PyGC对昆虫包涵体病毒的模式识别

用裂解毛细管色谱法对２９株核型多角体病毒、１６株颗粒体病毒和１１株质型多角体病毒进行了表征分析，通过分析裂解图特征峰，可区分ＮＰＶ、ＧＶ和ＣＰＶ彼此间的差异和相同亚群不同分离株间的异同，用聚类分析可进一步证明ＰｙＧＣ对昆虫包涵体病毒模式识别的可行性。为分类鉴定病毒及其生化特性提供了一种现代分析方法。

不同系统聚类算法对昆虫包涵体病毒模式的识别

Hierarchical clustering analysis have been done on 48 strains of the representative insects inclusion body viruses (26 strains of nuclear polyhedrosls viruses, 13 strains of granulosis viruses and 9 strains of cytoplasmic polyhedrosis viruses) by capillary gas chromatography, using the eight strategies of hierarchical clustering of Euclidean distance coefficient. A comparison between the dendrograms obtained by these strategies has been made. The results showed that there are definite discriminations between baculovirus group (genus) and cytoplasmic polyhedrosis virus group (genus). The relationships among the genera, groups, subgroups and strains could clearly be unfolded. The similarities and differences among strains also be distinguished. The average method, flexible method （β=0.00）, and group average method in eight strategies of hierarchical clustering had the advantage of other strategies.

激光治疗与巨细胞包涵体病毒的临床观察

采用脱落细胞中找巨细胞包涵体病毒的测定法,检测222例慢性子宫颈炎病人的宫颈管分泌物。结果在激光术前76例阳性,其阳性率为31.5％,激光术后3～6个月中随访,72人转阴性,转阴率为94.7％。提示CO_2烧灼激光及YAG热凝固激光均能对巨细胞包涵体病毒有直接的杀灭作用。

内蒙古牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定及其全基因组分析

为确定引起内蒙古地区3月龄~6月龄荷斯坦犊牛暴发呼吸系统疾病的病原,并分析其基因组序列,本研究对病死犊牛剖检并观察其各脏器的剖检病变,制备各组织病理切片,观察其组织病变。结果可见犊牛肺脏呈深红色有光泽的肌肉样实变,心脏肥大,肝脏表面散在细小的结节状灰白色病灶,肾脏表面散在细小深红色出血点;组织病理学观察可见典型间质性肺炎,多数各级细支气管腔和肺泡腔内巨噬细胞和淋巴细胞大量增生和浸润,偶见合胞体细胞,在各级细支气管部分黏膜上皮细胞浆内有大小不等的圆形红染的病毒包涵体;轻度纤维化和小坏死灶的变质性肝炎,急性炎性脾肿,多发性小出血灶的慢性硬化性肾小球肾炎。进一步进行RT-PCR检测,结果显示,扩增获得约600 bp的目的条带,测序后与GenBank中相关基因序列比对,结果显示目的基因与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)美国分离株USII/S1(KU159366)的同源性最高(98.42%),表明该地区某牧场犊牛感染了BRSV。将该病例肺组织研磨上清液接种牛肾细胞(MDBK)盲传3代出现典型的细胞病变,经RT-PCR检测确认为BRSV,进一步表明分离到1株BRSV,命名为IM BRSV-39。分段扩增IM BRSV-39株的全基因组序列,经测序后拼接获得长度为15130 bp的BRSV全基因组序列。采用MegAlign软件分析IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因序列和F基因序列的同源性及突变位点;采用MEGA 11软件构建分离株全基因组进化树分析其遗传进化关系。结果显示,IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因和F基因序列均与BRSVⅢ亚型分离株相应基因序列的同源性最高、且位于同一进化分支,证实IM BRSV-39株属于BRSVⅢ亚型;突变位点分析结果显示:与BRSVⅢ亚型参考株相比,IM BRSV-39株G基因序列存在7个突变位点,F基因序列存在12个突变位点;G蛋白氨基酸序列存在4个突变位点,其中L13H处在G蛋白的胞质结构域(aa1~aa37);Y^(127)H、I^(139)T、P^(177)L、A^(186)T处在G蛋白的胞外结构域(aa66~aa257);F蛋白氨基酸序列存在5个氨基酸突变位点,其中M^(4)T、M^(7)T、S^(14)C处在F蛋白氨基末端信号肽区(aa1~aa26)。本研究检测并分离到1株BSRV,揭示了该病毒基因组的遗传进化特征,为国内BRSV的深入研究奠定了基础。

对虾一种无包涵体杆状病毒病原的PCR检测

为建立对虾无包涵体杆状病毒的快速诊断技术，应用PCR技术分别对暴发性流行病发生前、流行中和发病后的对虾样品进行了检测．根据已克隆的对虾杆状病毒部分基因组序列而设计的引物能特异性地扩增出靶DNA片段，最低可以检测1pg的病素DNA．由典型发病症状对虾的胃、腮、肝胰腺、中肠、游泳足、肌内和心脏等器官和组织中成功地检测到病毒．不同组织和器官经扩增得到的信号强弱不同：病虾的胃扩增得到的信号最强，中肠、肌肉、心脏和游泳足次之，腮和肝胰腺信号最弱，说明病毒在不同组织和器官中数量及感染程度不同．在对虾发病前及发病后，用二次PCR还能检测表面不发病呈隐性感染状态的对虾携带的病毒；而对野生健康虾的检测结果为阴性．研究表明，PCR是检测对虾暴发性流行病快速、灵敏而准确的方法，对病毒病的早期诊断、防治和高健康对虾品种的选育具有指导意义．

茶刺蛾颗粒体病毒包涵体的表面增强拉曼散射光谱研究

得到了茶刺蛾颗粒体病毒(DtGY)包涵体在银胶溶液中的表面增强拉曼散射(SERS)谱,并与其在水溶液中的一般拉曼散射(RS)谱作了比较分析。DtGV颗粒体外膜蛋白通过COO^-和NH_2基团吸附到银表面上。Tyr和Phe残基侧链远离金属表面,而Trp残基侧链接近银表面。多肽链被蛋白质中氨基酸残基侧链所屏蔽而妨碍有关振动的有效增强。

鸡包涵体肝炎病毒CELOV株的鉴定研究

采用鸡胚有限稀释法将鸡包涵体肝炎病毒(CELOV)纯化。将纯化的CELOV在SPF鸡胚上连续传10代,对各代次的毒种均进行毒价测定,并选择不同代次进行外源病毒、抗原性等方面的系统鉴定。结果表明,不同代次的病毒毒价稳定,病毒纯净、特异,无外源病毒感染。采用不同代次病毒鸡胚尿囊液制备3批琼脂扩散试验抗原敏感、特异,用原倍、2倍稀释的抗原可以与32倍稀释的阳性血清反应,出现清晰的沉淀线。抗原不与其它病原体的阳性血清反应。用CELOV制备的琼扩抗原可用于鸡包涵体肝炎病毒感染的血清学检测。

一株鸡包涵体肝炎病毒的分离鉴定

利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过ＳＰＦ鸡胚传代和鸡胚肾原代细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒Ｈｂ株。该病毒株的复制可被５－溴尿嘧啶－２′脱氧核苷抑制，对乙醚和氯仿有低抗力，说明Ｈｂ株的核酸型为ＤＮＡ，无脂质囊膜。Ｈｂ株对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察表明，病毒粒子呈球形，直径约８０～９０ｎｍ。用ＡＡＶ－２、３、４、５、８型的分型高免血清进行中和试验，证明Ｈｂ株为血清型８型。

流行性出血热病人尸检材料中的病毒包涵体

应用抗流行性出血热病毒多克隆及单克隆抗体结合敏感的方法在尸检组织切片上进行了免疫细胞化学染色,多克隆抗体可清楚地显示出尸检组织中病毒抗原阳性的包涵体结构。依光镜下染色的形态特点不同,可将包涵体分为四个类型即小泡型、大泡型、多泡型和实心型。单克隆抗体染色进一步证实,实心型及空泡型包涵体呈“N”抗原阳性,少数组织中空泡状包涵体也呈“G2”抗原阳性。病毒包涵体的出现可作为该病毒在人体细胞内感染及复制的形态学证据。

昆虫包涵体衍生病毒囊膜蛋白的分子生物学

了解杆状病毒的囊膜蛋白对揭示病毒入侵、囊膜蛋白核定向转运机制以及研究控制昆虫新策略等方面具有重要意义。目前研究表明,包涵体衍生病毒(occlusion-derived virus,ODV)的囊膜蛋白包括ODV-E25,ODV-E66,ODV-E56,ODV-E18,ODV-E28,P74,PIF1,PIF2,PIF3,GP41,ODV-EC27,ODV-E35,ODV-EC43,BV/ODV-E26,P91和ORF150。本文结合国内外的研究成果系统地综述了囊膜蛋白的结构和功能,其在经口感染、调节细胞周期和囊膜蛋白的传送等方面起作用。囊膜蛋白的核定向转运机制,ODV与昆虫中肠之间和包涵体基质之间相互作用以及ODV结构蛋白之间的相互作用等将是今后的研究重点。

实验性鸡包涵体肝炎病毒侵袭过程中免疫细胞的变化

用鸡腺病毒内蒙古毒株 ( FAV- HA)对 1日龄 SPF雏鸡进行人工感染。经 HE染色发现 ,各淋巴器官的淋巴细胞严重流失 ,肝脏等器官中单核 -巨噬细胞活化增生 ;经间接免疫荧光法病毒抗原定位 ,除法氏囊外 ,均呈不同程度的抗原阳性反应 ,单核 -巨噬细胞阳性明显。用间接免疫荧光法计数 ,实验组 T、B淋巴细胞数量均明显少于对照组。

病毒包涵体检查法快速诊断犬瘟热的研究

犬瘟热是犬科、鼬科及浣熊科动物最常见的一种急性致死性传染病,多见于幼犬、狐、水貂及貉,由副粘病毒科犬瘟热病毒引起。这种病毒能激发宿主上皮细胞产生特征性的病毒包涵体。据文献报导,犬瘟热病毒包涵休具有相当的特异性,其阳性呈现率,

养殖对虾病毒与病毒包涵体的形态学研究

1993年6月至8月在唐山市养殖对虾大面积死亡期间,选取病虾标本若干份,经电镜检查结果发现,病毒与病毒包涵体存在部位均在胞浆内,而细胞核内则无。

尿中病毒包涵体检测在HBV相关肾炎中的诊断价值

目的 探求HBV相关肾炎准确、简便的诊断方法。方法 应用染色法对 49例肾小球疾病患者进行尿病毒包涵体检测。结果 尿病毒包涵体与血清HBV抗原及肾组织HBsAg沉积检测有一致性。