-
题名293包装细胞产生重组逆转录病毒的基因转染研究
- 1
-
-
作者
石小玉
李文林
张际青
-
机构
江西医学院基础医学部
江西省医学科学研究所
江西医学院组织学与胚胎学教研室
-
出处
《交通医学》
2003年第5期609-609,共1页
-
文摘
目的 :如何提高重组逆转录病毒的滴度和基因转染率 ,是目前需要研究的问题。方法 :目的基因连接到病毒载体形成重组子 ;病毒载体质粒转入包装细胞 2 93 ,产生无复制能力的病毒颗粒 ;用病毒感染NIH3T3细胞 ,测定病毒的滴度 ;将携带有目的基因的病毒颗粒转染靶细胞 ,绿色荧光蛋白 (GFP)为转染阳性细胞的标记物 ,FACS分离阳性细胞 ;Westernblot检测目的基因表达。结果 :用包装细胞 2 93产生的病毒颗粒 ,其滴度高达 3× 10 9;用携带目的基因的病毒转染悬浮细胞UT7,转染率为 60 % ,转染贴壁细胞MDA -MB -4 3 5 ,转染率为 99% ,转染原代培养的造血干细胞 ,转染率为 3 1% ;UT7细胞和MDA -MB -4 3 5细胞分别表达目的基因的产物 ,5个月以后 ,仍能提出滴度的病毒 ,并能有效地转染靶细胞 ,转入的目的基因能持续和稳定地表达 。
-
关键词
包装细胞293
重组逆转录病毒
基因转染
病毒载体
质粒
造血干细胞
-
分类号
R329.25
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
-