包裹细胞和组织的移植

包裹技术已应用于移植外科，植入包裹的细胞和组织可隔绝免疫抑制机制，避免了应用免疫抑制剂的并发症。这一技术已从实验研究走向临床试用，异种细胞也可应用，由此扩大了供体来源。

肝癌内皮细胞包裹肿瘤簇的研究进展

肝癌的血管侵犯及播散转移,是导致其疾病进展迅速、转移率高、手术切除率低和术后复发率高及预后差的重要因素。研究肝癌的血管生成及转移的机制尤为重要。肝癌组织中存在一种血管内皮细胞包裹肿瘤簇的独特结构。该结构与肿瘤直径、微血管侵犯呈正相关,并且与多种分子的表达密切相关,是患者不良预后影响因素之一。本文对肝癌内皮细胞包裹肿瘤簇的相关分子机制、临床特点、影像学特征及靶向免疫治疗进展进行综述。

尿Tamm-Horsfall蛋白包裹游离细胞的检测方法

Tamm-Horsfall protein(TH-P)属尿中正常成份.根据Abrass 氏等报道,用自制抗人TH-P荧光抗体检测34例正常人和83例泌尿系统疾病患者尿中TH-P 包裹游离细胞(简称TH-PCFC).结果((?)+SD),正常人0.4+1.8%。下尿路疾病3.1+3.3%,且荧光强度<±.在泌尿系统疾病患者中,肾实质疾病共55例,83.6%患者尿TH-PCFC>12%:而下尿路疾病和肾、输尿管结石共28例.100%患者尿中TH-PCFC<12%,两组有显著性差异(P<0.01).从而提供一种简便无痛苦的肾实质和下尿路疾病实验鉴别诊断方法.

单细胞纳米包裹技术的应用:单个细胞催化、细胞保护与治疗

背景:单细胞纳米包裹技术是用极薄(<100nm)纳米膜包裹单个细胞的一项新技术。被纳米包裹的细胞已被广泛应用于医学生物学研究等各个领域。目的:综述单细胞纳米包裹技术的最新研究进展及应用,展望该技术未来的发展方向。方法:利用计算机在PubMed、CNKI、万方数据库中进行相关文献检索,中英文检索关键词为"single cell,nano-coating,nano-encapsulation,cell-in-shellstructure;单个细胞,纳米覆盖,纳米包裹",最终纳入52篇文献进行综述。结果与结论:多聚电解质的层层自组装技术具有过程简单、可调节,能形成性质多样的纳米膜等特征,已成为最广泛应用于合成单细胞外有机纳米膜的技术。应用多酚类物质的广泛黏附性及某些有机物能在细胞外自聚集的特性,也可形成性能较好的有机纳米包裹。除此之外,利用仿生矿化技术及利用某些无机物能直接在细胞表面结晶的性质,可在细胞表面形成无机纳米包裹。被纳米包裹的细胞已被广泛应用于单个细胞催化、细胞治疗、细胞保护、细胞生物学研究等各个领域。在未来的研究中,被包裹细胞的用途将更多地指导纳米膜材料的选择。

一种可以实现稳定单细胞包裹的无进样器的微流控平台

液滴单细胞包裹技术是实现单细胞研究的有效方法。采用负压作为驱动力包裹单细胞,不再需要常规实验中会引起细胞吸附和降低单细胞包裹率的进样器和管路。在细胞悬浮溶液中加入碘克沙醇溶液调整溶液密度,进一步改善细胞沉降问题。研究负压大小和T型沟道几何尺寸对液滴频率和体积的影响以及碘克沙醇调整溶液密度后对单细胞包裹率的影响。该微流控平台可实现稳定的单细胞包裹,并为单细胞分析提供有利工具。

细胞膜包裹的纳米颗粒在疾病治疗中的应用

纳米技术因为其巨大的发展潜力,在医学应用中受到广泛关注,然而纳米颗粒容易触发宿主免疫清除系统,导致其无法达到预期治疗效果甚至产生毒副作用。近年来,使用细胞膜包裹纳米颗粒被证明可以有效地使纳米颗粒逃过免疫系统的清除。使用细胞膜包裹纳米颗粒,既能使纳米颗粒获得天然细胞膜的理化特征,还能使其具有膜来源细胞的锚定蛋白、抗原等生物学特征,从而实现免疫逃逸、长循环、药物靶向释放和调节免疫等独特能力,极大地增加了其在生物医学应用中的灵活性和可能性。本文综述了细胞膜包裹的纳米颗粒在疾病治疗中的应用现状,分析了这一新平台潜在的巨大应用价值,并描绘了这一新平台未来在疾病治疗中的前景。

基于红细胞的载药系统研究进展

基于红细胞(RBC)的新型药物输送系统近年来倍受关注,天然红细胞是机体固有成分,与传统药物载体相比,具有生物相容性高、体内半衰期长等优势。本文综述了红细胞药物载体的特点、制备方法及其载药的最新研究进展;同时,介绍了近年来出现的新型红细胞膜药物输送系统即红细胞膜包裹纳米粒(RBC-NP)和红细胞膜纳米海绵技术。

一种基于微流控技术选择性地固定和释放细胞的方法

开发了一种利用微流控芯片选择性地固定和释放单个细胞的方法。该芯片由透明玻璃和有机高聚物PDMS(Polydimethylsiloxane)两种材料组成,利用微加工技术,在芯片内部设计出微米级别的特殊沟道,并结合微气阀的使用,控制芯片内流体的流动状态,从而有效地控制细胞的运动状态,实现细胞选择性地固定和释放。芯片可分为两部分,前部分基于流聚焦的原理合成水凝胶珠并将细胞包裹在水凝胶珠内,对细胞形成保护层,避免操作过程中对细胞造成机械损伤,使细胞保持良好的活性,后部分利用微气阀对包裹有细胞的水凝胶珠进行固定和释放,从而实现细胞的固定和释放。细胞固定后,可对细胞进行实时原位观测,研究细胞的生长过程和对药物的反应。同时,通过调节细胞的浓度,包裹在水凝胶珠里的细胞的个数可以控制为单个水平,从而实现单个细胞的分析。

巨噬细胞膜仿生纳米递药系统在疾病靶向治疗中的应用

近年来,基于细胞膜包裹纳米粒的仿生纳米递药系统发展迅速,在多种疾病中表现出比传统纳米递药系统更高的生物相容性及疗效。巨噬细胞作为免疫系统的成员,与多种疾病的发生、发展息息相关。巨噬细胞源自单核细胞,受到相应刺激后,可极化为M1型和M2型:M1型巨噬细胞参与促炎反应,M2型巨噬细胞参与抗炎反应。本文综述了近年来巨噬细胞膜包裹纳米粒的仿生纳米制剂在疾病靶向治疗中的应用现状,结果显示,巨噬细胞膜包裹纳米粒的仿生纳米制剂在恶性肿瘤(乳腺癌、结直肠癌、黑色素瘤、脑胶质瘤)、阿尔茨海默病、肝脏缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化等治疗中都显现出了高靶向性和低免疫原性,但目前集中于抗肿瘤研究,且都处于实验室研究阶段。

角膜碱烧伤后大鼠角膜新生血管的细胞学研究

背景微血管壁由周细胞和血管内皮细胞组成，以往人们对血管系统的研究主要集中于血管内皮细胞，而对血管周细胞的研究较少。目的观察角膜碱烧伤后新生血管形成过程中的血管内皮细胞和周细胞的变化，探讨周细胞对新生血管生长的影响。方法36只健康成年SPF级sD大鼠，浸有1mol／LNaOH的4mm自制涂药器放置于右眼角膜中央3s，制作碱烧伤动物模型，3只正常sD大鼠作为正常对照。分别于角膜烧伤后1、2、3、5、7、10d各处死6只大鼠获取平行于角膜缘的环形切片，采用双重免疫荧光染色法检测CD31和α—SMA在角膜组织的表达，以分别评估血管内皮细胞和周细胞的分布，观察角膜碱烧伤后二者在角膜组织中的动态变化。光学显微镜下分别计数抗Ot—SMA阳性的周细胞数和抗CD31阳性的内皮细胞数，以二者的比值作为周细胞包裹指数（PCI），定量分析角膜碱烧伤后新生血管对周细胞的募集情况。结果角膜碱烧伤后1dCD31即可在角膜浅基质层表达，呈红色荧光，随着角膜碱烧伤时间的延长，CD31在角膜组织中的表达逐渐增加并进入深基质层，至角膜碱烧伤后7d表达的细胞数减少。呈绿色荧光的α一SMA在角膜碱烧伤2d于角膜浅基质层表达，在实验观察期内表达量均少于CD31，至碱烧伤后7d，残留的CD31阳性细胞被α—SMA阳性细胞包裹，未被包裹的CD31阳性细胞多数发生消退。碱烧伤后1、2、3、5、7、10d的PCI分别为0、16．07％、11．95％、43．84％、73．97％、86．21％，呈现递增的趋势。结论大鼠角膜碱烧伤后周细胞对血管内皮细胞的包绕可能对新生血管的成熟与稳定发挥重要作用。

一种新的肿瘤血管转移途径血管包裹肿瘤细胞巢及其在肝细胞癌中的影像学研究进展

肿瘤转移是肿瘤患者治疗后复发和死亡的主要原因。血管包裹肿瘤细胞巢(VETC)是不依赖于上皮间质转化的一种新的非侵袭性肿瘤血管转移途径,其以肿瘤巢的方式发生整体转移。VETC广泛存在于各种肿瘤组织中,常见于肾细胞癌、滤泡状甲状腺癌和肝细胞癌(HCC)。存在VETC的肿瘤患者术后复发率较高,生存期较短,预后较差。该文中,重点阐述VETC的研究现状及其在HCC影像学研究中的进展。

红细胞膜包裹PLGA纳米粒的制备和体外毒性及药物释放初探

目的:制备红细胞膜包裹PLGA纳米粒(RBC-NP)并进行结构表征、稳定性及体外毒性和药物释放的探究。方法:纳米沉淀法制备PLGA纳米粒(PLGA NP);脂质体挤压法制备红细胞膜和RBC-NP;Malvern ZS90测定粒径和分散系数;透射电镜(TEM)观察RBC-NP的形态。将DiOC18(3)载入RBC-NP和PLGA NP,探究二者的药物体外释放特性。采用CCK8法检测细胞的相对增殖率,比较RBC-NP与PLGA NP的细胞毒性。结果:RBC-NP与PLGA NP的粒径之差为11.1~14.2 nm,分散系数在0.131~0.155。TEM显示RBC-NP呈壳-核结构,核心为PLGA,外包裹单层红细胞膜。RBC-NP在PBS和超纯水中6 d内均保持稳定。RBC-NP具有良好体外缓释作用。0.25,0.5,1 mg·m L^(-1)3组中,RBC-NP的细胞相对增殖率均显著性高于PLGA NP(P<0.01)。结论:具有壳-核结构的RBC-NP已被成功制备,具有药物缓释作用且体外毒性显著降低。

肝癌内皮细胞包裹肿瘤细胞团与VEGF表达的意义

目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达与肝癌形成内皮细胞包裹的肿瘤细胞团(ECTC)的关系及其与肝癌复发预后的关系。方法选取根治性切除肝癌组织石蜡标本90例,采用免疫组化方法检测标本ECTC形成情况及VEGF表达情况,分析两者相关性及与预后关系;多因素分析影响肝癌预后的独立危险因素。结果 90例肝癌组织中42例(46.7%)存在ECTC结构,61例(67.8%)VEGF表达阳性。VEGF与形成ECTC具有明显相关性(rs=0.305,P=0.003),两者均与肿瘤复发相关(rs=0.269,rs=0.174)。按有/无ECTC及VEGF表达情况,将患者分为A组(ECTC-/VEGF-)、B组(ECTC+/VEGF-;ECTC-/VEGF+)、C组(ECTC+/VEGF+)。A组1、3、5年无瘤生存率分别是92.0%、72.0%和32.0%,B组分别为88.9%、51.9%和14.8%,C组分别为78.9%、15.8%和2.6%,差异有统计学意义(χ2=24.101,P<0.01)。A组的1、3、5年生存率分别是96.0%、80.0%和64.0%,B组分别为96.3%、77.8%和37.0%,C组分别为92.1%、36.8%和18.4%,差异有统计学意义(χ2=18.358,P<0.01)。多因素分析显示TNM分期、ECTC及VEGF是影响生存的独立危险因素。结论 VEGF与形成ECTC具有明显相关性,两者是影响肝癌长期生存的独立危险因素。

壳聚糖/Fe_3O_4/聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-丙烯酸)/大肠杆菌复合微囊的制备与表征

为了保持细胞的生物活性,基于皮克林乳液开发了条件温和的细胞包裹技术,成功地制备了壳聚糖/Fe3O4/聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-丙烯酸)/大肠杆菌复合微囊。首先采用微波辅助分散聚合法和共沉淀法分别制备了聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-丙烯酸)(P(NIPAM-co-AAc))微凝胶与油酸改性的Fe3O4纳米粒子,并用其作为稳定剂制备皮克林乳液。最后大肠杆菌(E.coli)加入水相后分散在乳液液滴内部,使用异硫氰酸荧光素标记的壳聚糖(FITC-CS)交联油水界面的Fe3O4与P(NIPAMAAc)微凝胶形成微囊。通过扫描电镜、透射电镜和激光共聚焦荧光显微镜(LCSM)对制备的凝胶、纳米粒子和复合微囊的形貌结构和组成进行了观察和分析。