加味茵陈四逆汤对胆道闭锁肝纤维化幼鼠IL-17、IL-6与Th17及其特异性转录因子RORγt之间的影响

目的 探讨加味茵陈四逆汤对胆道闭锁(Biliary atresia, BA)肝纤维化幼鼠白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)与辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)及其特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RetinoicAcid-relatedOrphangammat, RORγt)之间的影响。方法 雄性SD大鼠幼鼠48只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。建立幼鼠胆道结扎模型,5 d后进行灌胃给药。用药10 d后,计算肝脏指数;各组行苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin, HE)及Masson染色观察肝组织病理改变;采用酶联免疫吸附试验测定血清IL-17和IL-6水平;采用流式细胞仪测定Th17细胞占CD+4T细胞比例;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)法测定RORγt mRNA表达。结果 模型组及各给药组肝脏指数高于假手术组(P<0.05);各给药组肝脏指数低于模型组(P<0.05);各给药组肝纤维化程度较模型组减轻;模型组及各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达高于假手术组(P<0.05);各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达低于模型组(P<0.05);中剂量组和高剂量组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD+4T细胞比例和RORγt mRNA表达低于熊去氧胆酸组和低剂量组(P<0.05)。结论 加味茵陈四逆汤可有效改善BA幼鼠肝纤维化程度,可能是通过降低血清IL-17和IL-6水平,从而降低Th17细胞水平及下调RORγt表达来发挥作用的。

加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)基因表达的影响。方法:雄性ICR小鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。采用腹腔注射30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,计算肝脏指数;试剂盒检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;各组行HE染色观察肝组织病理改变并进行肝纤维化分级;RT-q PCR法检测肝组织Smad7、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA表达。结果:(1)加味茵陈四逆汤中、低剂量组肝脏指数和HA、LN水平较模型组显著降低(P<0.05);(2)加味茵陈四逆汤各剂量组肝纤维化较模型组减轻(P<0.05);(3)与模型组比较,各给药组CollagenⅠmRNA表达显著降低(P<0.05),除加味茵陈四逆汤高剂量组外,各给药组Smad7 mRNA表达显著升高(P<0.05),除加味茵陈四逆汤低剂量组外,各给药组CollagenⅢmRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠Smad7表达,抑制CollagenⅠ、CollagenⅢ表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响

目的:观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)基因表达的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)腹腔注射建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,各组行HE染色,观察肝脏病理组织学改变。RT-q PCR法检测MMP1、TIMP1和TIMP2 mRNA表达。结果:(1)病理结果显示模型组肝纤维化明显,中药高、中、低剂量组较模型组纤维化减轻;(2)MMP1 mRNA模型组表达量与正常组比较明显减少(P<0.05),与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少(P<0.05);(3)TIMP1 mRNA、TIMP2 mRNA模型组表达量比正常组明显增多(P<0.05),与阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达,抑制TIMP1、TIMP2表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。

加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠TGF-β_1/Smads通路的影响

目的:探讨加味茵陈四逆汤预防肝纤维化过程中对TGF-β_1/Smads通路的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.1 g/kg)阳性对照组及加味茵陈四逆汤高(41.6 g/kg)、中(20.8 g/kg)、低(10.4 g/kg)剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组采用腹腔注射30%CCl4复制肝纤维化模型,造模同时给予相应药物,正常对照组与模型组给予等体积蒸馏水。给药14 d后,比较小鼠体质量和肝脏组织病理学改变;试剂盒检测血清ALT、AST水平;采用RT-q PCR检测肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低,血清ALT、AST水平显著升高,肝组织呈明显的纤维化改变,肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达显著升高。加味茵陈四逆汤能不同程度提高模型小鼠体质量,降低血清ALT、AST水平,改善肝组织病理学改变,并降低肝组织TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结论:加味茵陈四逆汤能预防CCl4诱导的肝纤维化,其作用机制可能与下调肝脏组织TβRⅠ、Smad3 mRNA的表达,从而阻滞TGF-β_1/Smads通路转导有关。

加味茵陈四逆汤治疗药物性肝损害30例总结

目的:观察加味茵陈四逆汤对药物性肝损害的临床疗效。方法:治疗组30例服用加味茵陈四逆汤,对照组30例服用肝泰乐。结果:治疗组的总有效率与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤对药物性肝损害具有明显的防治作用。

加味茵陈四逆汤治疗阳虚瘀毒型乙肝相关慢性肝衰竭30例

目的:观察加味茵陈四逆汤治疗阳虚瘀毒型乙肝相关慢性肝衰竭(CLF)的临床疗效。方法:将60例阳虚瘀毒型乙肝相关CLF患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组采用西医综合疗法治疗,治疗组在对照组的基础上采用加味茵陈四逆汤治疗,2组均治疗8周。比较2组治疗前后的肝功能[血清总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)]、凝血功能[凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)]、终末期肝病模型(MELD)评分、中医证候积分、病死率,评定综合疗效。结果:总有效率治疗组为86.67%(26/30),优于对照组的73.33%(22/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组肝功能、凝血功能、MELD评分、中医证候积分改善情况均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。病死率治疗组为10.00%(3/30),对照组为20.00%(6/30),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可有效减轻阳虚瘀毒型乙肝相关CLF患者的临床症状,改善肝功能及凝血功能,降低病死率,值得临床推广应用。

加味茵陈四逆汤含药血清对TGF-β_1干预的大鼠肝星状细胞TGF-β_1/Smads通道及胶原蛋白的影响

目的:探讨加味茵陈四逆汤含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)干预的大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smad通道相关蛋白及胶原蛋白3(Collagen3)生成量的影响。方法:以大鼠肝星状细胞HSC-T6为研究对象,将细胞分为空白组,模型组,阳性药物组(甲强龙,10%含药血清),加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组(10%含药血清),共6组。除空白组外,其余均给予TGF-β1(10 g·L-1)并采用相应10%的含药血清培养,并采用蛋白质免疫印迹(Western blot)的方法检测各研究组含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6 Smad3,Smad7,Collagen3蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,模型组HSC-T6细胞Smad3,Smad7,Collagen3蛋白表达升高,Collagen3蛋白表达升高较为明显(P<0.05);与模型组比较,加味茵陈四逆汤低剂量明显降低Smad3蛋白表达(P<0.05),加味茵陈四逆汤中剂量明显降低Collagen3蛋白表达(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤含药血清使Smad3,Collagen3蛋白表达下调,Smad7未见明显变化,提示本药在离体条件下可以延缓肝纤维化的进程。

加味茵陈四逆汤干预肝纤维化/肝硬化的网络药理学作用机制探讨

目的基于网络药理学方法探讨加味茵陈四逆汤(JWYCSNT)干预肝纤维化/肝硬化的作用靶点及通路,预测其潜在作用机制。方法基于TCMSP数据库提取加味茵陈四逆汤的有效活性成分及作用靶点,通过人类基因数据库(GeneCards)获取肝纤维化/肝硬化治疗靶点,并利用R语言筛选共同靶点;使用Cytoscape软件构建"药物有效活性成分-疾病靶点"可视化调控网络图,利用STRING数据库构建蛋白互作网络图(PPI),然后运行R语言对PPI进行核心蛋白的筛选;最后,通过R语言对共同靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共获得132个有效活性成分,93个共同靶点;核心蛋白主要包括MAPK8/JNK、PPARG、RELA/NF-κB等;GO功能富集分析涉及101个,影响核受体活性、基因转录等过程;KEGG通路富集分析得出114条通路,涉及细胞凋亡、乙型肝炎、丙型肝炎、肝细胞性肝癌等通路,涵盖了MAPK、NF-κB、PPAR、Wnt等肝纤维化重要通路。结论通过网络药理学的方法,证实加味茵陈四逆汤具有多成分、多靶点、多通路的作用特点,并预测其干预肝纤维化/肝硬化的潜在作用机制,可为基础及临床研究提供参考依据。

中药配合预见性护理在胆道闭锁患儿术后中的应用

目的探讨加味茵陈四逆汤配合预见性护理在胆道闭锁患儿术后中的应用效果。方法52例胆道闭锁患儿,均行肝门空肠吻合术治疗后,随机分为对照组和研究组,各26例。所有患儿进行加味茵陈四逆汤治疗,对照组进行常规术后护理,研究组在对照组基础上进行预见性护理,比较2组患儿干预前、干预3个月黄疸消退情况、血清总胆红素及临床疗效。结果干预后,研究组患儿黄疸消退总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,研究组总胆红素明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,研究组胆管炎发病率、生长发育异常率、腹腔积液和肝衰竭发病率、大便色卡分级异常率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论加味茵陈四逆汤配合预见性护理有能效改善胆道闭锁患儿黄疸情况,临床效果显著。