Ag^+稳定的剪刀形三螺旋分子开关快速灵敏检测转录因子

构建了基于银离子稳定的剪刀形三螺旋分子开关的荧光传感器,中性环境下快速灵敏检测转录因子。银离子促使剪刀分子信标的两条臂(标记荧光基团的双链臂和标记猝灭基团的单链臂)相互靠近,剪刀闭合,形成剪刀形三螺旋开关。转录因子不存在时,剪刀处于闭合,三螺旋开关"关闭",荧光基团和猝灭基团发生荧光共振能量转移,荧光被猝灭。转录因子存在时,特异性结合包含在开关双链臂中的双链识别序列,取代单链臂,剪刀张开,三螺旋开关"打开",猝灭基团远离荧光基团,荧光恢复。最佳条件下,转录因子浓度在0. 5~50 nmol/L范围内,荧光强度与其浓度呈线性关系,检测限0. 3 nmol/L。

基于三螺旋适体探针的双向开关传感同时灵敏测定四环素和氯霉素

设计了基于发卡状三螺旋结构的DNA分子开关荧光传感器,利用适配体特异性识别,实现了对2种目标抗生素的同时灵敏测定。其分子开关结构由一个特异性适配体识别序列和一个双标记的信号探针序(STP)列组成发卡状三螺旋结构。识别四环素的STP两端用芘分子修饰,识别氯霉素的信号探针两端分别用硫化镉量子点(CdS QDs)和金纳米粒子(AuNPs)修饰,适配体序列插入环状(Loop)区域形成三链结构。目标抗生素存在时,识别探针与之结合,释放出信号探针,致使两端发光物质靠近,荧光信号发生显著变化。传感器的荧光发光强度与四环素和氯霉素浓度呈良好的线性关系,线性范围为1×10^(-3)~10μmol/L,检出限为0.3 nmol/L。该方法用于测定鸡蛋中的四环素和氯霉素,结果满意。

电化学适配体传感器用于乳酸快速检测的研究

目的构建用于检测L-乳酸的新型电化学适配体传感器。方法基于金钯-掺氮多壁碳纳米管纳米复合材料(Au/PdN-MWCNTs)修饰的玻碳电极,通过三螺旋分子开关(triple-helix molecular switch,THMS)触发具有RNA剪切活性的Pb2+辅助的脱氧核酶(DNAzyme)对电极表面固定化信号探针的循环剪切效应,实现L-乳酸的超灵敏电化学检测。采用差分脉冲伏安法(DPV)记录电流信号变化。结果信号探针浓度4μmol/L、Pb2+浓度4μmol/L、DNAzyme剪切孵育时间60 min为传感器最优测试条件。在最优实验条件下,该L-乳酸传感器线性范围为1~20 mmol/L,检出限为0.51 mmol/L。此外,该适配体传感器具有优异的稳定性(RSD=4.56%)、重现性(RSD=2.80%)和选择性。在人血清样本中检测L-乳酸时回收率为105.60%~110.80%,RSD为2.35%~4.56%,与传统方法具有较好的一致性。结论该适配体传感器能实现L-乳酸的超灵敏检测,在生物医学诊断、食品工业和环境监测等领域具有广泛的应用前景。