应用加端PCR克隆弓形虫P30基因

为了采用基因工程方法大量生产高效抗原提供技术，根据已发表的弓形虫RH株P30的核苷酸序列，设计了一对加端引物，运用PCR方法，从弓形虫NT株中扩增出约800bp的片段。产物经EcoRI和XbaI酶切后，克隆进PUC19载体，经酶切和PCR鉴定，插入片段为P30基因。

PCR技术的新发展及新用途

ＰＣＲ技术的新发展及新用途（２１０００２）南京八一医院肿瘤中心电镜室苏长青综述乐美兆审校ＰＣＲ技术的发明，是分子生物学领域的一项里程碑，自问世以来就立即得到普遍重视。基于ＰＣＲ是模拟天然ＤＮＡ复制过程而设计的特异ＤＮＡ序列体外扩增方法，许多研究人员充...

α-amanitin线性肽骨架融合基因表达条件的优化

利用加端PCR技术在 pGEX 1λT质粒BamHI和PstI位点间 (片段BamHI端 )加入α amanitin线性八肽碳骨架编码序列 ,再将两次连续加端PCR产物连入BamHI、PstI双酶切的pGEX 1λT载体 ,得到含α amanitin线性碳骨架编码序列的阳性重组子pGAT 1 .序列测定和结果分析显示 ,构建的融合基因相位正确 ,阅读框通读 .通过对融合基因在大肠杆菌中表达条件的优化 ,目的融合蛋白的表达量可提高 33.5 %,占总蛋白表达量的 2 8.3%.