基于亲和素-生物素双夹心体系测定外源性蛋白血清动态浓度的非抗体依赖新方法

建立一种非抗体依赖的检测外源性蛋白多肽分子代谢动力学血清浓度及动态变化的新方法.链亲和素为捕获分子,加入待测生物素标记蛋白或合成肽,辣根过氧化物酶标记链亲和素为检测分子,构成链亲和素-生物素标记大分子-酶链亲和素的双夹心体系,并进行特异性、敏感性、准确性及稳定性评价.本检测体系灵敏度高,可达0.3125μg/L,且可通过改变亲和素包被浓度调整检出敏感度与检测范围.准确性回收率为97.82%～107.92%,批内、批间变异系数分别<5.76%和<8.42%,并成功应用在生物素标记人血清白蛋白(biotin-HSA)与生物素标记鸡卵黏蛋白(biotin-OVM)的小鼠血清浓度动态检测.本方法不依赖抗体与放射性核素,可望在外源性蛋白多肽大分子及其药物的体内定量检测和代谢动力学研究中广泛应用.

大通牦牛4种血清激素浓度变化规律研究

首次对生长牦牛3个年龄段(5～15、17～27、29～39月龄)的4种血清激素:生长激素、胰岛素、甲状腺素和三碘甲腺原氨酸(GH、INS、T4和T3)浓度进行了1年6次的跟踪测定.结果表明,生长牦牛的4种血清激素浓度在性别间没有明显差异(P＞0.05).5～39月龄牦牛血清GH、INS、T4和T3平均浓度分别为(1.635±0.914)ng·mL-1、(261.916±85.987)μg·mL-1、(46.775±17.74)ng·mL-1和(1.190±0.707)ng·mL-1.血清4种激素浓度在3个年龄段间和月份-季节间的变化十分明显.GH、INS和T4浓度从1月份到3月份都有所下降,特别是GH浓度迅速由1月份的2.913ng·mL-1下降至3月份的0.793 ng·mL-1,是此时生长牦牛在严寒(通常低于-20℃)和饥饿双重打击下,机体动员体组织贮备以适应环境的变化、维持基本生命活动的结果.INS、T4和T3浓度在暖季表现出与牧草营养供应基本同步一致的变化规律,与机体加强合成代谢有关.GH在暖季维持相对稳定或稍高水平,但这一时期生长牦牛日增重达到600～700g,证明改善机体营养状况,有提高激素受体的敏感性、促进家畜生长之作用.血清INS和T4平均浓度与平均日增重的相关系数分别达到0.738和0.805(P＜0.01),说明血清INS和T4浓度是相对重要的经济性状,可用以监控生长牦牛的营养状况和生长发育速度.