Notch抑制剂DAPT体外改善L02细胞脂肪变研究

目的探讨Notch抑制剂(DAPT)体外对脂肪变肝细胞细胞炎症因子及脂质相关基因水平的影响。方法采用棕榈酸(PA)干预体外构建肝细胞脂肪变模型,采用不同浓度的DAPT干预。采用CCK-8检测细胞存活率,采用尼罗红染色了解细胞脂滴量,采用RT-qPCR法检测TNF-α、IL-1β和IL-6和脂肪相关因子【固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)、FASN和ACACA】mRNA水平,采用Western blot法检测细胞p65和SREBP1c蛋白表达。结果在无PA干预的L02细胞,经1μM、2μM、5μM和10μM DAPT处理细胞24 h,细胞存活率均较对照组显著下降(分别为85.2±5.3%、84.6±2.9%、84.4±6.0%和84.5±3.2%对100.0%,P均<0.05);经2μM和5μM浓度的DAPT干预,细胞TNF-αmRNA水平分别为(0.6±0.01)和(0.5±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.01】,IL-1β水平分别为(0.7±0.2)和(0.4±0.0),显著低于对照组【(1.1±0.1),P<0.01】,IL-6水平分别为(0.8±0.1)和(0.6±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.05】,细胞p65蛋白表达量也显著降低(P<0.05);2μM、5μM和10μM DAPT处理细胞脂滴荧光强度较对照组显著减弱【分别为(0.2±0.1)、(0.3±0.0)和(0.1±0.0)对(0.7±0.0),P均<0.001】,2μM和5μM DAPT处理细胞FASN mRNA水平分别为(0.7±0.0)和(0.4±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.001】、ACACA mRNA水平分别为(0.6±0.1)和(0.3±0.0),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.001】;5μM DAPT处理细胞SREBP1c蛋白表达量显著低于对照组(P<0.01)。结论DAPT能有效降低体外脂肪变细胞炎症因子表达量,缓解细胞内脂滴形成,其机制可能与调控脂肪相关因子的表达有关,提示抑制Notch信号通路有改善细胞脂肪变发生和进展的潜力。

血清肌酐/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C比值对胰腺癌患者的早期诊断与预后价值

目的探讨血清肌酐/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(sCr/CysC)比值对胰腺癌早期诊断和预后评估的价值。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院2020年1月至2021年12月收治的60例初诊胰腺癌患者、30例胰腺良性肿瘤患者和30例健康对照者的临床资料。比较三组间sCr/CysC比值、C反应蛋白(CRP)、L3骨骼肌指数(L3-SMI)、Alb和CA199水平的差异。采用ROC曲线分析sCr/CysC比值对胰腺癌的诊断效能。根据sCr/CysC比值中位数将胰腺癌患者分为高比值组和低比值组,应用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析sCr/CysC比值对胰腺癌预后的预测价值。结果与胰腺良性肿瘤组和健康对照组相比,胰腺癌组的sCr/CysC比值和Alb水平显著降低,而CRP水平明显升高(均P<0.05)。与低sCr/CysC比值组相比,高比值组患者的性别构成、年龄和L3 SMI水平差异有统计学意义(均P<0.05)。sCr/CysC比值对胰腺癌的诊断ROC曲线下面积为0.640(95%CI:0.524~0.756,P<0.05),在cut-off值为0.69时敏感性为46.7%,特异性为83.3%。相关分析显示,sCr/CysC比值与L3-SMI呈正相关(r=0.425,P<0.01)。生存分析表明,高sCr/CysC比值组患者的中位生存期显著长于低比值组(379 d vs 210 d,P<0.01)。Cox回归分析确认sCr/CysC比值是胰腺癌预后的独立危险因素(HR=0.151,95%CI:0.028~0.826,P<0.05)。结论sCr/CysC比值可能是胰腺癌早期诊断和预后评估的有效指标,有望为胰腺癌的临床诊疗提供参考。

浅谈钻井液包被抑制剂(PLUS-L)在伊拉克AHDEB项目中的应用

艾哈代布油田项目是伊拉克战后第一个对外石油合作项目,在项目开发的过程中,对于钻井液施工的难点有很多,艾哈代布油田采用的是聚磺混油钻井液体系,只对钻井液中的包被抑制剂(PLUS-L)在施工过程中的应用进行赘述。钻井施工的过程中,先后钻遇Upper Fars、Lower Fars、Dammam、Aliji等疑难地层,其中Upper Fars层位在1100m之前,主要以大段的软泥岩为主,Lower Fars主要以石膏岩为主,Dammam和Aliji均含有大量的黑燧石夹层,以上几个地层对钻井液的包被抑制性、抗盐抗钙性以及携屑性都有很大的要求,下面将AD2-13-4H(AD-119)与AD2-15-3H(AD-130)井进行对比分析,详细说明包被抑制剂(PLUS-L)在施工中的具体应用。

PD1/PD⁃L1抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌致甲状腺不良反应的网状Meta分析

目的探讨PD1/PD⁃L1抑制剂不同策略治疗非小细胞肺癌(Non⁃small⁃cell lung cancer,NSCLC)致甲状腺不良反应(Adverse thyroid reac⁃tions,ATRs)的风险。方法检索PubMed、Embase及Cochrane Library数据库,收集PD1/PD⁃L1抑制剂治疗NSCLC的随机对照试验(Randomized controlled trial,RCT),时限为建库至2022年6月,2位评价员独立筛选文献提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.4和STATA 16.0软件进行网状Meta分析(Network meta⁃analysis,NMA)。结果共纳入31项研究,涉及17850例患者。NMA结果显示:①发生ATRs的前三项治疗策略为:PD1+CTLA4+Chemo>PD1+CTLA4>PD1,PD⁃L1抑制剂致ATRs的概率低于PD1抑制剂;②联合化疗可能在一定程度上降低Nivo、Pem及Atezo导致的ATRs的发生风险;③亚组分析显示,16个治疗组中,Nivo+Ipi联合组发生ATRs的风险最高,Sinti+Chemo最低。结论①Chemo仍是目前治疗NSCLC发生ATRs概率最低的方案;②PD1+CTLA4+Chemo是发生ATRs概率最高的治疗方案;③亚组分析结果显示Nivo+Ipi联合治疗发生ATRs的风险最高。

组织蛋白酶L及其组织抑制剂在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其意义

目的:探讨组织蛋白酶L(Cathepsin L,CL)及其组织抑制剂C(Cystatin C,CC)在卵巢恶性肿瘤中的表达及与卵巢恶性肿瘤临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR方法检测47例卵巢恶性肿瘤、21例良性卵巢肿瘤、20例正常卵巢组织中CL及CC的表达情况,行阳性率及半定量的比较并将其结果与临床病理学资料进行分析。结果:CL在卵巢恶性肿瘤中的表达水平明显高于良性肿瘤和正常卵巢组织中(P<0.05)。CL半定量表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05)。CC在卵巢恶性肿瘤中的表达水平明显高于良性肿瘤和正常卵巢组织(P<0.01)。CC半定量表达在病理分级、肝转移、大网膜转移、腹水方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CL、CC在卵巢恶性肿瘤中表达增高,可能与卵巢恶性肿瘤转移相关。

非小细胞肺癌EGFR基因少见突变P733L对第1代和第3代EGFR-TKI敏感性的研究

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因少见突变P733L对第1代和第3代EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)的敏感性。方法:通过四唑盐比色法和平板克隆实验分析EGFR L858R和P733L肺癌细胞对第1代和第3代EGFR-TKI的敏感性;通过Transwell实验分析第1代和第3代EGFR-TKI对EGFR L858R和P733L肺癌细胞迁移的抑制作用;通过检测凋亡蛋白分析第1代和第3代EGFR-TKI促进EGFR L858R和P733L肺癌细胞凋亡的作用。结果:第1代和第3代EGFR-TKI对EGFR L858R和P733L细胞的增殖、克隆形成和细胞迁移都有抑制作用。与EGFR野生型肺癌细胞相比,第1代和第3代EGFR-TKI处理后,EGFR L858R和P733L细胞的EGFR激酶活性受到抑制,细胞凋亡明显增加。结论:EGFR P733L突变细胞对第1代和第3代EGFR-TKI的敏感性与EGFR L858R突变细胞的敏感性相似,本研究为EGFR基因少见突变从EGFR-TKI治疗中获益提供了实验证据。

免疫抑制剂对嗜铬细胞瘤12细胞和L929细胞增殖的影响

目的 初步探讨多种免疫抑制剂对嗜铬细胞瘤12（pheochromocytoma 12，PC12）细胞和L929细胞增殖的影响。方法 对数生长期PC12细胞和L929细胞传代，取细胞株复苏后第3代细胞均以1×10^6／ml密度接种于培养板中，分别加入10、10、10^-7和10^8mol／L环孢菌素A（cyclosporin A，CsA），10^-6、10^-7、10^-8和10^-9mol／LFK506以及10^-3、10^-4、10^-6和10^-8mol／L甲基强地松龙，并设立空白对照组。于培养24、48和72h后，取各浓度药物作用的细胞，采用MTT法检测细胞增殖。结果 高浓度（10mol／L）甲基强地松龙和较低浓度（10^-8～10^-7mol／L）CsA，在给药后48h内对PCI2细胞增殖有明显促进作用，此后促增殖作用不明显；而各个浓度的FK506均无促进PCI2细胞增殖的作用。高浓度甲基强地松龙（10^-3mol／L）和CsA（10^-6～10mol／L）作用24h后，对L929细胞增殖有显著抑制作用，FK506仅在较高浓度（10^-6mol／L）有一过性（仅出现于给药后48h）促进L929细胞增殖的作用。结论 10^-3mol／L甲基强地松龙和10^-8～10^-7mol／LCsA能够在短时间内促进PC12细胞增殖，而10^-3mol／L甲基强地松龙和10^-6～10^-5mol／L CsA对L929细胞增殖有显著抑制作用。

三种免疫抑制剂对共刺激后淋巴细胞产生IL-2的影响

目的探讨CD28、CD40通路共刺激后淋巴细胞产生IL-2的变化及免疫抑制剂环孢素A（CsA）、雷帕霉素（RPM）及霉酚酸（MPA）对共刺激通路激活后淋巴细胞产生IL-2的影响。方法采用单克隆抗体与淋巴细胞表面CD3、CD28及CD40L分子结合产生相应刺激信号，根据刺激条件不同设组为：①单刺激及共刺激：A：CD3mAb单刺激；B：CD3mAb＋CD28mAb共刺激：C：1CD3mAB＋CD28mAb＋CD40LmAb共刺激；D：CD3mAb＋CD28mAb＋CTLA4mAb共刺激。各单抗的终浓度均为100ng／ml。②CSA干预组：将终浓度为300ng／ml的CSA加入上述A、B、C、D四组。③RPM干预组：将终浓度为300ng／ml的RPM加入上述A、B、C、D四组。④MPA干预组：将终浓度为300ng／ml的MPA加入上述A、B、C、D四组。用ELISA法测定上述细胞培养上清中的IL2值。结果CD28、CD40通路刺激后淋巴细胞产生IL-2的水平均明显升高。抗CD3单抗＋抗CD28单抗＋抗CD40L单抗共刺激后，与抗CD3单抗＋抗CD28单抗共刺激组相比，IL-2呈现下降趋势。CTLA4mAb所提供的信号使共刺激后IL-2的产生降低。三种免疫抑制剂CSA、RPM及MPA对共刺激后IL-2的产生均有抑制作用，CSA的抑制作用更为明显。CSA与CTLA4mAb的作用有协同作用。结论CD28共刺激通路在淋巴细胞活化中起着关键作用。CsA、RPM、MPA及抗CTLA4单抗对共刺激后IL-2的产生均有抑制作用，CSA的抑制作用更为明显。

家蚕组织蛋白酶L及其特异性抑制剂基因参与微生物诱导蚕体的免疫响应研究

给家蚕5龄第3天幼虫分别注射藤黄微球菌(革兰阳性菌)和球孢白僵菌(真菌)进行诱导处理,利用已登录的家蚕组织蛋白酶L基因Bm Cts L(Gen Bank登录号:S77508.1)和Bm Cts L特异性抑制剂基因Bm Cts LI(Gen Bank登录号:AJ131752)的全长序列设计引物,实时荧光定量PCR检测微生物入侵后家蚕组织中Bm Cts L和Bm Cts LI基因的时空表达变化及协同反应,分析Bm Cts L酶活性变化与家蚕对微生物入侵免疫响应的相关性。家蚕的血细胞与脂肪体是微生物入侵后Bm Cts L和Bm CtsLI基因出现表达变化的主要组织,其中经藤黄微球菌诱导后,血细胞中的Bm Cts L基因响应最快,且基因mRNA转录水平极显著上调,脂肪体中的Bm Cts LI基因mRNA转录水平也极显著上调。微生物入侵后蚕体组织中Bm Cts L与Bm Cts LI基因的表达变化存在时间差异,其中Bm Cts L基因先于Bm Cts LI基因上调表达,推测Bm Cts LI基因通过对微生物入侵的协同反应调控BmCts L酶活性变化。藤黄微球菌比球孢白僵菌能更快诱导Bm Cts L和Bm Cts LI基因的表达变化;2种微生物诱导下蚕体血细胞中的Bm Cts L酶活性不仅上升快,而且明显高于其他组织。上述结果提示Bm Cts L和Bm Cts LI可能与家蚕的先天免疫相关,并且佐证了家蚕的血细胞在微生物入侵后能比其他组织更快速地产生免疫响应。

信号转导抑制剂对TNFβ诱导L929细胞凋亡的研究

本文采用 FDA- PI荧光染色 ,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人 TNFβ对 L92 9细胞的细胞毒效应 ,结果表明 TNFβ主要是诱导 L92 9细胞以凋亡的形式死亡 .实验还采用 8种信号转导抑制剂 ,观察它们对 TNFβ杀伤 L92 9细胞的影响 ,以探讨细胞凋亡的信号转导途径 .初步研究表明 :磷脂酶 A2 ,Ca2 + 通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制 TNFβ对 L92 9细胞的杀伤 ,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用 ;相反地 ,蛋白激酶 C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡 ;而环加氧酶、磷脂酰肌醇 -

一种变性剂thiopyrylium光敏剂及竞争抑制物在红细胞保存条件下减少病毒与细菌的作用

背景由于发生溶血而阻碍了光化学方法减少红细胞中病原体研究的发展。一种变性剂、核酸插入化合物thiopyrylium（TP）染色剂，仅在化合物状况时表现为光化学活性剂，红细胞膜结合潘生丁（DP）的竞争抑制剂，游离的和膜结合的染色剂可降低光诱导的溶血。研究设计及方法氧合的去白细胞的容积为20％的红细胞悬液接种病毒或细菌，加入200μmol／LDP和≤100μmol／L TP-起孵育，1．1J／cm^2的红外线照射后，测定病毒和细菌滴度。含200μmol／L DP和160μmol／L TP的红细胞悬液用相同方法光化学处理，并浓缩至45％hct，分析红细胞保存后的特性。

蛋白酶体抑制剂MG-132诱导L1210细胞凋亡及其机制研究

为了观察蛋白酶体抑制剂MG-132对淋巴细胞白血病细胞株L1210的致凋亡作用,探讨MG-132的致凋亡机制,分别以不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG-132处理L1210细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,应用Annexin-Ⅴ和PI双染色细胞流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定细胞中caspase3的活性,采用Western-blot法检测细胞NF-κB P65核蛋白的表达。结果表明:在相同的作用时间下,随着MG-132浓度的增高(0、2.5、5、10、20μmol/L),细胞增殖抑制率、凋亡率、caspase3活性逐渐升高;Western-blot法检测显示,细胞NF-κB P65核蛋白表达水平降低。结论:蛋白酶体抑制剂能够诱导L1210细胞凋亡,其机制可能是通过下调NF-κB的表达,进一步活化caspase3的活性而诱导凋亡。

L型氨基酸转运蛋白抑制剂BCH联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用

目的:探讨L型氨基酸转运蛋白抑制剂2-氨基双环-(2,2,1)-庚烷-2-羧酸(BCH)单用及联用顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞生长的影响及其可能的分子机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的BCH及BCH联合顺铂处理后,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性;Western blot检测BCH对mTOR通路的影响。结果:单用BCH可显著抑制SKOV3细胞增殖,并呈现一定的时间-剂量依赖性。联用顺铂较之单独用药组,细胞活性明显降低(P<0.01),且BCH在顺铂之后应用时抑制作用更为明显(P<0.05)。Western blot显示BCH可抑制mTOR、p70 S6K和4E-BP1磷酸化,阻断mTOR通路。结论:L型氨基酸转运蛋白抑制剂BCH单用及联用顺铂均可显著抑制人卵巢癌SK-OV3细胞增殖,且BCH在顺铂之后应用抑制作用更明显,呈协同作用。

PD-1/L1抑制剂在胃癌治疗中的研究进展

免疫治疗是近年来的热门研究领域。PD-1/L1抑制剂通过阻断PD-1与PD-L1的结合,阻断负向调控信号,使T细胞恢复活性,从而增强免疫应答。PD-1/L1抑制剂包括纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、替雷利珠单抗、卡瑞利珠单抗、信迪利单抗等。研究表明,PD-1/L1抑制剂单药或联合其他治疗方案能够提高胃癌患者总生存率。

不同检测策略在预测非小细胞肺癌的PD1/PD-L1抑制剂临床疗效中的应用

近10年来,程序性死亡因子1(programmed death-1,PD-1)及其配体(programmed death ligand-1,PD-L1)的抑制剂在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床治疗中取得了重大突破,有望改变晚期NSCLC的治疗方式。然而,PD-1/PD-L1抑制剂在对NSCLC的治疗中需要借助有效的生物标志物以寻找受益人群(约20%～40%)。目前,临床上主要的判断标准是PD-L1的表达水平。本文综述了近年来在NSCLC中,与预测PD-1/PD-L1抑制剂疗效的PD-L1表达相关的检测方法,包括免疫组化、基于DNA/RNA水平检测、可溶性PD-L1的检测、正电子发射断层显像(positron emission tomography,PET)技术、多重免疫组化技术、流式细胞术和液体活检技术等,着重探讨了不同检测策略在评价PD-L1表达上的最新进展及应用前景,从而推动其在NSCLC免疫治疗中的临床应用。

安罗替尼联合PD⁃1/PD⁃L1抑制剂后线治疗晚期转移性结直肠癌的临床观察

目的探讨安罗替尼联合PD⁃1/PD⁃L1抑制剂后线治疗晚期结直肠癌的临床疗效与安全性。方法选取2020年2月至2020年10月衡水市人民医院收治的既往曾接受三线及以上标准治疗的晚期转移性结直肠癌患者17例,给予患者盐酸安罗替尼胶囊联合PD⁃1/PD⁃L1抑制剂治疗,根据RECIST 1.1版标准和NCI CTC 4.0版标准评价疗效及不良反应。结果17例患者至随访结束死亡1例,其余16例没有获得完全缓解,2例部分缓解、6例稳定和8例进展,有效率和疾病控制率分别为11.76%和47.06%。中位随访时间为2.1个月。最常见不良反应为高血压、疲劳、腹泻,发生率依次为35.30%(6/17)、35.30%(6/17)、29.41%(5/17)。绝大多数不良反应为1~2级,未出现4级不良反应。结论安罗替尼联合PD⁃1/PD⁃L1抑制剂后线治疗晚期结直肠癌具有良好的效果与安全性,可在临床上应用。

血清PAI-1、sCD40L与ICU患者下肢深静脉血栓形成的关系研究

目的 探讨血清纤溶酶原激活物抑制剂-1 (PAI-1)、可溶性细胞表面分化抗原40配体(sCD40L)与重症监护病房(ICU)患者下肢深静脉血栓形成(LEDVT)的关系。方法 回顾性分析2022年1月至2023年10月湖州市第一人民医院收治的120例ICU患者的临床资料,患者治疗前完成血清PAI-1及sCD40L检查。依据住ICU期间LEDVT发生情况将患者分为发生组和未发生组,分析血清PAI-1、sCD40L与患者并发LEDVT的关系。结果 并发LEDVT41例,发生率为34.17%。发生组治疗前血清PAI-1、sCD40L水平均高于未发生组,年龄≥60岁及肥胖占比高于未发生组(均P<0.05)。经多因素Logistic回归分析发现,治疗前血清PAI-1、sCD40L过表达及肥胖是ICU患者并发LEDVT的危险因素(均P<0.05)。血清PAI-1、sCD40L对ICU患者LEDVT的发生存在正向交互作用,二者均过表达时LEDVT发生风险是二者均低表达时的10.857倍。结论血清PAI-1、sCD40L可能参与了LEDVT的发生,二者同时过表达将增加ICU患者并发LEDVT风险。

含硅的两性离子型包被抑制剂及其制备方法

本发明涉及一种用于水基钻井液的含硅的两性离子型包被抑制剂及其制备方法。该包被抑制剂由中性单体、阴离子单体、阳离子单体、硅类单体共聚而成。本发明的优点在于,通过分子结构的设计,使较快的电荷吸附和较强的化学反应偶联作用结合,以提供一种吸附速率快、吸附强度高的包被抑制剂,且该包被抑制剂通过反相悬浮聚合来制备,制备过程后处理相对简单,且形成的珠状颗粒易于分散溶解于水相中,有利于现场应用。

急性混合型白血病细胞DOT1L 抑制剂前体药物筛选方法的建立

通过研究H3K79me2 水平的变化,建立针对急性混合型白血病细胞的DOT1L 抑制剂类前体药物的筛选平台。方法:检测DOT1L 抑制剂EPZ5676 对细胞H3K79me2 水平的影响。结果:DOT1L 抑制剂显著降低了细胞H3K79 位点甲基化水平。结论:可以通过检测H3K79me2 水平的变化,建立DOT1L 抑制剂类前体药物通量筛选工作平台。

含硝化抑制剂复合肥对西瓜 黄瓜产量和营养品质的影响

采用田间试验研究了含硝化抑制剂3,4-二甲基吡唑磷酸盐(3,4-dimethylpyrazolephosphate,DMPP)复合肥(ENTEC,12-12-17)对西瓜(CitrulluslanatusM.)、黄瓜(CucumissativusL.)生长和品质的影响。结果表明,含DMPP复合肥可以显著提高西瓜、黄瓜产量,与对照(普通复合肥)相比,分别提高6.50%(浙蜜1号)、44.55%(浙蜜2号)、8.40%(津春4号),均达到了显著性水平。西瓜、黄瓜的硝酸盐含量与对照相比,分别降低了2.42%(浙蜜1号)、10.70%(浙蜜2号)、27.44%(津春4号)。西瓜、黄瓜的糖分、可溶性固形物、VC、氨基酸、N等含量都明显提高,从而提高了营养品质。从总的趋势来看,含DMPP复合肥在西瓜浙蜜2号上的施用效果优于浙蜜1号。