副猪嗜血杆菌江西分离株药物敏感性及四环素耐药基因tet(B)分析

为了解副猪嗜血杆菌江西株的药物敏感性及其耐药基因,本实验采用K-B法测定分离株对57种药物的敏感性,结果显示20株副猪嗜血杆菌均对阿洛西林和万古霉素敏感,80%及以上的分离株对氨苄西林\舒巴坦、阿莫西林\棒酸等高度敏感。但分离株对恩诺沙星、氨曲南、四环素等的耐受性较强,某些菌株对多种药物具有抗性,其中6株菌能够耐受5种药物,5株菌能够耐受12种药物,3株菌能够耐受13种药物,甚至有2株菌能够耐受多达22种药物。将江西分离株的药物敏感性结果与其它国家或地区以及不同时间分离菌株的结果相比较表明,不同地区及不同时间段分离的菌株药物敏感性存在较大差异。为探索副猪嗜血杆菌耐药的分子机制,本研究设计引物并建立了检测四环素耐药基因tet(B)的PCR方法。运用所建立的方法检测江西株tet(B)基因,在15株四环素耐药菌株中检测出其中9株菌存在该基因,推测tet(B)可能是介导该菌对四环素耐药的主要分子机制之一。

田阳区仔猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为了了解百色市不同地区规模化养殖场及散养户中不同日龄断奶仔猪源副猪嗜血杆菌流行情况和对临床中常用抗生素的耐药性情况,为临床中仔猪源副猪嗜血杆菌防控及合理用药提供参考依据。本研究于2022-2023年采集田阳区养殖场及散养户中患呼吸道疾病的断奶仔猪鼻咽拭子及死亡仔猪胸腔积液和肺脏样品组织287份,对采集的287份病料样品采用细菌分离鉴定进行副猪嗜血杆菌鉴定,分别采用人工攻毒小鼠试验和K-B药敏纸片法检测其分离菌株的致病性和对常用抗生素的耐药性。结果显示:从田阳区不同乡镇规模化养殖场及散养户中采集的217份病料样品中分离到92株副猪嗜血杆菌(42.4%),分离的62株副猪嗜血杆菌对小鼠具有致病性(死亡率在40%~100%之间),且对青霉素、阿莫西林、氨苄西林等10种抗生素的耐药率为51.6%以上,本研究为田阳区不同乡镇规模化养殖场及散养户中仔猪副猪嗜血杆菌病的综合防控提供参考。

一株4型副猪嗜血杆菌的分离鉴定与耐药性分析

为研究河南省济源市某养猪场副猪嗜血杆菌(Haemophil us parasuis,HPS)流行情况和耐药性,便于开展有效防控,采集了养猪场疑似HPS病死猪肺脏、关节液等病料,进行细菌纯化培养、生化试验、PCR鉴定、血清分型鉴定和药敏试验。结果表明,从该猪场分离到一株4型副猪嗜血杆菌,该分离菌对头孢曲松、头孢噻肟、氨苄西林、阿莫西林敏感。本研究可为HPS病诊断和抗生素药物治疗提供参考。

2022-2023年副猪嗜血杆菌病的流行情况调查分析

为了解副猪嗜血杆菌病的流行情况,从全国48家猪场采集疑似副猪嗜血杆菌感染的组织样本285份,采取荧光定量检测infB基因的检测方法,并按照样本阳性率、猪场阳性率、猪年龄、采样季节、免疫与否等进行分类分析。结果出现:81.3%猪场存在副猪嗜血杆菌感染;副猪嗜血杆菌感染在猪的不同生长阶段均十分严重;冬春季节的副猪嗜血杆菌阳性率(77.6%)显著高于夏秋季节的(55.8%);疫苗免疫场的副猪嗜血杆菌阳性率比非免疫场的低59.3%。以上结果表明,当前国内副猪嗜血杆菌病流行情况较严重,且存在明显季节性,通过接种疫苗进行预防,可有效降低副猪嗜血杆菌检出率。

副猪嗜血杆菌血清7型crp基因缺失株的部分生物学特性

副猪嗜血杆菌(HPS)是引起猪格拉瑟病(Glasser’s disease)的病原菌,给全球和中国规模化养猪业造成了重大经济损失。副猪嗜血杆菌血清型众多,其中血清7型是近年来分离比例越来越高的血清型,也是危害越来越严重的血清型。crp是最重要的系统调控因子之一,在细菌感染过程中对细菌适应环境变化起着至关重要的作用。为了筛选副猪嗜血杆菌血清7型crp基因缺失弱毒株,采用自然转化法构建了副猪嗜血杆菌血清7型临床分离株HPS7的crp基因缺失株,对HPS7及其crp基因缺失株的生长特性、生物膜形成、抗药性、毒力等进行了研究。结果表明,HPS7的crp基因缺失后,生长显著减慢,自凝速度减慢,生物膜形成能力明显减弱,对大部分抗生素的抗性降低,对豚鼠的毒力降低。以上结果说明crp基因对HPS7的生长、抗药性、毒力均有明显影响。本研究结果为筛选副猪嗜血杆菌血清7型弱毒株提供了参考。

副猪嗜血杆菌江西株的分离鉴定及药敏试验

从江西省彭泽县某猪场出现咳嗽、呼吸困难、胸膜有化脓性纤维蛋白渗出物病变的病死猪中分离到4株革兰氏阴性细小杆菌,对其进行培养特性和生化特性鉴定;用副猪嗜血杆菌16S rRNA的特异性PCR引物,通过PCR技术可从分离菌中扩增出821 bp的特异基因片段,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明,4株分离菌对头孢唑啉高度敏感,对头孢哌酮、氯霉素等敏感,而对复方新诺明、青霉素G等有抵抗力。小白鼠攻毒试验结果显示4株分离株均有致病性。

河南省安阳市副猪嗜血杆菌流行菌株调查与耐药性分析

为了解河南省安阳市副猪嗜血杆菌流行菌株的血清型和耐药性情况,2022年从该地区25家养猪场无菌采集临床疑似感染副猪嗜血杆菌的病死猪肝脏、肺脏、关节渗出液等组织病料175份,采用细菌分离纯化培养、形态学观察、“卫星生长”培养、生化反应和PCR鉴定等方法进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,应用琼脂免疫扩散法进一步进行血清分型,采用Kirby-Bauer纸片法检测分离菌株对16种抗生素的耐药性。结果显示:从175份组织病料中检测出34株副猪嗜血杆菌,检出率为19.43%;分离菌在含有NAD和犊牛血清的TSA培养基上产生针尖大小、无色透明、光滑湿润的菌落,镜检可见革兰氏阴性、长杆状、细丝状等多形态菌体,在金黄色葡萄球菌周围菌落出现“卫星生长”现象,且无溶血,分离培养结果符合副猪嗜血杆菌特征。经PCR扩增测序,分离菌株与GenBank中公布的副猪嗜血杆菌16S rRNA序列同源性在97%以上;共鉴定出4型14株、5型4株、6型3株、13型8株和未定型5株,分别占41.18%、11.76%、8.82%、23.53%和14.71%;34株副猪嗜血杆菌对对阿莫西林、青霉素G、链霉素、土霉素4种抗生素耐药性最高,耐药率为88.24%~94.12%,多重耐药较严重,至少对5种以上抗生素产生耐药性,以9重耐药最多。结果表明,河南省安阳市猪场存在一定程度的副猪嗜血杆菌流行,流行菌株血清型复杂,耐药严重。本调查为河南省安阳市副猪嗜血杆菌病防控提供了数据支撑。

2012年我国部分省市规模化猪场副猪嗜血杆菌分离鉴定及菌株血清分型

为掌握2012年我国猪场副猪嗜血杆菌(Hps)感染的发病状况,在我国部分省市规模化猪场采集疑似副猪嗜血杆菌病猪的心包积液及发生纤维素性浆膜炎的肺脏等病料共168份,通过病原分离培养、形态及培养特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,最终分离出51株副猪嗜血杆菌,分离率约为30.4%。对51株副猪嗜血杆菌用琼脂扩散法进行血清分型,得到4型的6株(11.8%),5型的9株(17.6%),13型9株(17.6%),12型、14型各2株,1型、6型、10型、11型各1株,未能确定血清型19株,4型、5型、13型占总比例的47.1%,占有毒力血清型(强毒和中等毒力血清型)比例80.0%,表明副猪嗜血杆菌4型、5型、13型菌株是我国的优势血清型。

副猪嗜血杆菌河南株的分离鉴定及药敏试验

为弄清河南省规模化猪场副猪嗜血杆菌的感染情况、培养特性及药物敏感特性,并为副猪嗜血杆菌病的诊断、防治和进一步研究提供依据,对河南省3个猪场出现疑似副猪嗜血杆菌感染的病猪进行病理剖检、细菌分离培养、生化鉴定和药敏试验。结果表明,分离到的致病菌经形态特征和生化反应鉴定,有3株为副猪嗜血杆菌。药敏试验显示3株分离菌对左旋氧氟沙星均高敏,对恩诺沙星、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、头孢噻呋钠为高度或中度敏感,而对替米考星、阿莫西林、氨苄青霉素等有抵抗力。

副猪嗜血杆菌黑龙江株的分离与鉴定

为确定黑龙江某猪场发病猪群的病原,本研究从疑似浆膜炎的病料中分离到一株革兰氏阴性细小杆菌,通过对其进行细菌形态学、培养特征、生化特性和16S rRNA基因PCR鉴定,结果表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌(HLJ-1分离株)。16S rRNA基因序列分析结果显示:该分离菌株与参考株的基因同源性达99%;药敏试验结果表明HLJ-1分离株对头孢曲松、头孢噻肟等β-内酰胺类抗生素高度敏感;小白鼠致病性试验结果显示,该分离株具有较强致病性。

副猪嗜血杆菌河南流行株的分离鉴定及分型

为了解河南省副猪嗜血杆菌病的流行情况,对2017—2018年采自河南省不同地区的45份疑似病料,进行细菌分离及形态学观察、培养特征鉴定、PCR鉴定及分型。结果显示,共分离鉴定出12株副猪嗜血杆菌,血清型为1、2、4、5、7、13型和不可分型。其中,血清型1型2株,分别命名为XX-3、HB-1;血清型2型1株,命名为XX-4;血清型4型1株,命名为ZJ-1;血清型5型4株,分别命名为LY-1、DF-1、XX-2、KF-1;血清型7型2株,分别命名为SQ-2、XX-1;血清型13型1株,命名为NY-1;还有1株不可分型,命名为SQ-1。可见,河南省存在多个副猪嗜血杆菌血清型,且不同地区血清型不一致,1、5、7型为优势血清型。

副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究

为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。

副猪嗜血杆菌上海株的分离鉴定及耐药特性的研究

从送检的病猪内脏中分离到4株副猪嗜血杆菌疑似菌株,经过培养菌落及镜检形态观察、V因子依耐性试验及卫星生长现象、溶血性检查、生化特性以及特异的PCR检测,对其做了准确的鉴定,均为副猪嗜血杆菌。将4株分离株PCR扩增产物进行测序分析并与GenBank中报道的部分副猪嗜血杆菌的同源性达到97.3%-100%。药敏试验结果表明分离菌株已对新生霉素、阿米卡星、林可霉素、红霉素和庆大霉素等抗生素产生了较强的耐药性,仅阿奇霉素、头孢拉定、菌必治、先锋必、氧氟沙星和呋喃妥因等药物抑菌效果较好。

某规模化猪场副猪嗜血杆菌分离鉴定及药敏试验

本研究通过某规模化猪场送检的猪心包积液、心血及肺脏、肝脏和关节液等病料,按照副猪嗜血杆菌的分离方法,分离纯化出一株疑似副猪嗜血杆菌的菌株。经革兰氏染色、培养特性观察、NAD依赖试验和生化试验确定分离的菌株为副猪嗜血杆菌。生化结果显示分离菌株可以发酵蔗糖、麦芽糖、棉子糖、木胶糖、葡萄糖和半乳糖;不发酵阿拉伯糖、鼠李糖甘醇、肌酐和枸橼酸盐等;同时氧化酶试验和氨基酸对照试验呈阴性;药敏试验结果显示分离菌株对林可霉素、氧氟沙星、红霉素、氯霉素、环丙沙星、四环素、庆大霉素高度敏感;对诺氟沙星、新霉素、阿米卡星呈中度敏感;对卡那霉素、氨苄青霉素、阿莫西林耐药。

副猪嗜血杆菌新疆株的分离及PCR鉴定

从新疆北疆6个规模化猪场的37例发病猪病料中分离到两株疑似副猪嗜血杆菌(HPs)。经形态染色镜检、培养特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPs。根据副猪嗜血杆菌特异性引物进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp预期特异性条带,确定分离株为副猪嗜血杆菌。这是目前为止新疆地区首次分离到HPs。

6株副猪嗜血杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析

对福建省一些猪场临诊疑似副猪嗜血杆菌感染的病例进行细菌分离鉴定,PCR扩增分离菌株的16S r RNA并进行测序分析,对分离菌进行细菌形态和PCR鉴定及序列分析。结果显示,获得6株副猪嗜血杆菌分离株,该6株分离株之间的同源性在99%以上,而与国内外参考菌株序列之间的同源性在84.5%-99.2%。发育进化树分析结果表明,分离菌株与血清4型和5型的关系较近,与其他血清型关系较远。研究建立了副猪嗜血杆菌的分离培养方法,并对分离株进行了PCR鉴定和16S r RAN序列分析,为副猪嗜血杆菌病的诊断与防治奠定基础。

仔猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为了了解湖南省衡阳市祁东县不同规模化养猪场及散养户中仔猪副猪嗜血杆菌的流行情况和耐药性。采集衡阳祁东地区不同规模化养猪场及散养户中患呼吸道病死仔猪的口鼻拭子、胸腔积液、肺脏等病料组织187份,采用细菌分离培养、形态学观察、卫星试验和PCR方法进行副猪嗜血杆菌鉴定,并采用人工感染小鼠试验和K-B药敏纸片法分别检测副猪嗜血杆菌的致病性和耐药性。结果显示,从采集的187份病料样品中分离到78株副猪嗜血杆菌,分离率为41.7%,其中分离的50株副猪嗜血杆菌可以引起小白鼠死亡,为致病性菌株;此50株致病性副猪嗜血杆菌对青霉素、阿莫西林、氨苄西林等8种药物的耐药率在44.0%~50.0%之间,对其他药物的耐药率为4.0%~44.0%。本研究为仔猪副猪嗜血杆菌病的合理用药及防控提供参考。

浙江省副猪嗜血杆菌流行株分离鉴定及药敏试验

为了研究浙江省副猪嗜血杆菌流行菌株耐药性,试验从浙江省杭州、嘉兴、湖州、绍兴和金华等地区8个不同规模猪场典型病例中分离鉴定出了13株副猪嗜血杆菌临床分离株,采用纸片法检测了其对21种临床常用药物的耐药性。结果表明:浙江省副猪嗜血杆菌分离株对大多数常用抗生素敏感,如多西环素、氟苯尼考、阿奇霉素等,对氨苄西林、复方新诺明、头孢类抗生素有较强的耐药性;不同分离株的耐药性有较大的地域、猪场甚至是猪只或分离部位差异。

副猪嗜血杆菌安徽株分离鉴定与药敏试验

从安徽某养猪场送检的病猪中分离到2株细菌,经细菌形态、染色镜检、培养特性和生化试验鉴定为副猪嗜血杆菌。经药敏试验显示,2株分离细菌对头孢拉定、先锋Ⅴ、氟哌酸均高度敏感;对环丙沙星、四环素、强力霉素均中度敏感;对阿莫西林、金霉素呈低度敏感。本试验为该猪场副猪嗜血杆菌病的防治提供了理论依据。

副猪嗜血杆菌福建株的分离与鉴定

副猪嗜血杆菌（Hps）引起猪的多发性浆膜炎和关节炎,该病又称为革拉斯氏病（Glasser＇s Disease）,被证实是由副猪嗜血杆菌所引起。副猪嗜血杆菌影响2周龄到4月龄的青年猪,主要在断奶后和保育猪阶段发病,通常见于5~8周龄的猪,