动态浊度法定量检测猫粮中细菌内毒素含量的研究

试验旨在建立一种动态浊度法定量测定猫粮中细菌内毒素含量的检测方法。猫粮样品中的细菌内毒素用水提取,离心,过滤,滤液适当稀释,采用动态浊度法在细菌内毒素测定仪上进行定量测定。结果显示:在0.040~5.000 EU/mL的范围内细菌内毒素的线性良好(相关系数r=-0.9953,|r|>0.980),标准曲线有效,重复测定的相对标准偏差(RSD)为8.9%~14.0%(n=6),当稀释因子≥1000时干扰试验的回收率均在50%~200%之间,方法定量限(LOQ)为0.04 EU/mg。研究表明,该方法操作简便,可靠准确,重现性好,能够有效检测猫粮样品中细菌内毒素含量,具有较好的应用前景。

鲎试剂检测中药提取物中的内毒素——动态浊度法

采用动态浊度法对人参提取物进行内毒素检测。结果表明人参提取物 (3.2mg/ml)对鲎试剂检测不存在干扰作用 ,内毒素含量小于检测限值 (0 .0 31EU/ml)。因此可以采用动态浊度法检测人参提取物中的内毒素。

动态浊度法鲎试剂在23价肺炎球菌多糖疫苗中间产品内毒素检测中的应用探讨

本文通过使用ATi细菌内毒素动态检测仪进行鲎试剂灵敏度复核试验、干扰试验(回收率试验)和23价肺炎球菌多糖疫苗中间产品内毒素检查,对所得试验结果进行数据分析,找出了影响鲎试剂准确性、灵敏性的干扰因素,从而对鲎试剂的正确使用进行探讨,确保该检测方法的专属性、灵敏度,保证检测结果准确可靠。

动态浊度法定量检测大蒜注射液中细菌内毒素

目的 :分析研究大蒜注射液对鲎试剂的干扰作用 ,探讨以细菌内毒素检查法取代热原检查法检测大蒜注射液的可行性。方法 :本试验采用检测细菌内毒素的动态浊度法 ,用EDS 99细菌内毒素测定仪对大蒜注射液进行了抑制增强试验。结果 :样品经 1∶2 0倍稀释 ,平均回收率在 5 0 %～ 2 0 0 %范围内 ,标准曲线的回归方程为logT =2 .82 47- 0 .32 5 2 5logC ,r =- 0 .99875 ,表明样品溶液对TAL试剂反应无干扰作用。结论 :凝胶法检测大蒜注射液 ,干扰作用较大。采用动态浊度法进行定量检测 ,干扰因素小 ,可以作为日常检测使用。

动态浊度法定量检测葛根素注射液中细菌内毒素

目的 :探讨以细菌内毒素检查法取代热原检查法检测葛根素注射液的可行性。方法 :采用定量检测细菌内毒素的动态浊度法 ,用EDS-99细菌内毒素测定仪对葛根素注射液进行抑制增强试验。结果 :标准曲线的回归方程为LogT=2 7957—0 2422LogC ,r=—0 9973 ;葛根素注射液60倍及以上倍数释释对鲎试剂反应无干扰作用。结论 :本方法干扰因素小 ,检测结果准确 ,可作为日常检测使用。

动态浊度法测定硫酸庆大霉素注射液细菌内毒素的浓度

探讨动态浊度法测定硫酸庆大霉素注射液细菌内毒素浓度的可行性。方法：按《中国药典》的要求，对多批次多厂家的硫酸庆大霉素注射液应用动态浊度法进行干扰实验。结果：硫酸庆大霉素注射液１２８倍及以上稀释液对细菌内毒素动态浊度法无干扰。结论：用动态浊度法检查硫酸庆大霉素注射液的细菌内毒素浓度是可行的。

细菌内毒素检查法-动态浊度法

查阅有关文献资料,对细菌内毒素检查法-动态浊度法的原理、试剂要求、实验设计、试验方法、应用等方面做一归纳,总结了选用实验试剂注意问题、操作关键技巧、试验步骤、建立标准曲线和回收率计算方法及其在药品检验中的应用。

动态浊度法检测明胶中细菌内毒素的含量

依据2020年版《中国药典》第四部通则1143细菌内毒素检查法,应用Pyros Kinetix®Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,定量检测明胶中细菌内毒素的含量。内毒素检测标准曲线浓度线性范围为0.002~1.25EU/mL,标准曲线回归方程为LgT=-0.1891LgC+2.9277(r=-0.9973)。通过对5wt.%明胶原液进行5~160倍稀释,并对不同稀释倍数的明胶供试品溶液进行加标回收率测试,确定了不干扰的最小稀释倍数。检测结果显示,当原液稀释倍数在40倍以上时,内毒素加标回收率在50%〜200%之间。高浓度的明胶溶液会对蝥试剂检测内毒素产生干扰,体现在内毒素加标回收率低于50%。通过有效的稀释,可以显著降低干扰,从而定量测定明胶中的内毒素活性。

应用LAL动态浊度法测定复方苦参注射液中细菌内毒素含量

目的:建立应用美洲鲎试剂LAL的动态浊度法定量检测复方苦参注射液中细菌内毒素试验方法。方法:采用《中国药典》2015年版(四部)中的细菌内毒素检查法。结果:复方苦参注射液用细菌内毒素定量法检测无干扰因素影响,内毒素回收率在50%~200%范围内。结论:使用LAL进行动态浊度法定量检测复方苦参注射液的细菌内毒素是可行的,可用细菌内毒素方法代替兔热原检查法,同时又避免了限量法内毒素检测时的干扰。

动态浊度法检测水痘减毒活疫苗细菌内毒素的质量分析

目的建立动态浊度法为适合水痘减毒活疫苗细菌内毒素的质控方法。方法动态浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。结果水痘减毒活疫苗的原液、稀释液和成品的细菌内毒素分别不高于1.0、10.0、12.0EU·m L^(-1)。结论本方法适合定量检测水痘减毒活疫苗的细菌内毒素,适合内控指标的确立和生产过程的控制。

动态浊度法定量测定细菌内毒素含量

应用动态浊度法定量测定细菌内毒素含量，系统适应性符合标准规定，适用于日常检测。

动态浊度法定量检测磺达肝癸钠注射液细菌内毒素含量的研究

目的:建立动态浊度法定量检测磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素的含量。方法:使用两个厂家的动态浊度法鲎试剂建立细菌内毒素标准曲线,对3批供试品进行干扰试验,分析不同稀释倍数下细菌内毒素的回收率并进行验证,完成供试品溶液中内毒素含量的定量检测。结果:两个厂家鲎试剂的标准曲线均符合标准要求,3批供试品在稀释10、100、800、1 600倍时细菌内毒素回收率均在50%~200%范围内,均无干扰,符合药典要求。结论:采用动态浊度法检测磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量是可行的。

动态浊度法定量检测醒脑静注射液中的细菌内毒素

目的:建立动态浊度法测定醒脑静注射液中细菌内毒素含量的方法。方法:依据《中国药典》2020年版四部通则(1143细菌内毒素检查法)中的动态浊度法及其指导原则,分别应用美洲鲎试剂和安度斯鲎试剂,在Pyros Kinetix Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统上,对醒脑静注射液细菌内毒素进行方法开发。通过细菌内毒素标准曲线可靠性试验和干扰预实验确定有效稀释倍数,测定干扰试验的回收率,完成醒脑静注射液细菌内毒素的定量检测。结果:可靠性试验中,LAL标准曲线浓度线性范围为0.001~1.0 EU·mL^(-1)(r=-0.9877),标准曲线的回归方程为:lg T=-0.3123lg C+2.740。TAL标准曲线浓度线性范围为0.01~1.0 EU·mL^(-1)(r=-0.999),标准曲线的回归方程为:lg T=-0.270lg C+2.830。供试品在稀释比例1∶20及以下浓度时对鲎试剂反应无干扰作用;3批供试品的内毒素定量检测结果均低于供试品规定限值。结论:应用Pyros Kinetix Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,动态浊度法可用于醒脑静注射液细菌内毒素含量的定量检测。

采用鲎试剂检查低分子量肝素钙注射液中细菌内毒素的可行性研究

目的:探讨采用鲎试剂法对低分子量肝素钙注射液进行细菌内毒素检查的可行性。方法:采用动态浊度法和凝胶法,通过干扰试验,对样品中的细菌内毒素进行定性和定量检测。结果:将样品中低分子量肝素钙含量稀释至25I U/ml时对鲎试验检查有明显的干扰作用,而稀释至12·5I U/ml时则无干扰作用,样品中细菌内毒素的含量均小于0·01EU/I U。结论:本文建立的低分子量肝素钙注射液细菌内毒素检查法可行。

动态浊度法检测5种中药注射液的内毒素含量

目的:通过特异性及非特异性鲎试剂(TAL)动态浊度法对5种中药注射液的内毒素含量进行检测,探讨该方法对中药注射液检测的适用性。方法:采用特异性及非特异性动态浊度试剂盒,对不同批次的鱼腥草注射液、双黄连注射液、清开灵注射液、葛根素注射液、香丹注射液进行检测。结果:无色的中药注射剂如鱼腥草注射剂、葛根素注射剂对检测干扰较少,非特异性及特异性动态比浊法对其无显著影响;对非单一成分,颜色较深的中药注射液,如清开灵、香丹、双黄连注射液,采用动态比浊法进行检测,干扰大,检测结果不稳定;清开灵注射剂采用特异性试剂盒进行检测能有效的消除干扰,但香丹、双黄连注射液仍不能消除干扰。结论:用特异性或非特异性动态浊度法可以检测鱼腥草和葛根素注射液中的内毒素含量,采用特异性动态浊度法可以检测清开灵注射液中内毒素含量,双黄连和香丹注射液的检测结果不稳定。

微量动态浊度法检测细菌内毒素方法的建立与验证

目的建立使用微量动态浊度法检测细菌内毒素的方法,并进行验证。方法采用动态浊度法鲎试剂,每孔样品和鲎试剂加样量25μL,检测波长405 nm,预设OD值0.03,使用半孔酶标板检测,并经过4个实验室协作验证方法的准确度、重现性、线性和范围、耐用性以及重组新型冠状病毒疫苗、重组新型冠状病毒疫苗(5型腺病毒载体)、重组乙型肝炎疫苗、麻腮风联合减毒疫苗、双价肾综合征出血热灭活疫苗、四价流感病毒裂解疫苗共计6种疫苗的品种适用性。结果高、中、低3个剂量组在4个实验室的共计24次试验总平均回收率分别为100.8%,150.0%,125.3%,RSD值分别为5.3%,11.0%,20.7%;标准曲线在0.01~10 EU·mL^(−1)内相关系数平均值为0.990,耐用度考察2个来源的鲎试剂对检测的影响符合规定;6个品种的共计18批样品的干扰试验回收率均在50%~200%,干扰试验符合规定。结论建立了使用微量动态浊度法检测细菌内毒素的方法,该方法具有良好的准确度、重现性、线性和范围、耐用性,并且在6种生物制品中具有良好的品种适用性。该方法可用于常规样品的细菌内毒素检测。

注射用顺苯磺酸阿曲库铵细菌内毒素检测动态浊度法的研究

目的:建立注射用顺苯磺酸阿曲库铵的细菌内毒素(BET)检查方法动态浊度法。方法:依据2010年版中国药典二部附录ⅪE细菌内毒素检查方法,通过试验验证注射用顺苯磺酸阿曲库铵对细菌内毒素检查有抑制作用,提出用辅剂稀释剂Ⅰ稀释供试品从而加入适量的二价金属阳离子(Mg2+),以补充因螯合作用而减少的部分二价金属离子,从而消除注射用顺苯磺酸阿曲库铵对内毒素检查的抑制作用。结果:补充适量的二价金属阳离子(Mg2+)可以有效地消除注射用顺苯磺酸阿曲库铵对BET的抑制。结论:结果表明,注射用顺苯磺酸阿曲库铵可以建立动态浊度法进行细菌内毒素检测。

实验室细菌内毒素定量检测方法建立与验证

建立细菌内毒素动态浊度定量检测方法,比较不同厂家鲎试剂对细菌内毒素定量检测的影响。根据《中国药典》2020年版四部《细菌内毒素检查法》和《分析方法验证指导原则》,建立细菌内毒素动态浊度定量检测方法,进行线性、适用性、重复性等方法学验证,运用该方法对我所常见检品氯化钠注射液和维生素C注射液共3批进行检测,并比较3个不同厂家鲎试剂对检测结果的影响。结果显示,本次实验建立的细菌内毒素动态浊度法线性、适用性、重复性验证结果良好,氯化钠注射液和维生素C注射液在湛江安度斯鲎试剂、厦门鲎试剂和福州新北鲎试剂条件下检测结果一致,符合规定。本实验建立的细菌内毒素动态浊度定量检测方法能满足日常检测需求,不受鲎试剂种类的影响,结果灵敏、准确。

动态浊度法定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素的含量

目的:应用美洲鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate,LAL)的动态浊度法,定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素。方法:依据2015年版《中华人民共和国药典》<1143细菌内毒素检查法>的要求,应用Pyros Kinetix■Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用葡聚糖抑制缓冲液稀释溶解LAL,建立细菌内毒素的标准曲线并确定稀释倍数,通过测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,并定量测定样品中的细菌内毒素含量。Pyros■EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量。结果:内毒素检测标准曲线浓度线性范围为0.001~0.032 EU·mL^-1(r=-0.9854),标准曲线回归方程为logT=-0.200logC+2.943;供试品在稀释100、300、500倍时均对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%之间;4批样品的内毒素定量测定结果符合规定。结论:在Pyros Kinetix?Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,使用LAL建立的动态浊度法,可用于乳糖一水合物的细菌内毒素定量检测。LAL有更高的灵敏度,葡聚糖抑制缓冲液可有效阻止由(1→3)-β-D-葡聚糖引起的干扰,提高试验的成功率,符合数据完整性的要求。

甘露醇注射液的细菌内毒素定量测定

目的 :研究应用动态浊度法测定甘露醇注射液细菌内毒素的可行性 ,建立其常规内毒素检查法。方法 :应用细菌内毒素测定仪考察甘露醇注射液对细菌内毒素的干扰。结果 :甘露醇注射液稀释 2倍对细菌内毒素无干扰作用。结论