剧毒卡罗藻GM5株中标志性毒素4,5-dihydro-KmTx2的色谱制备

建立了剧毒卡罗藻GM5株中标志性毒素4,5-dihydro-KmTx2的分离纯化体系,通过高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)对其纯化效果进行评价.过滤后的培养液经大型固相萃取柱(YMC-GEL ODS-A-HG,80 cm×10 cm,12 nm,S-50μm)进行富集,依次用体积分数为10%、40%和60%的甲醇溶液进行淋洗,体积分数为80%的甲醇溶液进行洗脱,得到目标化合物粗提液(纯度为51.3%).采用半制备型高效液相色谱技术进一步分离纯化,使得目标化合物纯度高达93.2%.该方法提取及纯化效率高,可操作性强,可以为4,5-dihydro-KmTx2的规模化生产及功能活性研究提供技术支持.

卡罗藻有毒株与无毒株对菲律宾蛤仔的生长、存活及生理生化的影响

剧毒卡罗藻对双壳类生理生化过程的影响尚待研究解明.本文以菲律宾蛤仔为对象,比较研究了细胞大小形态一致的剧毒卡罗藻和无毒周氏卡罗藻对菲律宾蛤仔的生长、存活、摄食生理以及糖原含量的影响.结果显示,2种卡罗藻喂养下,菲律宾蛤仔稚贝均有生长,但有毒组的生长指标和存活率均显著低于无毒组.其滤水率和摄食率与藻密度呈近似幂函数相关,15×10~5cells·L为拐点藻密度;小于或等于此藻密度时,2组的摄食率和滤水率随密度增加而增加,且无显著差异;大于此密度时,有毒藻组滤水率和摄食率均显著低于无毒藻组.成贝较稚贝能耐受更高有毒藻密度.摄食2种卡罗藻后,菲律宾蛤仔各组织均快速累积糖原,外套膜糖原含量最高,变化最为显著.但糖原累积量与藻密度有关,低藻密度组中,有毒藻组的糖原含量显著低于无毒藻组.研究结果表明,剧毒卡罗藻可以通过降低贝类摄食能力、干扰生化代谢等非急性致死过程来影响贝类的生长及存活.