鸡包涵体肝炎病毒CELOV株的鉴定研究

采用鸡胚有限稀释法将鸡包涵体肝炎病毒(CELOV)纯化。将纯化的CELOV在SPF鸡胚上连续传10代,对各代次的毒种均进行毒价测定,并选择不同代次进行外源病毒、抗原性等方面的系统鉴定。结果表明,不同代次的病毒毒价稳定,病毒纯净、特异,无外源病毒感染。采用不同代次病毒鸡胚尿囊液制备3批琼脂扩散试验抗原敏感、特异,用原倍、2倍稀释的抗原可以与32倍稀释的阳性血清反应,出现清晰的沉淀线。抗原不与其它病原体的阳性血清反应。用CELOV制备的琼扩抗原可用于鸡包涵体肝炎病毒感染的血清学检测。

一株鸡包涵体肝炎病毒的分离鉴定

利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过ＳＰＦ鸡胚传代和鸡胚肾原代细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒Ｈｂ株。该病毒株的复制可被５－溴尿嘧啶－２′脱氧核苷抑制，对乙醚和氯仿有低抗力，说明Ｈｂ株的核酸型为ＤＮＡ，无脂质囊膜。Ｈｂ株对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察表明，病毒粒子呈球形，直径约８０～９０ｎｍ。用ＡＡＶ－２、３、４、５、８型的分型高免血清进行中和试验，证明Ｈｂ株为血清型８型。

实验性鸡包涵体肝炎病毒侵袭过程中免疫细胞的变化

用鸡腺病毒内蒙古毒株 ( FAV- HA)对 1日龄 SPF雏鸡进行人工感染。经 HE染色发现 ,各淋巴器官的淋巴细胞严重流失 ,肝脏等器官中单核 -巨噬细胞活化增生 ;经间接免疫荧光法病毒抗原定位 ,除法氏囊外 ,均呈不同程度的抗原阳性反应 ,单核 -巨噬细胞阳性明显。用间接免疫荧光法计数 ,实验组 T、B淋巴细胞数量均明显少于对照组。

鸡包涵体肝炎病毒荧光定量PCR滴度测定方法的建立及与不同滴定方法间的比较

本试验根据Gen Bank中I群禽腺病毒(FAV-Ⅰ)代表株AAU46933(CELO株)的Hexon基因序列设计一对通用引物,摸索了合适的扩增条件,建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法,并对9株鸡包涵体肝炎毒株的病毒滴度进行了测定,并与OD260法、鸡胚病变法以及细胞病变法测定的结果进行比较。试验结果表明,本方法的检测下限为0.98×102拷贝/μL。以细胞病变法为标准测定方法,经统计学分析发现,鸡胚病变法与细胞病变法之间无统计学差异(P=0.591);荧光定量PCR法与细胞病变法测得结果之间存在线性相关性(相关系数r=0.965,P<0.05);OD260法与细胞病变法测得的结果间无相关性(P>0.05)。以上结果说明,荧光定量PCR法测定结果能够间接反映病毒感染力,与传统方法相比,该方法操作简单、耗时短、成本低,具有较高的应用价值。

鸡包涵体肝炎病毒FAV-HA株诱生SPF雏鸡体内肿瘤坏死因子的研究

自1975年从动物体内提取肿瘤坏死因子(TNF)以来,许多科学研究者从哺乳动物和禽类体内提取TNF并对其进行了理化性质、生物活性的研究和探讨。以前的研究中用卡介苗和大肠杆菌内毒素等诱导产生TNF。本研究为TNF的诱导产生提供新的思路和试验方法。利用鸡包涵体肝炎病毒FAV-HA株作为TNF的诱生剂,诱导产生SPF雏鸡TNF,其生物活性用L-929细胞进行检测。通过试验证实,FAV-HA能够诱导产生TNF,并且在不同组织器官内TNF的含量有一定差异。

12株肉仔鸡包涵体肝炎病毒的分离和PCR鉴定

从临床疑似肉仔鸡包涵体肝炎病例的肝组织中,通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养,分离到12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒毒株。通过形态学、致细胞病变和PCR检测等对12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒分离物进行了鉴定。结果显示,该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称,直径70～80nm;接种鸡胚后鸡胚肝在不同时期表现不同程度的病变;在鸡胚肾细胞(CEK)上可致细胞病变。根据Ⅰ群禽腺病毒CELO株的Hexon保守区基因序列,设计合成了1对引物。用这对引物对12株病毒的核酸模板进行了PCR扩增,结果均特异性地扩增出了与设计片段大小相一致的508bp片段,序列分析表明,分离株确为Ⅰ群禽腺病毒。从病毒形态,鸡胚及细胞病变以及PCR检测结果,证明12株分离物确为肉仔鸡包涵体肝炎病毒。建立的鸡包涵体肝炎快速PCR诊断方法可用于鸡包涵体肝炎的临床快速诊断。

鸡包涵体肝炎病毒内蒙古毒株的分离与鉴定

本试验利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒HA株．该病毒株的核酸型为DNA、无束膜、对乙醚、氯仿具有抵抗力；且其对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察发现，病毒粒子呈球形，直径约80～100nm。用2、3、4、5、8型的标准阳性血清迸行中和拭验，证明HA株为血清型2型。回归试验表明HA株具有较强的致病性。

一起肉鸡包涵体肝炎的诊治

鸡包涵体肝炎（InclusIonBody Hepatitis，IHB）是由禽腺病毒（FowlAdenovlrus）引起的一种急性病毒性传染病，其特征为肝炎，肝细胞内形成核内包涵体、贫血和肌肉出血，主要发生于2～7周龄的肉鸡。包涵体肝炎病毒有9～11种血清型，目前认为鸡腺病毒8型、2型、3型、4型、5型等血清型是鸡包涵体肝炎的主要病原体。鸡包涵体肝炎在临床上极为少见，但随着养鸡业的发展，本病在一些地区开始出现，笔者从事临床6年多以来首次见到此病，现将一例肉食鸡包涵体肝炎的防治报道如下。

鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子消长规律的研究

自1975年从动物体内提取肿瘤坏死因子(TNF)以来,许多科学家从哺乳动物及禽类体内提取TNF并对其理化性质、生物学活性进行了不同程度的研究和探讨。而用鸡包涵体肝炎病毒诱生TNF与该病之间相关性及产生的消长规律的研究尚属空白。本研究应用鸡包涵体肝炎病毒(FAV-HA毒株)接种SPF雏鸡,在接种后的不同日龄采血,提取TNF,并对其免疫活性(对L929细胞的杀伤率)进行了检测,从而进一步研究其产生TNF的消长规律及与该病毒的相关性。研究结果表明,鸡包涵体肝炎病毒经口腔感染SPF雏鸡可刺激机体产生TNF,在感染的不同日龄鸡的TNF活性出现一定的消长规律。这进一步说明鸡包涵体肝炎(IBH)与TNF的产生及其活性具有密切的相关性。

肉鸡包涵体肝炎的诊断与防控

包涵体肝炎（Inclvsion Body Hepatitis，mH）是由禽腺病毒引起的传染性疾病。一般情况主要发生于3—10周龄肉用仔鸡，尤其以一月龄左右的鸡多发，蛋鸡及鸽亦有发生。一、病原特征与致病机理包涵体肝炎病毒属于腺病毒科的双股DNA病毒，无囊膜，直径为69～86纳米；其致病机理为：病毒感染细胞后首先通过纤维突起吸附在细胞膜上，然后进入细胞浆，衣壳解体，释放病毒DNA，最后DNA进入细胞核内进行病毒复制，而病毒结构蛋白由胞浆运回细胞核内参与子代病毒的装配，当宿主细胞崩解时，释放出子代病毒；该病毒有11个血清型，在室温条件下，鸡腺病毒的致病力可保持6个月，在干燥的25℃下可存活7天，对福尔马林、次氯酸钠、碘制剂较敏感，对酸、乙醇、酚、硫柳汞有一定程度的耐受性。

鸡包涵体肝炎的诊断与防制

包涵体肝炎是由禽腺病毒引起鸡的一种急性传染病,以突然死亡、严重贫血、黄疸、肌肉出血、肝炎和肝细胞内形成核内包涵体为特征。1病原体包涵体肝炎病毒属于腺病毒科、禽腺病毒属,病毒粒子直径为80~90nm,无囊膜,呈正20面体对称,为双股DNA病毒。鸡腺病毒有11个血清型。该病毒对外界环境的抵抗力较强。耐热,50℃3小时稳定,

动物肝病的发病原因与病理变化

1肝炎本病是指肝脏在某些致病因素作用下发生的以肝细胞变性、坏死或间质增生为主要特征的炎症过程。根据肝炎发生的原因而把其分为传染性肝炎和中毒性肝炎。传染性肝炎是由病原微生物所引起的,主要由细菌、病毒、霉菌和寄生虫引起的。病毒性肝炎，如雏鸭肝炎病毒，火鸡包涵体肝炎病毒、犬传染性肝炎病毒、牛恶性卡他热，鸭瘟、马传染性贫血等疾病的病原体都可引起肝炎。眼观，肝有不同程度肿大，呈暗红色或红色与土黄色相间的斑驳色彩，其间往往有灰白色或灰黄色形状不一的坏死灶，胆囊肿大或缩小。