剑叶耳草的显微结构研究

目的为鉴别和开发剑叶耳草提供参考依据。方法对剑叶耳草进行显微鉴别。结果根部皮层中散有草酸钙砂晶。茎中内皮层明显,呈环状;偶见石细胞和草酸钙砂晶。叶上下表皮外被角质层,呈细齿状,海绵组织疏松,细胞内偶见砂晶和针晶。粉末中可见石细胞及草酸钙结晶。结论以上显微特征对剑叶耳草有鉴别意义。

壮瑶药剑叶耳草的化学成分预实验

目的:采用系统预实验法对广西民间常用壮瑶药剑叶耳草的化学成分进行预实验,对其化学成分进行初步研究。方法:采取试管法、纸斑法,分别对剑叶耳草全草的水、95%乙醇、石油醚提取液进行研究,通过多种化学试剂的显色反应或沉淀反应,对其可能含有的化学成分进行检测。结果:剑叶耳草全草中可能含有的化学成分有糖类、多糖类、苷类、皂苷类、黄酮类、蒽醌类、香豆素类、酚类、有机酸类、植物甾醇类、三萜类和油脂类等。结论:初步确定剑叶耳草化学成分种类丰富,为其进一步开发利用提供实验依据和参考。

剑叶耳草挥发油的GC-MS分析

目的:研究剑叶耳草挥发油的化学成分组成。方法:分别采用水蒸气蒸馏法(SD)和超临界CO2萃取法(SFE)提取制备两种挥发油;通过气质联用分析其化学成分组成,用面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果:水蒸气蒸馏法挥发油中分离出67个色谱峰,鉴定其中32个化合物,占挥发油总量的73.76%;超临界CO2萃取法挥发油中分离出82个色谱峰,鉴定其中45个化合物,占挥发油总量的61.62%。结论:剑叶耳草挥发油主要包括脂肪族含氧衍生物、芳香族含氧衍生物和萜含氧衍生物,但两种提取方法的挥发油成分组成和含量有差异。

剑叶耳草水提物对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究剑叶耳草水提物(JYECA)对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:分别采用四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺盐酸盐(D-GalN)ip建立小鼠急性肝损伤模型,用比色分析法测定小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的活性;测定小鼠肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量;HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:JYECA能显著降低因CCl4,D-GalN所致急性肝损伤小鼠血清ALT,AST的升高;对急性肝损伤小鼠肝匀浆SOD的活性有明显的升高作用及降低MDA的含量(P<0.01或P<0.05);能够减轻肝细胞损伤程度。结论:JYECA对CCl4、D-GalN所致小鼠急性肝损伤有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用有关。

剑叶耳草中的1个新咖啡酸苷化学成分及其抗肿瘤活性

目的研究剑叶耳草Hedyotiscaudatifolia的化学成分。方法采用硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20凝胶等柱色谱技术进行分离纯化,通过化合物的核磁共振、质谱等光谱数据和理化性质鉴定其结构。结果从剑叶耳草的甲醇提取物中分离得到10个化合物,其结构分别鉴定为剑叶耳草苷A(1)、β-谷甾醇(2)、5α-豆甾烷-3,6-二酮(3)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(4)、齐墩果酸(5)、乌苏酸(6)、坡模酸(7)、3α,19α-二羟基-12-烯-24, 28-乌苏酸(8)、2α,3β,24-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(9)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(10)。结论化合物1为新的咖啡酸葡萄糖苷,化合物7～10均为首次从该植物中分离得到。化合物1具有一定的抑制肿瘤细胞生长活性。

剑叶耳草对ConA诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:建立小鼠免疫性肝损伤模型,研究剑叶耳草水提物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)尾静脉注射建立小鼠免疫性肝损伤模型,用比色分析法测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)的活性;测定小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物歧化酶(SOD)的活性;HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:8g/kg和4g/kg剑叶耳草水提物能显著降低因Con A所致免疫性肝损伤小鼠血清异常升高的ALT、AST、ALP和TBIL;对免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中MDA的含量明显降低,GSH含量明显升高及GSH-Px、SOD的活性有明显的升高作用。结论:剑叶耳草水提物对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基损伤、抑制脂质过氧化作用有关。

剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用及其机制研究

目的:观察剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用,并初步探究其分子机制。方法:(1)以乙型肝炎病毒转染的HepG2.2.15细胞为体外细胞模型,采用MTT法检测剑叶耳草多糖对HepG2.2.15细胞存活率的影响,在无毒浓度(50、100、200 mg/L)下作用HepG2.2.15细胞,并设置阳性药物恩替卡韦组(1 mg/L)和模型对照组,使用ELISA法测定上清液HBs Ag、HBe Ag的滴度,使用荧光定量PCR法测定上清液HBV DNA的含量。(2)颈静脉注射强阳性HBV DNA鸭血清建立广西麻鸭乙型肝炎模型,随机分为剑叶耳草多糖200、400、800 mg/kg、恩替卡韦1 mg/kg组和模型对照组,持续给药14天,鸭颈静脉采血,检测鸭血清中HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA含量,HE染色观察肝损伤程度。(3)采用荧光定量PCR法检测HepG2.2.15细胞蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号传导及转录激活因子1(STAT1)、信号传导及转录激活因子2(STAT2)、干扰素刺激基因因子3(ISGF3)mRNA以及抗病毒蛋白寡聚腺营酸合成酶(OAS)和蛋白激酶R(PKR)mRNA表达水平。结果:(1)剑叶耳草多糖对HepG2.2.15细胞毒性较低。与模型对照组相比,50、100、200 mg/L剑叶耳草多糖能够明显抑制HepG2.2.15细胞分泌和表达HBV DNA,有效抑制HBs Ag和HBe Ag分泌。(2)与模型对照组广西麻鸭相比,剑叶耳草多糖200 mg/kg组给药后血清HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA含量明显下降,肝病理损伤明显缓解。(3)100、200 mg/L剑叶耳草多糖能明显上调细胞因子JAK1、STAT1、STAT2、ISGF3 PKR mRNA以及抗病毒蛋白OAS的表达。结论:剑叶耳草多糖具有显著抑制乙型肝炎病毒的作用,其机制与激活JAK/STAT信号转导通路、促进抗病毒蛋白表达有关。

3种常见茜草科药用植物化感作用的生物测定

以南方常见的3种茜草科药用植物鸡屎藤〔Paederia scandens(Lour.)Merr.〕、剑叶耳草(Hedyotis caudatifolia Merr.etMetcalf)、玉叶金花(Mussaenda pubescens L.)为材料,采用常规水浸提方法制备不同浓度的水提液,用生物测定法测定比较其对萝卜(Raphanus sativus L.)的化感作用,并通过测定对受体根系活力和叶片游离脯氨酸、叶绿素含量的影响,初步探讨其化感作用机理。结果表明:水提液浓度不同,其化感效应不同;供试植物不同,化感效应差别也较大,浓度较低时,化感作用较小;具体表现为,3种供试植物化感作用顺序为:鸡屎藤>剑叶耳草>玉叶金花;鸡屎藤水提液处理显著降低了受体萝卜发芽率、发芽速率指数和叶绿素含量,显著提高了受体萝卜幼苗叶片脯氨酸含量。

3种茜草科药用植物乙醇浸提液对萝卜种子萌发及幼苗生长的化感作用

以3种茜草科药用植物鸡屎藤〔Paederia scandens（Lour.）Merr.〕、剑叶耳草（Hedyotis caudatifolia Merr.et Metcalf）、玉叶金花（Mussaenda pubescens L.）为试材,采用乙醇提取的方法制备不同浓度的乙醇提液,通过测定其对受体萝卜（Raphanus sativus L.）发芽率、根系活力、叶片游离脯氨酸和叶绿素含量的影响,比较化感作用强弱。结果表明：不同供试植物乙醇提液其化感效应不同,且浓度高时,化感作用强;供试植物乙醇提液均显著降低了萝卜发芽率、发芽速率指数,且剑叶耳草在这两个指标的抑制作用显著高于另二者;供试植物乙醇提液均极显著抑制萝卜胚根和胚芽的生长,其中鸡屎藤乙醇提液抑制胚芽的作用最强,玉叶金花提液抑制胚根的作用最强;鸡屎藤比玉叶金花更显著地抑制萝卜幼苗根系活力,然而剑叶耳草却显著地促进;供试植物乙醇提液显著降低萝卜幼苗叶绿素含量,显著提高叶片脯氨酸含量;鸡屎藤乙醇提液使叶绿素含量减少69.47%~87.00%,且叶绿素a/叶绿素b随处理浓度的增加而降低。