锇酸固定组织的包埋后免疫电镜胶体金标记方法的改进

目的建立一种适用于中枢神经系统蛋白质抗原定位的包埋后免疫电镜胶体金标记方法。方法利用还原锇酸固定大鼠脑组织切片,首先在冰冻漂浮切片上用NaIO4确定待检抗原的可修复性,然后在亲水树脂Technovit7100包埋的半薄切片寻找使抗原得以最大程度修复的最佳NaIO4浓度,最后在超薄切片上进行相应抗原的免疫胶体金标记。结果NaIO4对不同抗原的修复作用明显不同。对于可修复抗原,低浓度NaIO4即可以使其充分修复。低浓度NaIO4处理组织可使组织超微结构保持完好,并可使胶体金高密度标记。

改良低温包埋胶体金免疫电镜技术

近年来,胶体金方法广泛应用于生物学研究中,为确定抗原存在的部位提供了一种检测手段。但在常规电镜制样操作过程中,因高温聚合等因素的影响,致抗原活性部份丧失,易导致该法的失败。80年代初,Lowicry1 K4M(以下简称K4M)作为低温包埋剂用于免疫电镜样品制备的包埋后染色。K4M是一种低粘度的包埋剂,可在低温(-20℃)下。

包埋后胶体金染色对人肝细胞β-葡萄糖醛酸酶的免疫电镜标记技术

胶体金免疫电镜技术是近几年发展的新技术，本文参照国外方法，将该技术加以改进后用于人体肝细胞的研究。

用胶体金免疫电镜技术研究水分胁迫对蚕豆根中ABA分布与含量的影响

用胶体金免疫电镜技术对蚕豆 ( Vicia faba L.)根中 ABA的定位结果表明 ,在原分生组织金颗粒主要分布在细胞核。在基本分生组织或伸长区前部皮层细胞的质膜附近有较多的金颗粒标记 ,维管柱特别是维管组织的质外体中发现有大量金颗粒标记。伸长区中部及根毛区细胞也有较多的金颗粒标记。水分胁迫可导致初生分生组织或伸长区前部细胞金颗粒标记密度大增 ,伸长区中部及根毛区细胞的金颗粒密度也明显增加。对根中 ABA在超微结构水平上的分布及其与运输的关系进行了讨论 ,为 ABA有可能作为由根向地上部分传递的逆境信息提供了进一步的证据。

用胶体金免疫电镜技术检测新城疫病毒

应用柠檬酸三钠还原法制备了 2 0nm的胶体金颗粒标记NDV抗体 ,并且用直接电镜、免疫电镜和胶体金免疫电镜技术比较观察了新城疫病毒。证明胶体金免疫电镜技术作为检测NDV的检测方法具有简单、快速、准确和无污染等优点。

蚕豆（Vicia faba L．）叶肉细胞中ABA的胶体金免疫电镜定位

利用胶体金免疫电镜定位技术对蚕豆叶肉细胞中ＡＢＡ定位的研究表明，在以ＡＢＡ抗体处理的切片中，叶绿体有大量的金颗粒标记，细胞质和细胞核也有金颗粒标记，但液泡和细胞壁中没有金颗粒标记。免疫染色前用胰蛋白酶处理可显著增强金颗粒标记密度，而不用ＥＤＣ固定或以免疫前兔血清处理的切片中几乎没有金颗粒标记。本实验为蚕豆叶肉细胞中ＡＢＡ的分布提供了直接的证据并说明了该技术是研究ＡＢＡ定位的一种可靠的方法。

微波在免疫电镜胶体金技术中的应用

微波在免疫电镜胶体金技术中的应用姜秀英，赖晃文，刘旭明，邹赛英关键词胶体金标记，微波，免疫电镜中国图书分类号Ｒ４４６．８当微波照射免疫胶体金标记切片时，切片上的抗原抗体极性分子随微波周期以每秒２４亿５千万次的速度进行快速振动，这种快速振动产生的摩擦热...

胶体金免疫电镜技术鉴定一株抗HFRS病毒囊膜糖蛋白和核蛋白双特异性McAb

采用超薄切片和胶体金免疫电镜技术鉴定抗HFRS病毒McAb 3G1,结果发现其既对成熟病毒颗粒和囊膜颗粒标记阳性,又对颗粒状包涵体及丝状颗粒包含体标记阳性,从而提示该株McAb可能具有HFRS病毒囊膜糖蛋白和核蛋白双特异性。

葡萄种子细胞中脱落酸的胶体金免疫电镜定位

用胶体金免疫电镜技术，对脱落酸（ABA）在葡萄种子细胞超微结构水平上的分市进行了研究。按葡萄种子细胞液泡中是否含有电子密度大的染色物质，可将其分为含酚和无酚2个主要类型。在含酚细胞中电子密度大的染色物质呈多种状态存在，先是均匀而稀疏地分布在液池中，然后逐渐凝聚成块状，最后浓缩成一薄层并均匀分布在液泡膜内侧。无酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核有大量金颗粒标记，细胞壁有少量金颗粒标记，液泡中没有发现金颗粒标记。和无酷细胞相似，在含酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核金颗粒密度很大，细胞壁有极少金颗粒标记。引人注目的是液泡中聚集态的染色物质上也发现金颗粒标记，但稀疏而均匀分布的染色物质上几乎找不到金颗粒标记，当染色物质最终浓缩成薄层状态时则发现有大量的金颗粒标记。无论用免疫前兑血清染色的对照切片还是材料，不被EDC固定的对照切片中都很难找到金颗粒标记，说明该ABA免疫胶体金电镜定位结果是特异、可靠的。

胶体金免疫电镜技术用于烟草花叶病毒的检测

本文报道了以改良的鞣酸法制备颗粒大小适于植物病毒标记的胶体金方法,以及以胶体金免疫电镜技术检测、鉴定植物病毒的方法,并以此法检测了烟草花叶病毒TMV。

采用免疫胶体金标记结合负染色电镜技术对体外组装的中间纤维定性

将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合，清晰显示体外组装的波形纤维具有１０ｎｍ中间纤维结构特征，抗波形纤维蛋白－金颗粒特异地标记在波形纤维上。用抗波形纤维蛋白－金颗粒对体外组装的微管进行标记则呈阴性反应。实验结果表明将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合可以同时显示体外组装的细胞骨架纤维的精细结构和蛋白属性。

绿豆上胚轴细胞中BR的胶体金免疫电镜定位

利用葡萄球菌A蛋白与胶体金连接的复合物为探针的免疫电镜定位技术对绿豆上胚轴细胞中BR定位的结果表明，在用抗BR抗体处理的超薄切片中，叶绿体、核仁和液泡内有大量的金颗粒标记，细胞膜和淀粉粒也有金颗粒标记，但细胞壁中没有观察到金颗粒。在不用EDC固定的切片中，金颗粒标记密度非常低，而在用正常兔血清处理的切片中，所有细胞器内几乎没有金颗粒.该实验为绿豆上胚轴细胞中BR的分布提供了直接的证据。

胶体金免疫电镜技术在肿瘤研究中的应用

胶体金免疫电镜技术是研究细菌、病毒、肿瘤和自身免疫疾病重要的手段和方法之一。本文着重介绍了免疫金探针的制备、免疫电镜技术与方法在肿瘤研究中的应用,并讨论了存在问题的改进方法。

阿尔采默病患者皮肤α-微管蛋白的免疫细胞化学与胶体金免疫电镜观察

目的观察阿尔采默病(AD)患者皮肤基底细胞α微管蛋白的变化。方法取患者背部皮肤,用免疫细胞化学和胶体金免疫电镜技术观察,并进行定量分析。结果免疫细胞化学染色显示,对照组皮肤免疫阳性染色主要位于表皮层基底细胞的胞质内,棘细胞层和颗粒层可见少量的阳性细胞;AD组基底细胞内着色深,棘细胞层和颗粒层亦有表达,但数量少。胶体金标记结果显示,对照组基底细胞可见较丰富的微管,标记的胶体金散在于胞质。AD组微管较对照组减少;标记的金颗粒数量较对照组明显增多。定量结果显示,AD组α微管蛋白免疫细胞化学染色的AOD值(1. 165±0. 079)、VIOD值(186. 000±15. 853)均较对照组(0. 814±0. 152, 96. 020±14. 755)明显增高(P<0. 01);α微管蛋白胶体金标记颗粒数目AD组(20. 74±3. 99)亦较对照组(15. 50±3. 41)增多明显(P<0. 01)。结论AD患者皮肤基底细胞内微管数量的减少,结构破坏,对皮肤组织的观察可能间接反映神经组织的改变。

贴壁培养细胞胶体金免疫电镜标本制备技术的改进

介绍一种贴壁培养细胞胶体金免疫电镜标本制备方法,本法适用于观察各种因素对细胞表面抗原性质影响的免疫电镜研究。

免疫胶体金试剂的制备及应用胶体金免疫电镜技术检测戊型肝炎病毒

报道了用胶体金免疫电镜技术检测戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的方法。实验采用１０ｎｍ胶体金标记纯化兔抗鼠ＩｇＧ制备了免疫胶体金探针试剂。用本法从戊型肝炎患者粪便提取物中检出ＨＥＶ呈球形，直径３２±５ｎｍ。此方法具有快速、灵敏、直观等特点，在ＨＥＶ生物学性质研究中，有一定的应用价值。

胶体金标记血小板膜糖蛋白的免疫电镜研究

目的建立胶体金标记血小板膜糖蛋白的稳定的免疫电镜技术,为开展血小板功能研究奠定基础。方法采集正常人外周静脉血,分离富血小板血浆,采用微波固定、常规固定两种方法,一抗为抗血小板GPⅢa单抗SZ21,分别选用直径10nm胶体金标记的羊抗鼠IgG(GAM-G)、直径15nm胶体金标记的葡萄球菌A蛋白(SPA-G)为探针。结果微波固定组血小板表面和开放管道系统可见到大量金颗粒的分布,而常规固定组的血小板未观察到金颗粒。结论以微波固定的方法,用大小合适的胶体金探针可特异性定位血小板表面和内部膜糖蛋白。

垂体腺瘤的胶体金免疫电镜染色技术

垂体腺瘤的胶体金免疫电镜染色技术谭燕泉１周庚寅１袁尔恩１李素英１李红１梁思泰１李刚２吴承远２（１山东医科大学病理解剖学教研室２山东医科大学附属医院神经外科）胶体金免疫电镜技术是将激素表型以胶体金颗粒的形式和亚细胞形态紧密结合，其敏感性和特异性优于免疫...