cDNA文库噬菌体展示法的建立及乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白筛检

为寻找乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白的结合蛋白 ,将前S1蛋白包被于聚苯乙烯平板 ,经过“包被 吸附 洗脱”筛检过程 ,获得前S1蛋白结合蛋白的cDNA序列 ,并将推断的氨基酸序列进行相互比较 ,经生物信息学方法获得结合蛋白的全长序列。共经过 4轮生物淘洗过程。结果提示 ,神经胶质瘤抑制子候选基因区基因 (GLTSCR) 2上游部分序列存在于与HBV前S1结合的重组T7噬菌体中 ,多个克隆的测序结果发现前S1蛋白结合蛋白具有KxPxKSGxxxL结构域。HBV前S1蛋白的结合蛋白可能是GLTSCR 2的编码产物。

噬菌体表面展示技术筛选乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白基因

目的 以乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白为靶蛋白 ,寻找其相应的结合蛋白。方法 应用T7cDNA文库噬菌体展示技术克隆与前S1蛋白具有结合作用的蛋白序列 ,命名为前S1结合蛋白 (PreS1BP)。将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索 ,自GenBank中获得结合蛋白的cDNA和基因组的全长序列。结果 初步确定PreS1BP即为神经胶质瘤抑制基因区候选基因 2 (GLTSCR2 ) ,cDNA长为14 36核苷酸 ,基因位于第 19号染色体长臂 13.3区 (19q13 3) ,长度 114 4 5碱基对 (bp) ,位于 19号染色体 10 4 0 3483～10 4 14 989,PreS1BP基因含有 13个外显子 ,具有 12个内含子。结论 应用T7cDNA文库噬菌体展示技术和生物信息学方法获得了HBVPreS1BP基因。