旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建

为了克隆和研究旋毛虫新生幼虫功能性抗原基因 ,采用酸性异硫氰酸胍 酚 氯仿一步法提取新生幼虫总RNA ,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA ,反转录合成第一链cDNA及第二链cDNA ,用CHROMASPIN 40 0柱离心层析纯化后 ,与载体λZAPExpress连接。体外包装后得到中国猪旋毛虫 (Trichinellaspiralis)分离株新生幼虫cDNA文库。文库容量为2 .0× 10 6,重组率为 98.6 % ,插入片段长度在 0 .4× 10 3— 2 .0× 10 3bp。