副干酪乳杆菌L9对小鼠肠道短链脂肪酸含量的影响

目的:评价副干酪乳杆菌L9对健康小鼠肠道内短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)含量的影响。方法:选取3周龄BALB/c雄性小鼠50只,随机分为副干酪乳杆菌L9高、中、低剂量组、阳性对照组(商业菌株Lactobacillus casei strain Shirota)、阴性对照(生理盐水)组共5组,以0.2 m L/d的剂量连续灌胃小鼠21 d并收集第0、21天小鼠粪便。第21天处死小鼠后搜集收集盲肠内容物,利用气相色谱仪观察内容物中SCFAs的变化,并且利用实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析肠道菌群数量的变化。结果:与第0天相比,第21天小鼠粪便中SCFAs中乙酸、丙酸含量极显著上升(P<0.01),Bifidobaceterium spp.、Lactobacillus属数量和丁酰辅酶A转移酶(butyryl-Co A:acetate Co A-transferase,CoAT)基因的表达量显著升高(P<0.05);盲肠内容物中,低剂量组和高剂量组中的Bifidobaceterium spp.数量和CoAT基因表达量分别与第0天和阴性对照组相比有显著差异(P<0.05)。实验结果表明:副干酪乳杆菌L9可以调节肠道菌群,促进健康小鼠肠道中SCFAs的产生,并且与商业菌株Lactobacillus casei strain Shirota相比,副干酪乳杆菌L9对肠道内丙酸、丁酸的含量和肠道中Bifidobaceterium spp.的数量有更好的促进作用。

灭活型副干酪乳杆菌L9常温酸奶调节肠道菌群缓解便秘作用研究

为评价灭活型副干酪乳杆菌L9常温酸奶润肠通便和调节肠道菌群的作用,招募便秘受试者61人,随机分为两组,分别饮用普通常温酸奶和含L9的常温酸奶28 d,饮用结束后分析受试者便秘相关症状、粪便短链脂肪酸含量和肠道菌群的变化情况。结果显示:与常温酸奶组相比,灭活型副干酪乳杆菌L9常温酸奶组受试者排便次数显著增加(P<0.05),排便状况和粪便性状评分极显著降低(P<0.01);粪便中丁酸含量极显著增加(P<0.01),丙酸和总酸含量显著增加(P<0.05);并显著增加产短链脂肪酸的菌属,如Blautia、Ruminococcus_2和[Eubacterium]_hallii_group。研究结果表明,与普通常温酸奶相比,灭活副干酪乳杆菌L9常温酸奶具有更好的调节肠道菌群缓解便秘的作用。本研究旨在为开发含有灭活副干酪乳杆菌L9的相关功能食品提供理论依据。

副干酪乳杆菌L9缓解抑郁大鼠腹泻的作用机制

腹泻是抑郁症患者常见的顽固性症状。益生菌对一般腹泻有调节作用,而对抑郁患者的腹泻是否有调节作用尚不明确。本文通过慢性温和应激诱导建立大鼠抑郁腹泻模型,研究副干酪乳杆菌L9对抑郁大鼠腹泻的缓解作用。结果表明,相比于对照组,应激后大鼠糖水偏好度降低,强迫游泳不动时间延长,旷场试验中央区域的活动减少,表现抑郁行为;同时排便粒数增多,粪便干量及水分含量增加,全肠传输时间缩短,表现出腹泻症状。用L9干预后,排便粒数、粪便干量、粪便水分含量以及全肠传输时间均恢复到对照组水平。抑郁且腹泻大鼠结肠5-羟色胺4(5-HT4)受体mRNA表达水平异常升高,用L9干预能够恢复其5-HT4受体的mRNA表达水平。

树突状细胞激活介导副干酪乳杆菌L9对CD4^+T细胞的分化作用研究

为研究副干酪乳杆菌L9(L9)诱导CD4+T细胞分化的作用机制,以骨髓源树突状细胞(BMDCs)为模型,通过酶联免疫和流式细胞术分析L9对BMDCs调节性细胞因子分泌以及CD103表达的影响;利用L9诱导后的BMDCs与小鼠脾CD4+T细胞联合培养,分析调节性T(Foxp3+Treg)细胞的比例。结果表明,与空白组相比,L9的干预能够显著促进BMDCs中白介素(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的分泌以及CD103的表达(P<0.05),并呈现浓度依赖效应;同时,经L9诱导后的BMDCs,显著提高了CD4+T细胞中Foxp3+Treg细胞的比例(P<0.05)。L9通过调节BMDCs中调节性细胞因子的分泌以及CD103的表达,促进CD4+T细胞向Foxp3+Treg细胞分化。

副干酪乳杆菌L9直投式深冷发酵剂制备工艺研究

副干酪乳杆菌L9是一株功能性益生菌菌株。本研究利用液氮深冷技术制备副干酪乳杆菌L9(Lactobacillus paracasei L9)直投式发酵剂,并比较了液氮深冷与冷冻干燥工艺制备的发酵剂,菌株存活率及活性的差异。结果表明,液氮深冷组的菌体存活率可达93.7%±4.2%,显著高于冷冻干燥法组(77.5%±5.3%)(P<0.05);液氮深冷组发酵产酸能力与未经冷冻处理的对照组没有显著区别,但显著高于冷冻干燥组;液氮深冷组的β-半乳糖苷酶及LDH活性下降也显著低于冷冻干燥处理组;储藏试验证明,深冷工艺制备的副干酪乳杆菌L9直投式发酵剂可以在3个月储存过程中保持稳定的产酸活性。

副干酪乳杆菌L9的发酵特性及贮藏稳定性

本试验研究了副干酪乳杆菌L9在褐色乳基料中的发酵性能,同时比较了该菌株在不同酸度饮料中的稳定性。结果表明,L9在褐色乳基料发酵72h后的终点酸度达到180°T,能满足调配褐色活性乳饮料的产品需求。28d贮藏期内L9在乳饮料、桃汁、橙汁、胡萝卜汁中活菌数未发生显著变化,维持在1.5×10~8CFU/mL以上;在苹果汁及矿物质饮料BKL中存活率为1.6%;在葡萄汁及矿物质饮料JJ与MD中存活率低于1%。对各种饮料pH值及酸度分析发现,乳饮料、桃汁、橙汁及胡萝卜汁pH值>3.8,苹果汁、葡萄汁、矿物质饮料(JJ、MD、BKL)的pH值<3.8,pH值是影响菌数变化的主要因素;另外,L9在pH值相同的矿物质饮料BKL中的存活率高于葡萄汁,说明饮料的组成也影响L9的活菌数。

副干酪乳杆菌L9对过敏小鼠淋巴细胞Th1/Th2平衡的调节作用

目的:研究副干酪乳杆菌L9对牛乳β-乳球蛋白(BLG)过敏小鼠淋巴细胞Th1/Th2平衡的影响,探讨L9缓解机体过敏反应的机制。方法 :构建BLG过敏小鼠模型,通过ELISA方法和流式细胞术分析L9对过敏小鼠原代淋巴细胞和骨髓源树突状细胞(BM-DCs)细胞因子分泌及调节性T细胞(Foxp3+Treg)数量的影响。结果:不同剂量的活/热致死L9均可显著提高过敏小鼠淋巴细胞上清中IFN-γ水平,显著降低IL-4含量,减少BLG特异性抗体的产生(P<0.05);显著促进BM-DCs细胞上清中调节性细胞因子IL-10、TGF-β的分泌(P<0.05),提高过敏小鼠CD4+T淋巴细胞中Foxp3+Treg细胞比例,并且活菌与热致死菌的调节效果相似。结论 :L9能够调节过敏小鼠淋巴细胞的Thl/Th2失衡,这可能与树突状细胞和Foxp3+Treg介导的免疫抑制有关。

副干酪乳杆菌L9的发酵性能驯化及其机理研究

副干酪乳杆菌L9分离自大理乳扇,虽具有润肠通便,预防肠炎的益生功能,但耐酸、耐氧性差限制了其产业应用。本研究通过低p H值和高氧浓度胁迫对L9进行耐酸、耐氧适应性驯化,获得高耐酸耐氧菌株。结果表明:驯化后菌株的凝乳时间为13 h,比原始菌株缩短14 h;7 d发酵后,驯化菌株发酵终点酸度达到(227.2±0.8)°T,比原始菌株高(52.0±3.1)°T,驯化菌株活菌数达到(7.9±0.7)lg(CFU/m L)。发酵乳贮藏试验表明,驯化菌株的滴定酸度在4℃贮藏中无显著变化,4℃贮藏15 d活菌数保持稳定。驯化菌株的β-半乳糖苷酶活性显著高于驯化前菌株,并与酶基因表达量结果一致。副干酪乳杆菌L9经驯化后菌株β-半乳糖苷酶的基因表达量高,酶活性强,菌株产酸能力强,产酸速度快,贮藏期具有良好的稳定性,具有较好的产业化潜力。

Lactobacillus paracsei L9冷冻保护剂的优化

副干酪乳杆菌L9(Lactobacillus paracsei L9)是1株具有突出益生功能及生产性能的益生菌菌株,现阶段高性能发酵剂的制备是其成功应用于工业化生产的关键技术。而液氮深冷技术是高性能发酵剂制备的有效手段,其中保护剂的应用是液氮深冷工艺的关键因素。该研究以菌种存活率作为评价指标,在已有研究基础上对液氮深冷保护剂种类进行筛选,对保护剂浓度进行正交优化,并确定菌体与保护剂最佳混合比例。结果表明脱脂乳粉、果糖、海藻酸钠及Vc四种保护剂能对副干酪乳杆菌L9起到良好的保护作用;通过正交实验优化了保护剂配方:脱脂乳粉质量分数为10%,果糖质量分数为5%,海藻酸钠质量分数为5%,Vc质量分数为0.075%,可使菌体冷冻后存活率达到(92.23±0.86)%,显著提高在冻藏过程中菌体的存活率(P<0.05),较好地优化了Lactobacillus paracsei L9发酵剂的制备技术,并为实际的生产提供了理论依据。

Mn^(2+)在褐色乳酸菌饮料生产中的应用

试验旨在研究在中间发酵剂中添加不同浓度硫酸锰对副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)L9制作褐色乳酸菌饮料发酵时间及产品质量的影响。结果表明,向中间发酵剂中添加硫酸锰对于L.paracasei L9活菌数无显著性影响,但对L.paracasei L9在褐色乳酸菌饮料基料中产酸具有显著性影响。当在中间发酵剂中添加0~0.20‰硫酸锰时,L.paracasei L9在褐色乳酸菌饮料基料中产酸速度及极限酸度值随添加硫酸锰浓度升高而增加。当硫酸锰添加量大于0.20‰时,L.paracasei L9在褐色乳酸菌饮料基料中的产酸速率和极限酸度维持稳定不变。试验还考察了在中间发酵剂中添加不同浓度硫酸锰对褐色乳酸菌饮料在货架期内后酸、析水层及L.paracasei L9活菌数影响情况,结果表明褐色乳酸菌饮料产品在货架期内酸度及析水层随硫酸锰添加量升高而升高,但硫酸锰添加量对货架期内产品中活菌数影响无显著性差异。总体来说,向中间发酵剂中添加0.05‰~0.10‰硫酸锰,既可显著缩短副干酪乳杆菌L9发酵时间,又可有效保证产品综合质量。