S1抗原与HBV DNA及HBV血清标志物检测的相关性及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量、前S1抗原(Pre-S1-Ag)及HBV e抗原(HBeAg)与不同模式HBV血清标志物(HBV-M)的关系及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和微粒子化学发光法(CMIA)分别检测515例乙型肝炎患者的Pre-S1-Ag和HBV-M;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定HBV DNA和酶动力学法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST),并对检测结果进行比较分析。结果在乙型肝炎患者中,HBV DNA和Pre-S1-Ag的阳性检出率差异无统计学意义;其中HBV表面抗原(HBsAg)、HBeAg和HBV核心抗体(抗-HBc)同时阳性组的HBV DNA和Pre-S1-Ag的阳性检出率分别为91.2%和88.1%,说明此组患者存在病毒的高复制和传染性;部分HBeAg阴性患者仍存在病毒的复制;若以HBV DNA定量≥103拷贝/mL为病毒复制的诊断标准,HBV DNA阳性患者HBeAg阳性率为61.5%,Pre-S1-Ag的阳性率为95.2%,两者差异有统计学意义;HBV Pre-S1-Ag阳性患者血清中ALT及AST均高于阴性患者。结论HBV DNA和Pre-S1-Ag有较高的符合率,可作为HBV复制的指标,Pre-S1-Ag较HBeAg更敏感地反应了HBV复制和肝功能的情况。

血清乙肝病毒前S1抗原检测的临床意义

目的 探讨血清乙肝病毒前S1抗原检测的临床意义。方法 用ELISA法检测表面抗原阳性 134例的前S1抗原。结果 (1)前S1抗原与e抗原的阳性符合率为 81.5 % ;(2 )与HBV DNA的阳性符合率为 86 .5 % ,且相关系数r=0 .988。结论 前S1抗原是HBV在体内复制和传染的可靠指标 。

HBeAg、HBV-DNA、前S_1抗原相关性分析及其临床意义

了解HBeAg、HBV -DNA及前S1抗原相关性及其临床意义。采用ELISA法检测HBV标志物 ,PCR法检测HBV -DNA。 196例不同模式HBV感染者血清HBV -DNA及前S1抗原的总检出率分别为 38 78%和4 0 30 % ,二者无明显差异 (P >0 0 5 )。其中 4 4例HBeAg阳性模式感染者HBV -DNA和前S1抗原的检出率分别为 88 6 4 %和 86 36 % ,两者无明显差异 (P >0 0 5 )。 15 2例不同模式HBeAg阴性感染者HBV -DNA和前S1抗原的检出率分别为 2 4 34%和 2 6 97% ,明显低于HBeAg阳性模式的检出率 ,二者有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :HBeAg、HBV -DNA及前S1抗原间有着密切的相关性。前S1抗原是病毒复制的又一新标志 ,且与病程的发展及疗效的观察有着重要的意义。