功能化多肽的研究概述

主要从胶原蛋白肽,弹性蛋白肽,双亲多肽和选择亲合肽,概述了国内外关于功能化多肽的研究进展。

功能化多肽水凝胶细胞外基质对神经干细胞增殖分化的调控研究

目的探讨一种整合精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）环肽的功能化多肽水凝胶RADA16-c（RGDfK）细胞外基质对神经干细胞（NSCs）增殖分化的调控影响，以期为涉及NSCs增殖分化调控因素的研究提供一种能高度模拟体内三维条件的体外仿生研究模型。方法收集新生1d龄SD大鼠脊髓组织，采用完全培养基培养脊髓源性NSCs，采用细胞免疫荧光染色观察NSCs形态并鉴定。实验分3组，即Ⅰ型胶原组、基本序列为16个氨基酸残基的两性多态水凝胶（RADA16）组和RADA16-c（RGDfK）组，分别选择Ⅰ型胶原、RADA16及RADA16-c（RGDfK）[由ac-（RADA）4-CONH2和ac-（RADA）4-GG-cyclo（RGDtK）按摩尔比3：1物理混合而成]这3种水凝胶，采用AR2000EX型流变仪测量水凝胶的弹性模量，建立水凝胶细胞外基质与脊髓源性NSCs三维共培养模型，通过噻唑蓝（MTT）法检测不同水凝胶细胞外基质体系中NSCs的增殖活性，及细胞免疫化学染色和激光共聚焦观测技术观察NSCs的分化表达。结果（1）RADAl6及RADA16-c（RGDfK）水凝胶弹性模量在生理条件下分别为（0．42±0．07）kPa及（0．47±0．09）kPa，2者间差异无统计学意义（P〉0．05）；而Ⅰ型胶原弹性模量为（0．87±0．12）kPa，明显强于其他2组，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）RADA16-cRGDfK）细胞外基质中神经球形态细胞团均匀分布，克隆球直径相当，介于200～300μm。RADA16组和RADA16-（cRGDfK）组较Ⅰ型胶原组具有更好的促细胞增殖特性，其中RADA16-（cRGDfK）组对NSCs体外增殖的支持能力最优，与其他2组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。（3）RADA16组和RADA16-c（RGDfK）组在血清诱导环境下可见大量神经前体细胞分化为神经胶质细胞，神经元分化比例较低，分别为17．6％±3．1％及19．0％±3．6％，与Ⅰ型胶原组神经元分化比例（10．6％±2.3％）差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论功能化多肽水凝胶RADA16-c（RGDfK）细胞外基质具有优良的神经细胞相容性和细胞黏附性，对体外脊髓源性NSCs的增殖分化有良好的促进作用，可作为神经细胞组织工程研究的新型载体。

功能化多肽在脊髓损伤中的研究进展

正常组织细胞外基质（ECM）是一种纳米级三维网络环境，细胞在这种环境中进行扩增、动态运动和营养交换及废物排泄，发挥生命机能。脊髓损伤后原发及继发性损伤改变了这种脊髓微环境，使机体失去一定功能。近年来，随着脊髓组织工程学的发展，希望能找到一种真正模拟脊髓组织细胞生长环境的材料，以期对损伤组织的修复。

功能化自主装多肽RADKPS水凝胶对犬椎间盘退变的延缓作用

目的观察RADKPS水凝胶对犬椎间盘退变的延缓作用。方法筛选椎间盘整体情况良好犬16只,每只选取4个椎间盘(L 3~4、L 4~5、L 5~6、L 6~7)穿刺建立椎间盘退变模型,L 7~S 1椎间盘作为正常对照组不作处理。L 3~4注射不含活性片段的RADA16-I水凝胶(RADA16-Ⅰ组),L 4~5注射PBS缓冲液(PBS组),L 5~6注射RADKPS水凝胶40μL(RADKPS组),L 6~7注射BMP-7(BMP-7组)。造模前4周、造模后4周及干预治疗4、8、12周均进行MRI检查测定椎间盘相对灰度值指数(RGI);造模前4周、造模后4周、干预治疗12周进行X线检查测定椎间盘相对高度指数(DHI%)。干预治疗12周取髓核组织进行HE染色及Ⅱ型胶原、蛋白多糖免疫组化染色,检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖平均光密度值,采用ELISA法检测髓核组织蛋白多糖及Ⅱ型胶原的含量。结果注射干预药物后,RADKPS组椎间盘RGI、DHI%未见明显改变(P均>0.05),而BMP-7、RADA16-Ⅰ、PBS三组椎间盘RGI、DHI%均随干预治疗时间延长逐渐降低(P均<0.05)。RADKPS组髓核组织结构完整,可见规则的团簇样髓核细胞,细胞外基质染色均一;BMP-7、RADA16-Ⅰ、PBS三组均有不同程度的不规则髓核细胞并且细胞逐渐被胶原所代替。治疗8、12周,BMP-7、RADA16-Ⅰ、PBS三组髓核组织Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量均低于RADKPS组(P均<0.05)。结论RADKPS多肽水凝胶对椎间盘退变具有延缓作用。