基于HPLC特征图谱和多成分定量分析建立加味四妙颗粒的质量评价方法

目的建立加味四妙颗粒的对照特征图谱和多种成分进行定量分析方法,为本品质量控制和评价提供方法与依据。方法对20批加味四妙颗粒进行HPLC测定,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)生成加味四妙颗粒对照指纹图谱并进行相似度评价,将对照指纹图谱与各阴性供试品、混合对照品图谱进行匹配,对共有峰进行药味归属指认和多成分定量测定。结果各批次加味四妙颗粒样品与生成的对照指纹图谱相似度均在0.9以上;标定了19个共有峰,其中1、4、15号峰来源于川牛膝,2、6、10号峰来源于醋延胡索,3、16、18号峰来源于苍术,5、7号峰来源于大血藤,8、11号峰来源于薏苡仁,9、14、17号峰来源于黄柏,12、13、19号峰来源于甘草;指认了4、5、9、10、13、14、17、18、19共9个共有峰,即杯苋甾酮、红景天苷、木兰花碱、延胡索乙素、甘草苷、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱、苍术素、甘草酸铵,在相应的浓度范围内线性关系良好(r>0.9995),加样回收率在96.71%~102.92%之间,精密度、稳定性、重复性、加样回收率RSD值均小于3.0%。结论建立的加味四妙颗粒HPLC对照特征图谱和多指标成分定量测定方法,为加味四妙颗粒的质量控制和评价提供参考依据。

HPLC法同时测定加味四妙颗粒中6种成分

目的建立HPLC法同时测定加味四妙颗粒(大血藤、黄柏、甘草等)中红景天苷、黄柏碱、甘草酸铵、延胡索乙素、盐酸小檗碱、甘草苷的含有量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm);以乙腈-0. 1%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1. 0 m L/min;柱温30℃;检测波长220、280、250 nm。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r> 0. 999 0),平均加样回收率98. 98%～100. 11%,RSD 0. 81%～1. 52%。结论该方法简便准确、专属性强,可用于加味四妙颗粒的质量控制。

加味四妙颗粒的药效成分含量测定

目的:建立HPLC-DAD波长切换法同时测定加味四妙颗粒中延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、木兰花碱、杯苋甾酮、甘草苷、甘草次酸共7个成分的含量。方法:采用Insert Sustain C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾(B)为流动相,梯度洗脱,DAD检测器,检测波长268 nm(0～22.5 min,检测木兰花碱,67～71 min,检测盐酸小檗碱)、280 nm(22.5～30 min,检测延胡索乙素)、237 nm(30～45 min,检测甘草苷)、247 nm(45～55 min,检测杯苋甾酮,71～85 min,检测甘草次酸)、284 nm(55～67 min,检测盐酸黄柏碱)。结果:各待测组分分离度良好;延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、木兰花碱、杯苋甾酮、甘草苷、甘草次酸7个成分的进样质量浓度分别在2.060～51.49μg·mL^(-1)(r=1.000)、3.111～77.77μg·mL^(-1)(r=1.000)、1.813～45.31μg·mL^(-1)(r=1.000)、1.960～49.00μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、2.019～50.48μg·mL^(-1)(r=1.000)、2.468～61.70μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、2.408～60.20μg·mL^(-1)(r=0.999 9)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为100.6%(RSD=1.6%)、100.3%(RSD=0.4%)、101.0%(RSD=1.3%)、100.7%(RSD=0.8%)、100.1%(RSD=1.9%)、101.6%(RSD=1.3%)、99.8%(RSD=1.7%)。结论:本试验建立的含量测定方法符合方法学验证要求,简便可靠,重现性好,可用于加味四妙颗粒的7个指标性成分的同时测定。

基于信息熵理论的正交设计结合指纹图谱优选加味四妙颗粒的提取工艺

目的优选加味四妙颗粒(MSG)的提取工艺。方法采用HPLC测定红景天苷、绿原酸、甘草酸铵、盐酸小檗碱、甘草苷的含量,以此5种指标成分的提取率、干膏收率及指纹图谱相似度为综合评分指标,通过正交试验考察料液比、提取时间和提取次数对提取工艺的影响,采用信息熵赋权法确定各指标的客观权重,实现对提取工艺的正交试验优选。结果根据综合评分结果,确定该制剂最佳提取工艺为加10倍量水,煎煮2次,每次30 min。3批验证综合评分均值为88.91,RSD为0.61%。结论优选后的工艺提取率高、稳定性和重复性好,适用于该制剂的工业化生产。

加味四妙散颗粒剂对实验性高尿酸高肌酐血症大白鼠的治疗作用

目的:观察加味四妙散颗粒剂对实验性高尿酸高肌酐血症大白鼠的治疗作用。方法:SD大鼠予以高嘌呤和含20%乙醇饮水喂养建立高尿酸高肌酐血症动物模型,分别喂养含0、0.1g/kg、0.5g/kg、1g/kg剂量的加味四妙散颗粒剂、立加利仙(1.0μg/kg)、别嘌醇(10μg/kg)4周后,取大白鼠血样测定血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、转氨酶(ALT)、血浆白蛋白(A lb)。结果:高嘌呤饲料和含20%乙醇饮水喂养大白鼠14d后可以复制高尿酸高肌酐血症的动物模型;加味四妙散颗粒剂可显著降低模型动物的UA、Cr、BUN的水平;立加利仙能有效降低血中UA水平,但对Cr、BUN、ALT、A lb没有影响;别嘌醇仅能略微降低血样中UA的水平,对Cr、BUN、ALT、A lb没有影响。结论:加味四妙散颗粒剂能明显降低实验性高尿酸高肌酐血症大白鼠血中的UA、Cr、BUN。