剑叶龙血树4CL基因的克隆及其功能预测

目的:对剑叶龙血树4CL家族基因进行克隆及功能预测,筛选出可能参与黄酮类生物合成相关的4CL基因,为深入阐述龙血竭的形成机制奠定基础。方法:在前期转录组测序数据的基础上,初步筛选4CL家族基因,并对其进行基因克隆及功能预测,筛选可能与黄酮类及木质素类化合物合成相关的4CL基因;以剑叶龙血树组培苗为研究对象,对其进行过氧化氢、茉莉酸、水杨酸等胁迫处理,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析不同胁迫处理条件下4CL基因的相对表达变化规律。结果:在剑叶龙血树转录组数据库中共注释得到6个4CL基因并成功完成其基因克隆;其中3个基因(Dc4CL1、Dc4CL2和Dc4CL3)在龙血竭形成过程中呈现差异表达,Dc4CL1基因和Dc4CL2基因的表达模式与木质素类化合物生物合成的关键酶基因表达变化趋势一致,而Dc4CL3基因的表达模式与黄酮类化合物生物合成的关键酶基因表达变化趋势一致;系统发育分析结果显示,Dc4CL1和Dc4CL2属于Ⅰ类4CL基因,而Dc4CL3基因属于Ⅱ类4CLs基因;胁迫处理结果显示,Dc4CL均有差异性表达变化,其中Dc4CL3基因的相对表达量显著高于其他Dc4CL基因。结论:对龙血竭形成过程中起关键催化作用的4CL基因进行初步的筛选,其中Dc4CL1基因和Dc4CL2基因(Ⅰ类)可能主要参与木质素类化合物的生物合成,Dc4CL3基因(Ⅱ类)可能是龙血竭形成过程中黄酮类化合物生物合成的关键催化酶基因。

剑叶龙血树氯仿部位化学成分的研究

从剑叶龙血树［Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｓ．Ｃ．Ｃｈｅｎ］树皮的氯仿提取物分离得到６个化合物，根据光谱解析和理化性质，分别鉴定为２，３，５，６四氯１，４二甲氧基苯（Ｉ），７羟基４′甲氧基黄烷（ＩＩ），４′羟基３，５二甲氧基二苯代乙烯（ＩＩ），４′羟基２，６二甲氧基双氢查耳酮（ＩＶ），４′羟基２，４，６三甲氧基双氢查耳酮（Ｖ），６羟基７甲氧基３（４′羟苄基）色原烷（ＶＩ）。其中ＩＶ、ＶＩ为新化合物。

剑叶龙血树中芪类化合物及其抗真菌活性的研究

目的 对剑叶龙血树含脂木材进行化学成分和活性研究。方法 采用硅胶柱层析、制备 TL C进行分离 ,运用 U V、IR、MS、1 H,1 3CNMR等光谱法鉴定化合物的结构 ,并对分得的化合物进行抗真菌活性筛选试验。结果 得到 2个类化合物 :4′-羟基 - 3,5 -二甲氧基对苯乙烯 (4′- hydroxy- 3,5 - dimethoxystillben,紫檀 )和 4′,3,5 -三羟基对苯乙烯 (resveratrol,白藜芦醇 ) ,具有抗真菌活性。

中药龙血竭原植物剑叶龙血树的形态组织学研究及所含树脂的分布和成分检测

目的:对剑叶龙血树进行系统的组织学研究及所含树脂的分布和成分检测研究,为进一步研究剑叶龙血树树脂形成的成因和机理提供参考依据。方法:采用彩色显微照相技术对剑叶龙血树含树脂茎和无树脂茎,以及根、茎皮、叶进行系统的组织学研究;同时用高效液相色谱仪将含树脂茎和无树脂茎的指纹图谱进行了比较。结果:阐明了含树脂茎的纵切结构以及叶的表面观特征;除了茎木质部导管和纤维中有树脂外,发现剑叶龙血树受到损伤之后在茎皮层薄壁细胞、根的髓部和木质部亦有树脂的分布;含树脂茎和无树脂茎的指纹图谱显示剑叶龙血树茎在形成树脂后的化学成分中出现了较多的黄酮类、茋类成分。结论:剑叶龙血树无分泌组织出现,树脂出现在非分泌细胞中,其树脂形成的机制需要进一步研究。

剑叶龙血树含树脂木材的生药学研究

剑叶龙血树Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ的树脂作为血竭使用，已有２０多年的历史，药理、毒理和临床研究表明本品与目前的进口血竭作用相似，作为广西血竭，已批准试产（一癸新药）。本文对其资源，形态组织学、理化分析等方面进行了较系统的报道。

剑叶龙血树树脂中的植物防卫素

１引言剑叶龙血树（Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）系龙舌兰科龙血树属，常绿乔木或灌木，在云南主要分布于勐连、勐腊、思茅、普洱、沧源、景东等县．在广西也有分布．剑叶龙血树现已成为我国传统中药血竭的主要基源植物之一［３］．近几年，对血竭化...

剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析

目的通过对比剑叶龙血树根、茎、叶成分与龙血竭成分间的异同及对剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素A、B的测定,寻找龙血竭原料的可能来源。方法薄层色谱法及高效液相色谱技术。结果剑叶龙血树根、茎、叶中均含有微量的龙血素A,分别为:58、53、15μg/g;叶中还含有微量的龙血素B,为2μg/g,而根、茎样品中未能检测到龙血素B。结论从色谱峰的积分面积及保留时间来看,剑叶龙血树根、茎、叶成分与血竭原料有少许的相关性,但差异显著;根、茎、叶3者间的化学组成成分也存在着显著差异,剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素量都较低,不能直接用作生产血竭的原料。

剑叶龙血树的生药鉴别

对剑叶龙血树的植物形态、药材性状、显微鉴别和理化特征进行了研究。为更好地利用这一资源和评价其质量提供了方法和依据。

剑叶龙血树化学成分的研究 Ⅱ.剑叶龙血素C的结构测定

剑叶龙血素C （cochinchinenin C）系从百合科植物剑叶龙血树[Dracaena cochinchinensis （Lour.） S.C.Chen]的含脂木材提取分离得到的化学成分。无色结晶,mp 164-166℃ （CHCl3）,MS的同位素峰表明分子式为含有4个Cl,HRMS测得M+=275.9308。

微波辅助法提取剑叶龙血树茎总黄酮的工艺研究

对微波辅助法提取剑叶龙血树茎中黄酮类物质进行了研究,通过单因素及L9(34)正交实验,得到提取最佳工艺为:温度50℃,微波功率420 W,乙醇浓度90%,料液比1:10,提取时间8 min,此条件下剑叶龙血树茎总黄酮提取率为1.20%。

剑叶龙血树疏松愈伤组织诱导技术研究

为了获取质地好且松散型的愈伤组织,为进行剑叶龙血树细胞悬浮培养提供材料。本试验以剑叶龙血树种子、芽为外植体,研究不同培养基、不同激素组合对剑叶龙血树愈伤组织诱导和质地的影响。结果表明：以MS为基本培养基,增加适当浓度的2,4-D和6-BA能促进剑叶龙血树愈伤组织诱导率的提高,长势良好,产生的疏松愈伤组织也最多,最佳疏松愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋2,4-D 1.5~2.0mg/L。

剑叶龙血树树叶化学成分及其改善HepG-2细胞胰岛素抵抗的作用

采用硅胶、SephadexLH-20和反相RPC18等柱色谱技术，从云南剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis）树叶甲醇和石油醚提取物中分离了7个化合物，包括3个黄酮类化合物，1个三萜和3个甾体化合物，经综合波谱分析分别鉴定为：4’，7-二羟基-3’-甲氧基-8-甲基黄烷（1），7-羟基-4’-甲氧基高异黄烷（2），2’，4，4’-三羟基查尔酮（3），（22E）-3B—acetoxystigmasta-5，22-diene（4），lanost-9-en-3β—01（5），β-谷甾醇（6），胡萝卜苷（7）．测定了化合物1-3改善HepG-2细胞对胰岛素抵抗的作用，化合物1—3能显著增加细胞的葡萄糖消耗量．

珍稀濒危植物剑叶龙血树茎挥发油的化学成分测定

采用水蒸气蒸馏法从剑叶龙血树茎中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对挥发油化学成分进行分析,并应用面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果显示,从剑叶龙血树茎挥发油中鉴定出16种化合物,占总油量的100%,其主要成分为4-甲氧基-6-(2-烯丙基)-1,3-亚甲二氧基苯(21.95%)、(Z,Z)-9,12-十八碳酸(13.47%)、2,6,10,14-四甲基十六烷(7.39%)、3-甲基-十八烷(6.12%)、2-(十八烷氧基)-乙醇(6.00%)及1,7,11-三甲基-4-(1-甲基乙基)十四烷(5.34%)。本研究首次报道了剑叶龙血树茎挥发油的化学成分,为其合理开发和利用提供了依据。

HPLC测定壮药剑叶龙血树中白藜芦醇和7,4’-二羟基黄酮的含量

目的建立一种同步测定剑叶龙血树中白藜芦醇和7,4’-二羟基黄酮含量的方法。方法以C18反相键合硅胶为填料,甲醇-乙腈-0.2%磷酸(30∶7∶63)为流动相,检测波长为306 nm,柱温35℃。结果白藜芦醇和7,4’-二羟基黄酮分别在0.185 0～1.850μg(r=0.999 9)和0.158 2～1.582 0μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.02%、99.09%,RSD分别为2.57%、2.24%。结论本方法简便、灵敏、准确度高,可用于建立剑叶龙血树质量控制标准。

珍稀濒危植物剑叶龙血树叶挥发油的化学成分测定

采用水蒸气蒸馏法从剑叶龙血树叶中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对挥发油化学成分进行分析,并应用面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果表明,从剑叶龙血树叶挥发油中鉴定出19种化合物,占总油量的100%,其主要成分为二十一烷(15.92%)、4-甲氧基-6-(2-丙烯基)-1,3苯并二恶茂(12.74%)、二十七烷(11.95%)、二十五烷(11.26%)及二十烷(7.05%)。

剑叶龙血树芽外植体诱导分化

以健康无病虫害的剑叶龙血树的顶芽和侧芽为外植体,摸索外植体的消毒方法,研究不同植物生长调节剂浓度配比对诱导芽分化的影响,同时比较了不同吸附剂的防褐化效果。结果表明:0.1%HgCl2消毒9 min时,存活的无菌芽比率最高;MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基能较好的诱导剑叶龙血树芽的形成;在培养基中添加1.0 g/L的PVP作为吸附剂时防褐化效果较好。

超声辅助提取剑叶龙血树树叶总黄酮工艺的优化

为优化超声波辅助提取剑叶龙血树[Dracaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen]树叶中总黄酮的提取工艺,通过单因素试验和正交试验,分析提取条件(提取剂乙醇体积分数、料液比、超声波功率、提取温度、提取时间)对剑叶龙血树树叶中总黄酮得率的影响,确定剑叶龙血树树叶总黄酮的最佳提取工艺条件为超声温度70℃、提取剂乙醇体积分数为70%、料液比1∶25(m∶V,g/m L)、超声功率70 W,提取60min。在最佳提取工艺条件下,剑叶龙血树树叶总黄酮平均率为1.605%。

剑叶龙血树的过氧化物酶活性与树脂产生关系初探

目的:研究剑叶龙血树的过氧化物酶活性与其树脂产生的相关性,探讨人工调控树脂形成的原因和方法。方法:以比色法对剑叶龙血树产脂和不产脂的剑叶龙血树进行过氧化物酶活性测定并比较。结果:产树脂的剑叶龙血树近茎顶的叶片和最下方1-2层的叶片的过氧化物酶活性均显著高于不产树脂者。结论:研究初步表明剑叶龙血树的过氧化物酶活性与其产树脂与否有正相关性。

广西岩溶环境中剑叶龙血树的次生生长研究

本文采用对比初生结构与次生结构的研究方法，研究岩溶环境中剑叶龙血树根和茎维管形成层和木栓形成层的发生与活动。结果表明，剑叶龙血树不仅有文献记载的茎的维管形成层，而且根也有维管形成层，根和茎都有木栓形成层。茎维管形成层起源于散生的初生维管束外围的薄壁细胞，根维管形成层来源于维管柱鞘，都是进行切向分裂，向外产生少量薄壁细胞，向内产生基本组织和次生周木维管束。根和茎木栓形成层起源于维管形成层外侧基本组织，进行平周分裂，向外产生栓化层。但是，茎木栓形成层最早起源于初生基本组织外侧的薄壁细胞，晚期幼根的次生保护功能由外皮层的细胞通过细胞壁栓化来实现，在次生生长达到一定程度后，早期的栓化层被挤压破坏，维管形成层向外形成的薄壁细胞才形成木栓形成层．

剑叶龙血树繁育种植技术与人工诱导机制研究综述

剑叶龙血树(D.cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen)是目前国内公认的国产龙血竭的基源植物之一。由于龙血竭临床应用范围不断扩大,需求量持续增大,龙血树野生资源被大量采伐而快速减少而趋于枯竭。保护好龙血树野生资源,并合理开发利用是目前急需解决的问题。剑叶龙血树的人工繁育种植和人工诱导加速龙血竭形成是解决资源短缺的重要途径。文章系统综述了剑叶龙血树种苗人工繁育栽培技术、龙血竭形成机理与人工诱导血竭产生的研究进展,并对规范化、产业化种植高含量剑叶龙血树进行了展望。