动物疱疹病毒基因工程疫苗的研究进展

疱疹病毒是一类具有相同形态和较大囊膜的双链DNA病毒,它不仅能引起原发性感染,还能引起潜伏性感染和复发性感染。此外,某些疱疹病毒是哺乳动物和禽类等动物肿瘤的病原因子,因此防制此病毒病不容忽视。疫苗的免疫接种是预防、控制该病毒病的主要手段。文章在简单介绍动物疱疹病毒常规疫苗的基础上对动物疱疹病毒基因工程疫苗进行了综述,并对动物疱疹病毒基因工程疫苗今后的发展方向进行了总结,以期为动物疱疹病毒基因工程疫苗的深入研究提供借鉴。

动物病毒重组活载体疫苗研究进展

病毒活载体疫苗作为一种新型疫苗,与传统疫苗相比,具有极大的优势与应用前景,是当今与未来疫苗研制与开发的重要方向之一。目前在人类医学和兽医领域,病毒活载体疫苗均取得了大量的研究成果。本文综述了主要的兽用病毒疫苗载体及重组活载体疫苗的最新研究进展,并分析了其发展趋势,为进一步研制新型重组病毒疫苗提供参考。

表达马立克氏病病毒基因的重组鸡痘疫苗

最近美国学者研制一种重组鸡痘疫苗（rFPV）,该疫苗可表达编码为糖蛋白B（gB1）、C（gC）、D（gD）和被膜蛋白UL47、UL48的马立克Ⅰ型病毒基因,也表达糖蛋白B（gB2、gB3）的Ⅱ、Ⅲ型马立克病毒基因。对疫苗的单独或各样组合使用（包括FPV/gBs与HVT组合）评价其保护母源抗体阳性（ab+）和母源抗体阴性鸡（ab-）抗高强毒MDV病毒的能力,并与MDV原型疫苗作比效。表达gC、gD、UL47、UL48的rFPV对ab+鸡无保护力,但rFPV/gB1抗MDV攻击的保护力为23％（比较:细胞结合的HVT（CA—HVT）为26％）。不同血清型MDV的rFPV/gBs的保护力是不同的。gB1

重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展

重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、鸭瘟病毒(Duck enteritis virus,DEV)、鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)等。对疱疹病毒基因组序列进行分析显示,其基因组大,复制非必需区域多,容纳外源基因的能力强。同时疱疹病毒具有宿主范围广泛、免疫持续期长、安全性较好及相关基因操作技术成熟等优点。笔者总结了当前构建重组动物疱疹病毒的主要方法,包括传统同源重组技术、细菌人工染色体(BAC)技术、Fosmid文库及CRISPR/Cas9基因编辑技术,简述了各个方法的基本原理及技术特点,比较了各个方法的优缺点,并分析了各个方法的最适运用条件,从而更准确地为研究工作提供理论及技术参考;对外源基因的表达方式进行分析,论证了不同启动子对外源基因表达的调控作用不同,同时对不同疱疹病毒的常用插入位点进行了研究成果的列举总结,并对当前重组病毒HVT、PRV、DEV及ILTV活载体疫苗的研究进展进行总结,对相关生物制品的注册应用信息进行了归纳,介绍了高选择率外源基因及高成功率插入位点,从而为相关生物制品的研制提供理论参考。

重组病毒疫苗可预防灵长类动物感染埃博拉和马尔堡病毒

据Medscape．com6月6日报道（原载Nat Med2005），一种新的重组减毒活疫苗可用来预防非人灵长类动物感染埃博拉病毒和马尔堡病毒。加拿大温尼伯湖的马尼托巴湖大学Heinz Feldmann博士及其同事利用小泡性口腔炎病毒载体制成表达埃博拉病毒或马尔堡病毒糖蛋白的疫苗。

重组技术在反刍动物生产中的应用进展

重组技术能够作为改进家畜生产系统的替代方法。在反刍动物生产中,重组激素能够显著提高动物繁殖和生产性能。重组抗原和免疫细胞能有效提高肉类和牛奶产量。重组疫苗的使用也有助于减少寄生虫产生的耐药性,改善动物健康。重组酶和益生菌有助于提高瘤胃发酵和饲料转化率效率。同时,许多重组技术仍处于实验阶段,在使用之前,应仔细考虑这些技术的其可行性。另外,转基因动物的使用和基因组编辑技术的发展拓展了重组技术研究的前沿。文章总结了重组技术对反刍动物性能、健康状况和瘤胃发酵的影响和应用,期望为反刍动物生产的可持续发展提供参考。

猪瘟病毒DNA疫苗的构建及动物免疫试验

利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)C株E2囊膜蛋白全长基因克隆到真核表达载体pcDNA4.0的CMV启动子下游,采用磷酸钙转染法将重组质粒转入293T细胞,流式细胞仪(FACS)检测293T细胞瞬时表达了E2囊膜蛋白。将构建的重组质粒肌肉注射BALB/c小鼠,用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测证明成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体,为下一步利用DNA疫苗免疫小鼠研制抗猪瘟病毒单克隆抗体打下基础。

RNA干扰和病毒基因沉默

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是正常动植物体内的一种通过双链RNA来沉默基因的自然现象。细胞内存在的双链RNA(dsRNA)被特异性的内切酶切割成为一种由长约21nt～23nt的小分子干扰RNA(siRNAs),有时它在正常的细胞中就存在,这种小分子干扰RNA和一些相关蛋白质组成RNA诱导沉默复合体我们称为来发挥作用。主要通过与特定基因编码的信使RNA(mRNA)作用来高效特异地阻断特定基因的表达。RNAi具有高效性和高度特异性,可能成为阻断病毒入侵和关闭基因的新技术,在基因功能研究和疾病基因治疗中发挥重要作用。

重组生长抑素(SS)大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果

［摘 要］目的 验证重组SS大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果。方法 由SS融合蛋白与弗氏不完全佐剂制成实验用疫苗，皮下注射BALB/c小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪和羔羊等动物，并观察体重变化。结果 与Vector Vaccine相比，Vaccine－1和 Vaccine－2可分别使雌性小鼠提高增重 10．28％和 15．63％；对雄性小鼠的作用不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫去势仔公猪，免疫后89天提高增重7．2％;免疫初产母猪，所产28日龄仔猪可比载体对照组仔猪提高增重11．81％，比44日龄仔猪提高增重17．95％；免疫母羔羊58天可比载体对照组提高增重15．64％，90天提高增重28．2％；免疫公羔羊变化不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫小鼠，其血清中抗因抗体阳性率为75％。结论 重组SS大肠杆菌疫苗能促进雌性小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪所产仔猪和母羔羊增重，但对雄性小鼠和公羔羊无作用。

伪狂犬病病毒基因工程苗研究现状

用疫苗免疫接种是防制伪狂犬病病毒(PRV)感染的重要途径。以往使用的疫苗包括灭活疫苗和减毒活疫苗,这些疫苗用于初发地区的猪场效果较好,但免疫接种猪虽能减轻临床症状,却不能控制病毒的传染和排毒,也无法用血清学方法区别免疫接种猪和野毒感染猪,给该病的净化带来了困难。为此,各国在发展和改进现有疫苗的同时,探索研究并推广了基因工程苗,这种疫苗不仅安全有效。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4+Re-6)试验报告

高致病性禽流感是人畜共患病，在特定环境下，可感染人，当人感染高致病性禽流感后，死亡率较高，并且严重危害公共安全卫生。由于禽流感毒株的不断变异，为了有效地防控禽流感疫情的发生，2012年农业部推出重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-4＋Re-6），为了保证新疫苗的安全使用，昌平区动物疫病预防控制中心在新疫苗大批使用前先做小范围试验。

动物疫病病毒样颗粒疫苗的研究进展

病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白组成的空心颗粒,具有天然病毒粒子形态和空间结构,但不含有病毒核酸,无感染能力,也不能自主复制[1-2]。许多病毒的结构蛋白在异源系统内重组表达即可自装配形成VLPs,这些VLPs的形态和结构与真正的病毒粒子相似,大小介于15 nm^400 nm,具有天然病毒粒子的空间构象和与天然病毒相似的免疫原性。

动物腺病毒载体疫苗研究进展

腺病毒载体是目前最常用的疫苗载体之一,具有表达量高同时能诱导强烈特异性体液免疫和细胞免疫反应的特点,又具有宿主广、操作方便、安全性好、经济性强等优点,被广泛用于重组疫苗的研究。文章综述了腺病毒载体的特点和近5年国内外的研究现状,并讨论了动物腺病毒载体疫苗存在的问题和发展趋势,以期为进一步研发动物腺病毒载体疫苗提供参考。

O型口蹄疫病毒vp1基因重组痘苗病毒的构建与鉴定

口蹄疫（foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的牛、羊、猪、鹿等偶蹄动物的急性烈性接触性传染病,以口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂为特征。疫苗接种是特异性预防FMD的有效手段,

动物寄生虫基因工程疫苗的研究进展

囊尾蚴病和棘球蚴病是发展中国家主要的人畜共患病，危害非常严重。可喜的是囊尾蚴及棘球蚴重组疫苗的研究均相当成功。棘球蚴苗EG95可诱导牛产生96％～100％的保护率，这已在澳大利亚、新西兰、阿根廷及中国等地的试验中获得证实。在绦虫方面，羊带绦虫45W—GST融合蛋白是第一例成功的抗寄生虫重组虫苗(Johnosonetal)，45W—GST可以诱导较高水平的IgG1，

动物病毒多表位疫苗的研究设计与应用分析

疫苗泛指具有抗原性,接种机体后能够产生特异性免疫力,并可抵御其针对传染病的发生或流行的生物学制剂[1]。目前,临床上使用的畜禽病毒病疫苗主要是弱毒苗和灭活苗。弱毒苗在临床应用中可能会存在毒株返强以及疫苗株与野生型毒株基因重组等安全性问题[2-3]。而灭活苗更倾向于诱导体液免疫,其诱导细胞免疫的能力相对较弱[4-5]。一个理想的疫苗除应具有安全性之外,还应同时诱导机体的特异性体液免疫和细胞免疫。

一种针对非洲猪瘟病毒的具有交叉保护功能的新型重组减毒活疫苗

非洲猪瘟是世界动物卫生组织（OIE）强制声明的一种具有高度传染性的病毒性疾病。缺乏可用的疫苗使这种疾病很难控制,因此,非洲猪瘟病毒（ASFV）成为养猪业的一大主要威胁。灭活疫苗并不会对ASFV提供坚实有力的保护。相反,减毒活病毒（LAV）,无论是自然分离的还是通过基因操作获得的,都证明了具有对同源ASFV病毒株的可靠保护力,尽管对异种病毒的保护力很低或没有保护力。

抗中东呼吸综合征冠状病毒和狂犬病病毒的安全、有效的人与动物双用疫苗

中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-Co V）于2012年出现,是高致病性呼吸道病毒。对于人类或动物,没有针对MERS-Co V的治疗方法,没有针对MERSCo V治疗方案的大规模临床试验。为了解决这个需要,作者开发了一种灭活的狂犬病病毒（RABV）,在其表面表达MERS-Co V刺突（S）蛋白。最初的重组疫苗BNSP333-S表达全长野生型MERS-Co V S蛋白;然而,相比于亲本RABV株,它的病毒滴度有显著的减少并且全长MERS-Co V S整入RABV颗粒的水平低。