秋水仙素及切根处理对糯玉米单倍体加倍速率的影响

为探究适宜的糯玉米单倍体加倍方法,本研究以吉科诱1200为父本,对母本吉科糯25进行杂交诱导,探究了秋水仙素处理下不同根长和不同处理时间对糯玉米单倍体加倍效率的影响。试验结果表明:切根浸泡处理能有效提高糯玉米单倍体加倍效率,且对根长3-7mm的糯玉米单倍体以0.05%秋水仙素配2.5%二甲基亚砜溶液进行根尖浸泡处理42h,能更有效地提高糯玉米单倍体加倍速率。

小麦×玉米产生小麦单倍体的染色体加倍研究

小麦与玉米杂交产生的单倍体植株无染色体自然加倍发生 ,为获得加倍单倍体 ,进行了两种秋水仙素加倍处理。结果表明 ,在培养基中直接加入秋水仙素处理已培养 7d的幼胚 ,无秋水仙素对照的幼胚萌发率为 6 7.4 % ,存活的植株均未结实 ;而经过浓度为 5 0mg/L、10 0mg/L和 2 0 0mg/L秋水仙素处理的幼胚萌发率分别是 32 .1%、2 6 .4 %和 16 .3% ,加倍率分别是 85 .7%、10 0 %和 5 0 %。秋水仙素处理时间在 2 4～ 72h范围内 ,随着处理时间的延长 ,幼胚萌发率随之降低 ,死亡率随之增加 ,以 2 4h效果较好。用浓度为 5 0 0mg/L、75 0mg/L、10 0 0mg/L的秋水仙素溶液浸根加倍处理 ,平均加倍率分别是 89.6 %、76 .0 %和 73.3% ,而用浓度为 5 0 0mg/L秋水仙素处理壮苗获得了98.2 %的加倍率和 93.2

用花药培养创建小麦加倍单倍体作图群体

用花药培养创建加倍单倍体作图群体是构建数量性状基因作图群体的有效途径，但通过花药培养生产小麦加倍单倍体的成功率较低。该文考查了小麦幼穗发育时期、低温处理幼穗及高温处理接种花药对花粉愈伤诱导率的影响。采用春播小麦做为花药供体，推迟花药接种时间，避免试管苗在低温条件下越夏，有利于早移栽，培育冬前壮苗，同时加强试管苗移栽后的田间管理，保证安全越冬，有效地提高了花药培养生产加倍单倍体的成功率。通过花药培养创建了一个具有１９１个个体的小麦加倍单倍体作图群体。

籼粳交加倍单倍体后代性状遗传的研究

对一个典型的籼/粳组合、窄叶青8号/京系17的F_1花药进行培养,所获二倍体花粉植株除约20％自然结实率为0外,其余植株的结实率在1%至正常结实之间,65％株系在75％以上,并稳定地传至自交后代。对130多个加倍单倍体（DH）多种性状的遗传进行了研究与分析,结果表明,花药培养可以克服籼/粳后代包括育性在内的各种性状长期分离不易稳定的严重障碍。生育期、株高、每穗粒数及千粒重等数量性状均为连续分布,呈正态曲线,为多基因控制。涉及籼与粳分类的一些性状,如叶毛、稃毛、酚反应、落粒性等的遗传,有的为一对主基因控制,有的为多基因决定。根据程氏形态指数对各个DH系的籼、粳属性进行分类,可以看到除籼型与粳型株系各占14％外,其余为各种偏籼和偏粳类型,形态指数也基本上呈正态分布。两个亲本均为早、中熟品种,但光温反应有所不同。DH群体对光温反应是多种多样的,既有不感光也不感温类型,也有对光温反应均较强类型等。各种性状都出现超亲分离,表明亚种间杂种的性状遗传存在大量多基因累加和互补作用。同时对籼/粳杂种不育的原因与产生的机理进行了讨论。

一个辣椒杂交种的加倍单倍体(DH)群体果实性状的遗传分析

以一个牛角椒组合(‘97403’ב97410’杂交而成)作为供体,通过花药培养技术构建了103个加倍单倍体(DH)系组成的DH群体,再以此DH群体为试验材料,对该群体果实性状进行遗传分析。结果表明:果实横径、果肉厚、果形指数、单果质量、果实纵径等5个性状的遗传力分别是82.3%、80.8%、80.5%、75.7%、70.9%,最少基因对数分别为20.6、8.4、6.1、33.9、10.0。估算各性状的偏度和峰度系数,分析影响各性状的基因作用方式,结果表明:影响单果质量和果实横径的多基因间存在互补作用,控制果肉厚的多基因间可能存在互补,果实纵径、果形指数各自的基因间无互作关系。

玉米单倍体诱导及化学加倍方法的研究

【目的】玉米单倍体的诱导及加倍．【方法】以北方春玉米区高抗丝黑穗病自交系K88和高感丝黑穗病自交系Gll5的杂交F，代作为母本，以5个诱导系（JS6-11～JS6-15）作为父本，进行单倍体杂交诱导试验；以秋水仙素作为玉米单倍体人工染色体加倍药剂，采取4种（浸根法、浸芽法、滴心叶法、针刺生长点法）处理方法，每种方法设置3个浓度梯度（0．2、0．4和0．6mg·mL^-1），并分别以体积分数2％DMSO＋5％甘油溶液作为辅助药剂，进行单倍体加倍试验．【结果和结论】花丝长短和授粉时间对单倍体诱导率有重要影响．延迟授粉（长花丝≥7cm）的平均单倍体诱导率为17．0％，约为正常授粉（短花丝≤4cm）条件下的3．3倍；伏后授粉的诱导率平均为18．4％，约为伏期授粉的3．4倍，证明延迟授粉时间和较低的温度有利于提高单倍体诱导率．秋水仙素加倍试验表明，浸根法对植株伤害较严重，存活率低于50％；针刺生长点法（0．6mg·mL^-1）和滴心叶法（0．4mg·mL^-1）的散粉率较高（45．9％，28．9％），相应的结实率也较高（15．2％，11．1％），说明针刺生长点法处理效果最好，滴心叶法次之．

糯玉米单倍体诱导和加倍的研究

【目的】探索单倍体诱导系在糯玉米单倍体育种应用中的可能性及适宜的糯玉米单倍体诱导和加倍方法,以加快我国糯玉米育种进程,提高糯玉米育种效率。【方法】诱导试验中以吉林农业大学选育的5个诱导系(HG1-HG5)作为诱导材料对不同糯玉米母本材料进行诱导,比较不同花丝长度、授粉时期和果穗部位对糯玉米单倍体诱导率的影响;加倍试验中,以秋水仙素作为糯玉米单倍体人工染色体加倍药剂,采取4种(浸种法、浸芽法、滴心叶法、针刺生长点法)处理方法,每种方法设置3个秋水仙素质量浓度梯度(0.3,0.5和0.7mg/mL)并辅以2.5%二甲基亚砜(DMSO)作为助渗剂,筛选适宜的糯玉米单倍体加倍方法。【结果】诱导试验结果表明,延迟授粉(花丝长度≥8cm)单倍体诱导率均值为17.9%,约为正常授粉(花丝长度≤4cm)条件下的2.9倍;伏后授粉单倍体诱导率均值为19.4%,约为伏期授粉的3.1倍;果穗顶部的诱导率(6.87%)高于底部(5.61%)。加倍试验结果表明,浸种法对植株伤害较严重,存活率低于50%;针刺生长点法(0.7 mg/mL)和滴心叶法(0.5 mg/mL)的散粉率较高(45.9%,28.9%),相应的结实率也较高(15.2%,11.1%),说明针刺生长点法处理效果最好,滴心叶法次之。【结论】糯玉米单倍体育种能提高糯玉米育种效率。

果树单倍体和加倍单倍体(DH)技术研究与应用进展

果树具有生殖周期长、基因高度杂合、树体高大、通常自交不亲和的特点,导致其无法通过传统育种方法获得纯系。单倍体和加倍单倍体(DH)的产生为解决这一问题提供了一种强有力的生物技术工具。与传统育种方法相比,单倍体和加倍单倍体(DH)可缩短从杂合亲本中获得纯系的时间,这一特点使其被广泛应用于植物育种和遗传研究。果树单倍体的获得及其加倍技术研究已有几十年的历史,虽然已取得重大进展,但仍然存在一些技术问题和应用障碍。综述了果树单倍体和加倍单倍体技术研究进展及其在果树育种中的应用:包括果树单倍体的获得方法、鉴定方法、单倍体加倍方法、在果树育种中的应用等,并就存在的问题及发展趋势作了初步的阐述和分析。

我国玉米地方种质的单倍体诱导和加倍特性研究

双单倍体(doubled haploid,DH)育种技术具有加速育种进程的突出优势,已成为玉米育种关键性核心技术并在国外广泛应用。本试验选用47份玉米地方种质,进行单倍体诱导和单倍体加倍特性研究。结果表明,47份玉米地方种质材料之间杂交诱导的拟单倍体率有显著差异,介于1.64%~14.50%之间,平均为5.95%。种植12份玉米地方种质的拟单倍体籽粒进行田间鉴定,标记鉴定准确率介于40.2%~82.3%之间,校正单倍体诱导率介于2.33%~6.45%之间,表明玉米遗传背景影响到籽粒标记的表达,单倍体诱导率有明显差异。将15份玉米地方种质拟单倍体于冬季在海南田间种植,加倍授粉株率介于2.7%~27.2%之间,加倍结实株率介于0.7%~8.9%。说明我国玉米地方种质的遗传多样性丰富,单倍体诱导率和加倍率具有明显差异,利用DH育种技术可以拓宽和加强我国玉米地方种质在玉米育种中的利用。

甜玉米单倍体诱导和加倍方法研究

【目的】探索单倍体诱导系在甜玉米单倍体育种中应用的可能性及适宜的甜玉米单倍体诱导和加倍方法,为加快我国甜玉米育种进程、提高甜玉米育种效率奠定基础。【方法】采用3个诱导系和4个甜玉米杂交种,设计4种秋水仙素化学加倍甜玉米单倍体的方法,对提高甜玉米单倍体诱导率和加倍率的方法进行比较研究。【结果】甜玉米单倍体诱导试验表明,3个单倍体诱导系的诱导率有极显著差异,其中以TY1的诱导率最高,为7.99%;4个甜玉米杂交种诱导率差异极显著,以"绿色先锋"的诱导率最高,为7.57%。秋水仙素加倍甜玉米单倍体试验表明,浸芽法和针刺生长点法对植株伤害较严重,存活率低于50%;浸种法(0.5 mg/mL秋水仙素)和针刺生长点法(0.3mg/mL秋水仙素)的散粉率较高(48.4%,28.9%),相应的结实率也较高(15.2%,11.1%),说明浸种法处理效果最好,针刺生长点法次之。【结论】适宜的单倍体诱导和加倍方法能显著提高甜玉米单倍体的育种效率。

玉米单倍体加倍效果的研究

本试验用高诱1号诱导的单倍体植株为材料,在5～6叶期用两种浓度的秋水仙素配以二甲基亚砜(DMSO)注射处理茎尖生长点,进行人工加倍,并对不同处理效果进行方差分析和多重比较。结果表明:从不同基因型的材料中诱导出的单倍体的加倍都是有效的,且不同基因型材料间有显著差异;0.5%浓度的秋水仙素的处理效果最好。

由小麦×玉米获得的普通小麦加倍单倍体后代的RFLP变异

用小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）的ｒＤＮＡ克隆ｐＴａ７１和与小麦基因组有部分同源性的玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）ＤＮＡ克隆作探针，对由小麦ｘ玉米获得的普通小麦加倍单倍体（ＤＨ）后代群体进行ＲＦＬＰ分析。结果发现，不但用ｐＴａ７１在这些ＤＨ后代中检测到ｒＤＮＡ所发生的明显的减少和扩增及非转录间隔区的限制性片段长度的变化，而且用与小麦基因组部分同源的玉米克隆ＭＲ１３和ＭＲ５０在一些ＤＨ后代中检测到缺失变异，特别是用ＭＲ１３在普通小麦ＤＨ系的１８号株的基因组中检测到大幅度的限制性片段长度的变化，即原来的４．３ｋｂ的强信号带消失，取而代之的是４０．０ｋｂ、２．５ｋｂ和２．０ｋｂ三条杂交带。这可能与小麦基因组ＤＮＡ较大的重排事件有关，也可能是由外源的玉米ＤＮＡ插入造成的。

玉米单倍体成熟胚组培加倍效果研究

以豫高诱一号(YHI-1)诱导系为父本诱导先玉335产生成熟单倍体子粒的胚为材料,采用MS培养基,用0.005%,0.01%,0.02%和0.03%的秋水仙素分别处理12,24和36 h,以不加秋水仙素的MS培养基为对照,统计成熟胚的成苗率以及成苗后单倍体植株的散粉率。结果表明,秋水仙素的质量分数越大,处理时间越长,成苗率越低,以0.005%质量分数的秋水仙素处理12 h,平均成苗率最高,达96.97%,0.03%的质量分数处理36 h最低,仅为24.23%,处理时间和质量分数之间存在极显著的互作效应。用较短时间(12 h)处理时散粉率随着秋水仙素质量分数的增加呈升高趋势,但在较高质量分数(大于0.01%)的秋水仙素条件下,散粉率随处理时间增加而降低。综合考虑散粉率和成活率,以0.005%的秋水仙素处理24 h最佳,综合效率达57.61%。

玉米单倍体与其加倍后代性状的相关性研究

利用8个不同基因型F1材料,经诱导和加倍获得大量单倍体和二倍体植株。研究单倍体与其二倍体之间12个形态性状的相关性。结果表明:植株个体从单倍体水平到二倍体,穗轴长、株高、穗位高和雄穗主轴长呈增大的趋势,穗行数保持相对稳定,雄穗一级分支数呈减小的趋势;除穗轴粗与穗行数的相关性外,其余多数性状间的相关性在单倍体和二倍体时期都具有相似性;穗轴长、穗行数、株高、穗位高、雄穗一级分支数和雄穗主轴长的相关性达显著或极显著水平;因此,在单倍体时期对性状进行适当的选择具有可行性。

玉米单倍体的诱导 加倍技术及其应用研究

孤雌生殖诱导系的单倍体育种技术在玉米育种中被广泛应用,极大地加快了育种进程。介绍了单倍体概念及其植物学形态;阐述了玉米单倍体的获得途径和加倍方法,以及育种中单倍体的筛选方法,其中人工获得单倍体的途径主要有远缘杂交、花药培养、小孢子培养、物理法诱导、化学法诱导、不定配子体诱导孤雄生殖、孤雌生殖诱导系诱导,加倍的方法主要包括单倍体的自然加倍和化学加倍,单倍体的筛选可以通过遗传标记性状、形态特征以及流式细胞仪和分子标记加以筛选;讨论了单倍体在缩短育种周期、群体改良、筛选突变体、构建基因定位群体,以及商业杂交种亲本保纯提纯方面的应用价值;分析了单倍体育种技术存在的主要问题,并对其应用前景进行了展望。

大麦加倍单倍体(DH群体)的建立及其在遗传育种中的应用

大麦加倍单倍体 (DH群体 )建立的方法很多 ,目前在大麦遗传育种中运用较多的主要有球茎大麦法、花药培养法和小孢子培养法等三种。大麦DH群体不仅为遗传学、形态发生学和分子生物学等基础研究提供了丰富的背景和遗传稳定的材料 ,而且对于单倍体的育种实践也有重要意义。本文简要综述大麦DH群体的建立方法及其在遗传育种中的应用 。

二甲基亚砜(DMSO)对烟草单倍体植株的染色体加倍效应

为提高烟草单倍体技术中的染色体加倍率,本文研究了运用二甲基亚砜(Dimethylsurfoxide,DMSO)混合秋水仙碱对烟草花培单倍体苗进行加倍的方法。结果表明:20g/L DMSO混合4g/L的秋水仙碱溶液对烟草花培单倍体苗的加倍率较单独使用秋水仙碱的加倍率提高2倍以上;运用该方法,作者在两年内成功构建烟草DH群体。

水稻加倍单倍体群体有效因子估计

利用生物技术创造的加倍单倍体材料，应用传统的数量遗传理论来估计基因数目的方法，即利用花药培养结合加倍技术，所获得的纯合稳定水稻加倍单倍体群体中极端类型株系，为增效（或减效）基因聚合体，与样本平均数比较，估计高差，以此离差绝对值的平方与加倍单倍体群体基因型方差的商，作为有效因子数目的估计值，估计了水稻三个杂交组合的株高、穗长、有效穗数、千粒重等四个性状的有效因子数，讨论了用加倍单倍体方法估计有效因子，比传统数量遗传方法的优越性。

用球茎大麦技术产生大麦加倍单倍体的初步研究

(1)大麦和球茎大麦的基因型对种间杂交和离体胚挽救的成功率有明显影响;(2)离体挽救时出苗率还受到胚龄和培养基成分的影响,胚龄较小(温室14天)时出苗率较高,在B_5培养基中加5g/l活性碳或再增加15ppm PP_(333)使两个杂交组合的出苗率分别达50.00％和51.61％;(3)染色体加倍成功率平均为34.90％,以0.075％秋水仙碱处理带2～5分蘖的成功率较高,最高的达62.50％,据试验结果推算,授粉100朵小花平均可得加倍单倍体5.29株,最高27.46株。

玉米单倍体加倍(DH)系籽粒性状表现的研究

玉米单倍体育种是快速选育纯合自交系的方法。研究利用单倍体诱导系,对来自BSSS杂种优势群的两个自交系BX08和BX19的杂交F1进行诱导获得单倍体,又经加倍获得33个加倍纯合系(DH),分析单倍体加倍纯合系与两个亲本及F1杂交种的果穗及籽粒性状表现。结果表明,单倍体加倍系的籽粒容积和质量比亲本籽粒都有所提高,子代的农艺性状获得显著改善,说明发生单倍体不是基因随机分离的结果,单倍体育种存在选择压力,有利于优良基因的累积,淘汰不良基因。