GPR120选择性剪切异构体2的高通量药物筛选细胞模型的构建

目的:建立GPR120选择性剪切异构体2的功能性筛选模型,筛选GPR120的激动剂和抑制剂,开发防治糖尿病等疾病的药物。方法:从健康人胎脑cDNA文库中得到缺失了第3外显子的GPR120选择性剪切异构体2(hGPR120-s)的cDNA,将其克隆到pcDNA3载体中,构建pcDNA3/hGPR120-s重组表达质粒,继而转染HEK293细胞,通过G418筛选,获得稳定表达该异构体的真核重组细胞系。利用特异性配体亚麻酸和GW 9508探索和优化了筛选条件。并初步应用该模型研究各种天然脂肪酸的构效关系。结果:建立了稳定可靠的高通量筛选模型,Z因子=0.69。结论:该系统适合于GPR120激动剂的高通量筛选。