造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的毒性及其与含硫量的关系

本文研究了硫酸葡聚糖(DS)的不同含硫量与过敏反应的关系,初步找到了一个可供人体静脉注射用的DS含硫量的范围。DS的分子量在10000以下,这个范围大约为10.6％～11.8％(以进口的葡聚糖为原料)和12.0％～13.0％(以国产葡聚糖为原料)。初步探讨了影响小鼠外周血白细胞变化的某些因素,为DS作为造血干细胞动员剂用于临床展现了良好的前景。

骨髓干细胞动员剂对大鼠急性心肌梗死肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的:探讨粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞,对大鼠急性心肌梗死肌钙蛋白I的影响。方法:把20只大 鼠随机分为两组:对照组及试验组,每只大鼠均于24 h,7 d采血,测定心肌肌钙蛋白I的水平。结果:实验组心肌肌钙蛋白 I在24 h,7 d较对照组均显著下降(P<0.05),有统计学意义。结论:粒细胞集落刺激因子通过动员骨髓干细胞,迁移到 心肌,修复受损的心肌,减少心肌肌钙蛋白I的释放。

SLE外周血干细胞动员剂选择及效果观察

目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)自体外周血干细胞安全、有效的动员方案及动员效果的临床观察。 方法 19例重症SLE患者在静止期接受大剂环磷酰胺 (CTX)联合G -CSF进行外周血干细胞动员 ,干细胞采集前后动态外周血细胞计数 ,外周血干细胞细胞采集量及CD3 4 细胞测定 ,动员采集过程中评价狼疮活动情况 ,主要不良反应及移植造血重建观察。 结果 动员前后SLE病情稳定 ,相关抗体检测无变化。外周血干细胞单次采集率为 6 3.2 % ,两次采集率为 36 .8%。移植后造血重建顺利。主要不良反应为 :发热、消化道感染、谷丙转氨酶轻度升高、肌酐升高、骨痛等。 结论 大剂量CTX联合G -CSF做为动员方案能有效地动员SLE外周血干细胞 ,临床应用过程安全 ,无SLE病情反复 ,移植后造血重建顺利。

bFGF联合骨髓干细胞动员剂促进大鼠缺血后肢血管新生的分析

目的:了解bFGF联合骨髓干细胞动员剂促进大鼠缺血后肢血管新生的作用。方法:将48只大鼠的左侧股动脉与其分支切断,构建大鼠后肢缺血模型,并按随机数字表法分成四组,每组12只,其中A组将重组人bFGF蛋白注入大鼠缺血后肢肌内;B组将重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)注入大鼠皮下;C组大鼠予以bFGF联合rhG-CSF;D组予以均等的生理盐水。治疗持续4周后予以每组大鼠腹主动脉造影,进而观察大鼠侧支血管的具体形成状况,予以内收肌以及腓肠肌肌组织病理切片检查,借助图像分析系统,统计各组大鼠血管密度。行免疫组化检测,分析大鼠血管内皮生长因子阳性表述血管数。结果:在大鼠侧支循环血管条数、血管内皮生长因子阳性表述血管数以及血管密度上,C组>A组>B组>D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:对于促大鼠缺血后肢血管新生而言,bFGF蛋白与骨髓干细胞动员剂疗效显著,均可改善大鼠肢体的缺血状态,但骨髓干细胞动员剂联合bFGF蛋白改善大鼠缺血肢体更为明显。

造血动员剂致1例健康供者过敏休克的护理

探讨造血动员剂致使1例供者在动员外周血造血干细胞的不良反应。建议在使用造血动员剂时做皮试。

造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的临床前及人体试用研究

为了阐明临床应用造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖(DS)的可能性,用不同动物进行了动员效果、LD_(50)过敏实验和正常人体试用研究。结果表明,给狗静脉注射分子量为10kDa的DS后,血中MNC和CFU-GM呈时相性变化,1h开始增加,5h达到高峰值;LD_(50)为1128.6mg/kg(雄性小鼠)和1369.4mg/kg(雌性小鼠),两者之间无显著差异;分子量为10kDa的DS过敏反应为阴性结果,15kDa的DS为阳性结果;34例正常人体试用,DS可使血中CFU-GM、BFU-E和CFU-GEMM,分别增加到给药前的8倍、10.5倍和12倍,有效、安全剂量约为15～20mg/kg。分子量为10kDa的DS人体试用研究属国内外首次报道。

各种动员剂方案在恶性淋巴瘤自身外周血造血干细胞移植中的应用

对３组共２０例恶性淋巴瘤病人进行自身外周血干细胞回输，采用了（１）皮质激素；（２）硫酸葡聚糖（ｄｅｘｔｒａｎｓｕｌｆａｔｅ，ＤＳ）；（３）粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）或环磷酰胺（ＣＴＸ）＋Ｇ－ＣＳＦ等３组不同的动员剂和治疗方案。结果显示，１组口服泼尼松或静脉注射地塞米松可使白细胞（ＷＢＣ）明显增多，是给药前自身血的４．６１倍和７．２４倍；２组ＷＢＣ、单个核细胞（ＭＮＣ）和粒细胞巨噬细胞集落生成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）分别为用药前的２．０４倍、４．１４倍和２．０４倍；３组平均分离２．６次，总细胞数可获得ＷＢＣ１５．４７×１０９、ＭＮＣ１３．８９×１０９、ＣＦＵ－ＧＭ２５．４×１０５、ＣＤ３４＋细胞１３．２４×１０７。ＷＢＣ、ＭＮＣ分别为动员前的３．６倍和３．９倍。临床应用：１组化疗采用ＣＴＸ＋长春新碱（ＶＣＲ）方案输入干细胞后可以加速造血恢复；２组化疗采用大剂量环磷酰胺、阿霉素、鬼臼毒素和泼尼松（ＣＨＶＰ）方案，输后１４ｄＷＢＣ恢复至４×１０９个／Ｌ以上，血小板（Ｐｔ）在输后１６ｄ恢复照前水平；３组化疗采用大剂量ＣＨＶＰ或超大剂量环己亚硝脲、鬼臼毒素、环磷酰胺（ＢＶＰＣ）方案。输后５ｄＷＢＣ降至０．０５×１０?

60例实体肿瘤患者外周血干细胞的动员和采集

目的:对60例实体肿瘤患者造血干细胞的动员和采集效果进行分析。方法:采用常规化疗联合造血因子动员剂方法动员肿瘤患者外周血干细胞,CS-3000plus血细胞分离仪和程控冷冻降温方法采集、冷冻保存干细胞。结果:60例患者平均年龄41岁(24～57),Ⅰ期3.4%,Ⅱ期25.0%,Ⅲ期38.3%,Ⅳ期33.3%;肿瘤负荷情况,CR46.6%,PR31.6%。平均采集次数2.6次,MNC5.6×108/kg,CFU-GM2.4×105/kg,BFU-E1.7×104/kg,CD34+10.1×106/kg,CFU-GM第1次收获率50.0%,第2次36.0%。各病种间除CD34+外均无统计学差异。恶性淋巴瘤组CD34+细胞数高于其他病种。一次动员成功率90.0%。干细胞冷冻复苏后平均MNC回收率77.0%,CFU-GM回收率69.0%,BFU-E回收率72.0%。各病种之间回收率无差异。结论:常规化疗联合造血干细胞因子是实体肿瘤外周血干细胞移植的一种有效动员剂。

低分子量硫酸葡聚糖对小鼠造血干细胞动员作用的研究

给小鼠静脉注射低分子量（＜１０￣４ｕ）硫酸葡聚糖（ＤＳ）１５ｍｇ／ｋｇ后外周血中白细胞、单个核细胞（ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｋ，ＭＮＣ）、ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ产率等指标出现时相性变化。给药后１ｈ开始升高，２ｈ达到高峰、分别为药前值的２．２、２．６、３．８、４．４和３．０倍，７ｈ时趋向正常。给药后２ｈ上述各类细胞在外周血中的含量随着ＤＳ的剂量增加而增加。白细胞、ＭＮＣ计数在ＤＳ１８０ｍｇ／ｋｇ时达到峰值，均为对照组的４倍。２４０ｍｇ／ｋ８时未见明显增加。不同剂量ＤＳ对各系祖细胞均有不同程度的动员作用，ＤＳ剂量１５－３０ｍｇ／ｋｇ效果最好，每升血中ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｍｉｘ的数量分别相当于对照组的５．０、１１．９和８．８倍。其峰值出现时间与白细胞、ＭＮＣ不同，表明ＤＳ对不同类型细胞的作用机制也不尽一致。经口给小鼠投以ＤＳ２４０和４８ｏｍｇ／ｋｇ后，未见外周血中白细胞、ＭＮＣ计数有显著性升高，提示对造血干细胞没有动员作用。

丹参注射液对家兔粒-巨噬系祖细胞动员作用的研究

以体外半固体琼脂培养方法观察了家兔循环血CFU-GM的一般特性及丹参注射液对家兔CFU-GM的动员作用。研究结果显示,家兔循环血CFU-GM正常值为9.10±7.45(范围0～27.33)CFU-GM/1×10~6MNC,其数量无明显性别差异,亦无明显日间周期性变化;丹参注射液可升高循环血CFU-GM数量;当给药剂量1g/kg,连续给药8d后,循环血CFU-GM数量达高峰,为对照组的6.18倍。作者分析,丹参注射液对家兔CFU-GM动员作用的机理可能包括改善骨髓造血微循环、促进造血细胞增殖分化并向外周血迁移等,确切机理尚待进一步研究。丹参具有毒性小、安全范围大、来源方便等优点,以其作为造血祖细胞动员剂,有进一步研究的价值。

人重组IL-8对兔外周血白细胞的动员作用及其时间动力学

目的：观察人重组ＩＬ－８ 在体内对新西兰家兔外周血白细胞的动员作用及其时间动力学。方法：按１０μｇ／ｋｇ 的剂量在兔静脉内注射ｒｈＩＬ－８ ，收集不同时间的外周血，显微镜观察各种白细胞数量的变化。结果：ＩＬ－８ 可升高外周血的白细胞数量，尤其是中性粒细胞的数量，从２．６６ ×１０９／Ｌ升高至５ ．９９×１０９／Ｌ。ＩＬ－ ８ 动员的中性粒细胞以幼稚中性粒细胞（带状核）为主。ＩＬ－８ 对中性粒细胞动员作用迅速，６０ｍｉｎ 时达到高峰，但持续时间短，１８０ｍｉｎ 时已接近正常水平。结论：ＩＬ－ ８ 可显著升高外周血中性粒细胞数，而且是一种快速、安全的动员剂。

实体瘤患者外周血造血干细胞的动员与保存

目的 :探讨一种适于晚期恶性肿瘤治疗的自体外周血造血干细胞移植方法。方法 :单用rG -CSF(75μg,q12h×2d)作动员剂 ,用血细胞分离机一次性收集单个核细胞(MNC),4℃贮存。观察WBC、MNC计数、细胞活力及细胞分类 ;用流式细胞仪进行细胞表型检测。结果 :小剂量rG -CSF动员后 ,外周血WBC达(18.71±6.54)×109/L。一次可收集MNC(1.87±0.66)×108/kg。CD34、CD14、CD3 及CD22 细胞分别为4.39 %、3.85 %、4.63 %及3.76 %。CD34 细胞平均约为8.2×106/kg。4℃贮存48～56小时MNC存活率为94.3 %。结论 :对实体瘤尚无骨髓转移的患者 ,用此方法可获得足以重建造血功能的干细胞。

硫酸葡聚糖伍用G-CSF对小鼠外周血造血干细胞动员作用研究

研究了硫酸葡聚糖(DS)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)单独应用及联合应用对小鼠外周血造血祖细胞的动员作用。联合用药方式为小鼠连续5天静脉注射G-CSF10μg/d,第5天腹腔注射DS15mg/k 体重,DS给药后2小时检测外周血白细胞,单个核细胞和CFU-GM,结果发现应用DS和G-CSF及二者联合用药后,外周血白细胞比给药前分别增高了2.5,1.8和2.8倍,外周血单个核细胞比给药前分别增高了1.9,1.7和2.5倍。DS与G-CSF联合用药,可以使粒系祖细胞数量分别高于单独使用DS和G-CSF组的53.4％和15.3％,统计学处理有显著性意义(P<0.05)。结论提示,DS与G-CSF联合应用对外周血造血祖细胞的动员产生了协同作用,其机制可能在于二者动员的途径不同。

抗VLA-4单克隆抗体动员的外周血干细胞重建辐射损伤小鼠造血的初步研究

目的 观察抗VLA-4单克隆抗体动员的外周血干细胞对辐射损伤小鼠造血重建的效果。方法 8.5 Gy^(60)Co γ射线照射的BALB/c小鼠,分别接受经生理盐水(实验1组)及抗VLA-4单克隆抗体(实验2组)动员的外周血干细胞移植,观察受体小鼠的4周存活率、外周血白细胞(WBC)、骨髓有核细胞(BMN),粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)及脾集落形成单位(CFU-S)等指标。结果 实验2组小鼠的4周存活率、WBC、BMNC,CFU-GM、CFU-S数均明显高于对照组、实验1组,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论 抗VLA-4单克隆抗体能有效动员小鼠外周血干细胞,并能成功重建辐射损伤小鼠的造血功能。

IL-8动员造血细胞救治致死性照射小鼠的初步研究

将人重组白细胞介素 -8(rh IL-8)动员的雄性小鼠外周血单个核细胞 (MNCs)静脉输注给受到 8.5Gy照射的同种雌性小鼠 ,并对存活的受体小鼠进行 Y染色体 PCR检测。结果表明 ,经 rh IL-8动员的造血干 /祖细胞可使受照射小鼠长期重建造血。提示 rh IL-8具有快速有效的动员造血细胞的作用。

复方扶芳藤合剂含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖的作用机制

目的探讨复方扶芳藤合剂含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响及其机制。方法通过直接贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠BMSC,对其进行细胞形态学观察,采用流式细胞仪对其表面标志物进行鉴定。复方扶芳藤合剂按3 mL/(kg•d)给予大鼠灌胃14 d后取含药血清。将BMSC分为空白对照组、含药血清组、Notch1小干扰核糖核酸(siRNA)组和Notch1 siRNA+含药血清组,检测各组BMSC的增殖率以及Notch1信号通路相关信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的相对表达量。结果镜下观察可见第1代BMSC呈长梭形,以平行排列生长为主或呈漩涡状生长。第3代BMSC阳性表达CD90、CD44,而CD45呈阴性表达。与空白对照组比较,含药血清组和Notch1 siRNA+含药血清组BMSC的增殖率均升高,Notch1 siRNA组BMSC的增殖率下降(均为P<0.05);与Notch1 siRNA组比较,Notch1 siRNA+含药血清组BMSC的增殖率升高(P<0.05)。与空白对照组比较,含药血清组Hey1、Delta样配体(DLL)1的mRNA和蛋白相对表达量均升高,Notch1 siRNA组和Notch1 siRNA+含药血清组Hey1、DLL1的mRNA和蛋白相对表达量均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Notch1 siRNA组比较,Notch1 siRNA+含药血清组Hey1、DLL1的mRNA和蛋白相对表达量均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论复方扶芳藤合剂含药血清可促进大鼠BMSC的增殖,其作用机制可能与Notch1信号通路激活有关。

G-CSF动员干细胞对淋巴细胞的影响

目前,利用粒细胞集落刺激因子（Granuloctye colony stimulating factor,G-CSF）动员的造血干细胞作为移植物应用于外周血造血干细胞移植已经被广泛用于治疗恶性血液病,已有的研究证实G-CSF作为动员剂是安全、有效的。移植物抗宿主病（Graftversus-host disease,GVHD）是指供着来源的淋巴细胞攻击患者的器官引起的临床病理综合征,它是异基因造血干细胞移植后的主要并发症之一。