TaqMan-MGB探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12

目的建立一种TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12的分析方法。方法设计动物双歧杆菌BB-12的16SrRNA序列的MGB探针,利用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术,构建目标序列的过表达载体,提取质粒进行标准曲线的绘制,最后进行市售酸奶样品检测,定量酸奶中BB-12菌株的数量。结果所有载体标准品均产生显著的荧光增幅,循环阈值(cycle threshold, Ct)介于16~20之间;而以其他酸奶制品添加菌及大肠杆菌样品DNA为模板则无荧光扩增信号。在检测灵敏度方面,BB-12载体可被稳定检出的质量浓度低至0.0000584 ng/μL, Ct值平均数为28.73,即检测灵敏度低至为0.05 pg。绘制的标准曲线线性良好,扩增效率E为0.39,判定系数R^(2)=0.9999。市售酸奶样品检测特异性好、灵敏度高、定量结果准确。结论本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测法可实现在酸奶中对BB-12菌种的检测及定量。

双歧杆菌BB-12的功能特性及研究进展

双歧杆菌BB-12是肠道益生菌——双歧杆菌的一个亚种,对维持肠道菌群平衡有着重要影响.综述了双歧杆菌BB-12的来源及研究进展,对其调节肠道菌群、通肠润便、提高免疫以及护肝方面的功能特性研究进行阐述,并对其前景进行展望.

动物双歧杆菌A12的肠道动态分布规律及其对便秘缓解效果研究

[目的]检测动物双歧杆菌A12的肠道动态分布规律及其对小鼠便秘的缓解效果。[方法]采用大鼠动物模型,分别一次灌胃和7 d连续灌胃2.5×10^(9) CFU动物双歧杆菌A12活菌细胞,不同时间点收集肠道内容物,利用菌株特异性引物,应用叠氮溴化丙锭与聚合酶链式反应结合方法定量检测动物双歧杆菌A12在肠道各部位的存活数量;进一步采用小鼠便秘模型,评价动物双歧杆菌A12对便秘小鼠的排便及小肠蠕动情况的改善效果。[结果]一次灌服,动物双歧杆菌A12在胃、回肠、结肠和直肠的排空时间分别为6、24、36和48 h。连续7 d灌服,灌服结束7 d后大鼠盲肠和结肠均可检测到动物双歧杆菌A12活菌细胞,14 d后低于检出限;此外,动物双歧杆菌A12活菌细胞可以显著提高便秘小鼠的排便质量、数量、含水率,及其小肠推进率。[结论]动物双歧杆菌A12可通过胃肠道并在肠道内有至少7 d的留存能力,可以显著缓解便秘症状。

茯苓多糖对双岐杆菌BB-12关键代谢产物的影响

为探究动物双岐杆菌乳双歧亚种BB-12代谢茯苓多糖的关键代谢产物,采用基于液质联用技术(LCMS/MS)的非靶向代谢组学手段,以葡萄糖作为对照,分析茯苓多糖对动物双岐杆菌乳双歧亚种BB-12关键代谢产物的影响。结果表明,茯苓多糖可显著促进双歧杆菌BB-12的生长。结合主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别模型(Orthogonal Partial Least Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA)等分析手段,筛选出丹芝酸、黄藤素等具有明确生理功能的差异代谢产物共12种,并显著富集到ABC转运蛋白通路、亚油酸代谢通路、半乳糖代谢通路等17条差异代谢通路。这些代谢物和代谢通路均可证明双歧杆菌BB-12在发酵茯苓多糖的情况下表现出更优异的生长性能和益生功效。该实验从小分子代谢物水平分析了动物双歧杆菌乳双歧亚种BB-12代谢茯苓多糖后产生的代谢产物,为进一步研究茯苓及动物双岐杆菌乳双歧亚种BB-12在人体内发挥益生功效的相关机制提供理论依据和指导。

动物双歧杆菌乳亚种BB-12与健康

动物双歧杆菌乳亚种BB-12(Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12, BB-12)是目前被研究最多、应用最广泛的益生菌菌株之一。本文通过检索查阅2021年12月31日前公开发表的国内外文献,共纳入38篇人群干预研究进行综述。结果发现,BB-12在人体内可以维持肠道菌群平衡、改善肠道环境、调节人体免疫功能、减少口腔唾液中变形链球菌数量、缓解便秘症状,而其对上呼吸道感染、代谢调节、婴幼儿体重、过敏、婴幼儿腹泻等相关研究因数量较少,未做综合分析评价。[营养学报,2023,45(2):120-126]

水解乳清蛋白改善牛乳蛋白过敏的功效及机制

目的:研究部分水解乳清蛋白(pHWP)联合不同剂量低聚果糖(FOS)和动物双歧杆菌Bb-12(Bb-12)对小鼠牛乳蛋白过敏(CMPA)的改善效果及免疫耐受调节机制。方法:4周龄雌性BALB/c小鼠随机被分成正常对照组、致敏对照组、p HWP和pHWP+FOS+Bb-12干预组。试验期间,干预组小鼠每天用含pHWP(15 mg/mL)或pHWP(15 mg/mL)+FOS(0.4/4.0mg/mL)+Bb-12(1×10^(5)/10^(6)CFU/mL)的水溶液替代常规饮用水进行饲喂干预;试验第7,14,21,28,35天,致敏对照组和干预组小鼠采用CMP(20 mg/只)+霍乱毒素(10μg/只)灌胃致敏,正常对照组小鼠灌胃无菌生理盐水;试验第42天,对所有小鼠进行CMP(50 mg/只)灌胃激发,并于激发后1 h内完成过敏症状评分,同时检测血清抗体和组胺含量、脾细胞增殖反应及上清液Th1、Th2和Treg相关细胞因子(INF-γ、IL-4和TGF-β)水平。结果:pHWP+FOS+Bb-12干预组小鼠过敏症状评分(0~1)、血清总IgE(169.4~272.7 ng/mL)、CMP特异性IgE(sIgE)(0.038~0.414 OD)和sIgG1(0.252~0.379 OD)、组胺(19.56~27.35 ng/mL)、脾细胞增殖刺激指数(1.48~1.58)及上清液IL-4(18.48~29.60 pg/mL)均显著低于致敏对照组(P<0.05),而TGF-β(143.1~177.2 pg/mL)、INF-γ(189.5~230.2 pg/mL)和INF-γ/IL-4(6.46~12.71)均显著高于致敏对照组(P<0.05)。相较于p HWP,pHWP+FOS+Bb-12对CMPA的缓解效果更强,且以使用高剂量Bb-12(1×10^(6)CFU/mL)时最为显著,部分指标包括血清总IgE、CMP-sIgE、脾细胞上清液IL-4和INF-γ/IL-4与正常对照组均无显著差异。结论:pHWP联合FOS和Bb-12可通过提高CMP免疫耐受有效改善小鼠CMPA症状,其作用可能与阻断IgE、CMP-sIgE、sIgG1和组胺分泌,抑制脾细胞增殖及上调TGF-β和INF-γ/IL-4相关。

双歧杆菌BB-12治疗婴幼儿腹泻临床疗效对照研究

目的评估双歧杆菌BB-12对婴幼儿腹泻治疗的有效性和安全性。方法对2015年12月至2016年8月吉林大学白求恩第一医院小儿消化内科诊治的120例腹泻患儿,采用随机、单盲方法,分为双歧杆菌BB-12治疗组、枯草杆菌二联活菌阳性对照组、未添加益生菌的安慰剂组,各40例。均配合蒙脱石散及补液等对症治疗,比较各组病例临床资料并进行分析。结果治疗组的显效率及有效率分别为37.50%、52.50%,阳性对照组为42.50%、42.50%,安慰剂组为17.50%、52.50%,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3组大便次数:第4天治疗组(3.10±1.41)次/d、阳性对照组(3.05±1.63)次/d、安慰剂组(3.93±1.91)次/d;第7天治疗组(1.45±0.64)次/d、阳性对照组(1.43±0.90)次/d、安慰剂组(1.95±1.30)次/d,3组较治疗前均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。但治疗组与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),与安慰剂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组患儿治疗后腹泻好转所需天数方面,治疗组、阳性对照组及安慰剂组分别为(4.20±1.32)d、(4.40±1.37)d、(5.18±1.57)d,3组差异有统计学意义(P<0.05),但治疗组与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌BB-12治疗婴幼儿腹泻安全有效。

不同因素下双歧杆菌BB-12对变形链球菌拮抗作用的体外研究

目的探讨不同因素下双歧杆菌BB-12对变形链球菌的抑制作用。方法采用液体培养法分别培养双歧杆菌BB-12与变形链球菌,利用紫外分光光度计调节具有相同吸光度值的菌液,观察不同因素下双歧杆菌BB-12对变形链球菌的拮抗作用,使用扫描电镜观察早期变形链球菌生物膜的变化。结果双歧杆菌BB-12在不同因素作用下对变形链球菌均具有拮抗作用,双歧杆菌BB-12能够抑制早期变形链球菌生物膜的形成。结论双歧杆菌BB-12对变形链球菌有拮抗作用。

双歧杆菌BB-12及其免疫调节功能的研究进展

双歧杆菌BB-12属于动物双歧杆菌属的第12株双歧杆菌。BB-12常用于婴儿配方乳粉、食品添加剂和酸奶中,是目前文献记录最多的双歧杆菌。本文详细阐述了BB-12对肠道菌群的调节作用,并分别从婴儿、儿童和成人3个年龄段探讨了BB-12调节免疫功能、减少感染和提高抵抗力等作用。

婴幼儿益生菌产品研究

针对我国婴幼儿腹泻症状及原因,根据国家相关要求筛选了有效预防与减轻婴幼儿腹泻的配方并制定了工艺路线。配方最终筛选为配方为乳双歧杆菌Bi-07为动物双歧杆菌BB-12每份产品中分别为5×1010CFU,维生素B1、B2每份产品含量菌分别0.1mg与0.13mg,低聚半乳糖0.4g,固体葡萄糖浆0.6g。

添加双歧杆菌的婴儿配方乳粉稳定性及其影响因素的探讨

主要研究了在婴儿配方乳粉,较大婴儿配方乳粉以及幼儿配方乳粉的三种不同基料中添加双歧杆菌BB-12,并在现有条件下通过控制水分活度,温度,以及不同的双歧杆菌添加量来验证加速试验的条件下双歧杆菌的活菌数变化,并且为判断双歧杆菌在婴幼儿配方乳粉中货架期的稳定性提供了科学的试验数据和方法。结果表明双歧杆菌在乳粉制品中活菌数数量变化不明显,其中水分活度(Aw<0.2),温度越低(T=25℃),双歧杆菌BB-12添加量越高(3×107 CFU/g),产品稳定性较高,货架期越长。